Sıçanlarda oluşturulan bilateral arka bacak (İ/R) zedelenmesi modelinde arjinaz-1/2 inhibisyonunun kardiyovasküler yanıt ile arteriyel, kardiyak ve renal dokulardaki enflamatuvar değişiklikler üzerindeki etkisinin araştırılması
Investigation of the effects of arginase-1/2 inhibition on cardiovascular response and inflammatory changes in arterial, cardiac, and renal tissues in a bilateral hind limb (I/R) injury model in rats
- Tez No: 1024375
- Danışmanlar: PROF. DR. BAHAR TUNÇTAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Mersin Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Eczacılık Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Farmakoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tezde, sıçanlarda oluşturulan bilateral arka bacak iskemi/reperfüzyon (İ/R) zedelenmesi modelinde nor-N-ω-hidroksi-L-arjinin (nor-NOHA) ile arjinaz-1/2 inhibisyonunun, ortalama arter basıncı (OAB), kalp hızı (KH) ve yaşam süresi ile müsküler, arteriyel, kardiyak ve renal dokulardaki nitrozatif/oksidatif stres ile ilişkili enflamatuvar değişiklikler üzerindeki etkisinin araştırılması amaçlanmıştır. Deneylerde kullanılan sıçanlar serum fizyolojik (SF) (kontrol grubu), İ/R+SF (İ/R grubu), nor-NOHA ve İ/R+nor-NOHA olmak üzere 4 gruba ayrılmıştır. Bilateral arka bacak İ/R zedelenmesi modelinin oluşturulması için, anestezi edilen sıçanların her iki arka bacağına trochanter major düzeyinde 3 saat süreyle turnike uygulanarak iskemi oluşturulmasının ardından, turnikeler açılarak reperfüzyonun sağlanması için 24 saat beklenmiştir. SF (4 ml/kg) veya SF içinde hazırlanan nor-NOHA (10 mg/kg; 4 ml/kg), sıçanlara reperfüzyondan 1 saat önce intraperitoneal yoldan enjekte edilmiştir. Bütün gruplarda yapılan çalışmalarda, sıçanların ilk OAB ile KH değerlerinin ölçülmesinin ardından, 3 ve 24 saat sonra ikinci ve üçüncü kayıtlar alınmıştır. Ayrıca, yapılan bu çalışmalar süresince mortalite gözlenmiştir. In vivo çalışmalarda uygulamaların tamamlanmasından 24 saat sonra, ketamin+ksilazin ile anestezi edilen sıçanların vena cava caudalis'inden kan alınmasının ardından, hedef organ olarak gastroknemius kası ile uzak organlar olarak torasik aort, renal arter, kalp ve böbrek izole edilmiştir. Sıçanların ötanazisi, anestezi altında eksanguinasyon yöntemi ile gerçekleştirilerek deney protokolü sonlandırılmıştır. Kanlardan ayrılan serum örnekleri ile izole edilen dokuların bir bölümü, nitrit ve prostaglandin (PG) I2 düzeyleri ile protein ekspresyonu ölçümü çalışmalarında kullanılmıştır. Dokuların kalan bölümünde ise, enflamasyon ve zedelenmeye ilişkin değişikliklerin belirlenmesi amacıyla hematoksilen ve eozin boyama yöntemi kullanılarak histopatolojik çalışmalar gerçekleştirilmiştir. Nitrit ve PGI2 düzeylerinin ölçülmesi için sırasıyla diazotizasyon yöntemi ve enzyme-linked immunosorbent assay kiti kullanılmıştır. Dokularda fosforile olmamış ve/veya fosforile arjinaz-1, arjinaz-2, nükleer faktör (NF)-kB p65, indüklenebilir nitrik oksit (NO) sentaz (iNOS), endoteliyal NOS (eNOS), vazodilatör ile uyarılan fosfoprotein (vasodilator-stimulated phosphoprotein; VASP), gp91phox, p47phox, 3-nitrotirozin (3-NT), siklooksijenaz (cyclooxygenase; COX)-2, interlökin (interleukin; IL)-1β ve β-tübülin proteinlerinin ekspresyonu/etkinliği özgül primer ve sekonder antikorlar kullanılarak immunoblotting yöntemi ile ölçülmüştür. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, iskemiden 3 ve reperfüzyondan 24 saat sonra OAB sırasıyla 36 ve 41 mmHg azalmış, KH sırasıyla 122 ve 69 atım/dakika artmıştır. Reperfüzyondan 24 saat sonra sıçanların serumları ile müsküler, arteriyel, kardiyak ve renal dokularında nitrit ve PGI2 düzeylerinin yanı sıra, dokularında arjinaz-1, arjinaz-2, NF-kB p65, iNOS, VASP, gp91phox, p47phox, 3-NT, COX-2 ve IL-1β ekspresyonunun/etkinliğinin artmasına karşın, eNOS ekspresyonu/etkinliği azalmıştır. Nor-NOHA, İ/R'nin neden olduğu bu değişiklikleri önlemiştir. Ayrıca, nor-NOHA sıçanların dokularında İ/R'nin neden olduğu histopatolojik değişikliklere ilişkin puanlardaki yükselmeyi azaltmıştır. Bulgularımız, arjinaz-1/2 inhibisyonunun, alt ekstremite İ/R'sinin neden olduğu NF-kB/iNOS/NO/VASP, NOX2/PON, NF-kB/COX-2 ve NF-kB/IL-1β yolları aracılığıyla artan nitrozatif/oksidatif strese bağlı olarak gelişen kardiyovasküler yanıtın bozulması ile müsküler, kardiyovasküler ve renal doku zedelenmesini önleyebileceğini düşündürmüştür.
Özet (Çeviri)
In this thesis, it was aimed to investigate the effect of arginase-1/2 inhibition with nor-N-ω-hydroxy-L-arginine (nor-NOHA) on mean arterial pressure (MAP), heart rate (HR) and survival, as well as inflammatory changes related to nitrosative/oxidative stress in muscular, arterial, cardiac, and renal tissues, in a bilateral hindlimb ischemia/reperfusion (I/R) injury model induced in rats. The rats used in the experiments were divided into 4 groups: saline (control group), I/R+saline (I/R group), nor-NOHA, and I/R+nor-NOHA. To establish the bilateral hind limb I/R injury model, a tourniquet was applied to both hind legs of anesthetized rats at the trochanter major level for 3 hours to create ischemia, then the tourniquets were opened and 24 hours were waited to ensure reperfusion. Saline (4 ml/kg) or nor-NOHA (10 mg/kg; 4 ml/kg) prepared in saline was injected into rats intraperitoneally 1 hour before reperfusion. In the studies conducted in all groups, after the first MAP and HR values of the rats were measured, the second and third records were taken 3 and 24 hours later. Additionally, mortality was observed during these studies. In in vivo studies, 24 hours after the completion of the experiments, the gastrocnemius muscle (as a target organ) and the thoracic aorta, renal artery, heart, and kidney (as distant organs), were isolated after blood was taken from the vena cava caudalis of rats anesthetized with ketamine+xylazine. The experimental protocol was terminated by euthanasia of the rats using the exsanguination method under anesthesia. Serum samples separated from blood, and some of the isolated tissues were used in studies to measure nitrite and prostaglandin (PG) I2 levels and protein expression. In the remaining part of the tissues, histopathological studies were carried out using the hematoxylin and eosin staining method to determine changes related to inflammation and injury. The diazotization method and the enzyme-linked immunosorbent assay kit were used to measure nitrite and PGI2 levels, respectively. In tissues, unphosphorylated and/or phosphorylated arginase-1, arginase-2, nuclear factor (NF)-kB p65, inducible nitric oxide (NO) synthase (iNOS), endothelial NOS (eNOS), vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP), gp91phox, p47phox, 3-nitrotyrosine (3-NT), cyclooxygenase (COX)-2, interleukin (IL)-1β and β-tubulin proteins was measured by immunoblotting method using specific primary and secondary antibodies. Compared with the control group, 3 hours after ischemia and 24 hours after reperfusion, MAP decreased by 36 and 41 mmHg, respectively, and HR increased by 122 and 69 beats/min, respectively. 24 hours after reperfusion, while the nitrite levels in the serum and muscular, arterial, cardiac, and renal tissues as well as the expression/activity of arginase-1, arginase-2, NF-kB p65, iNOS, VASP, gp91phox, p47phox, 3-NT, COX-2, and IL-1β were increased, the expression/activity of eNOS was decreased. Nor-NOHA prevented these I/R-induced changes. Additionally, nor-NOHA reduced the rise in scores of histopathological changes caused by I/R in tissues of rats. Our findings suggested that inhibition of arginase-1/2 can prevent muscular, cardiovascular and renal tissue injury by impairment of the cardiovascular response due to increased nitrosative/oxidative stress through the NF-kB/iNOS/NO/VASP, NOX2/PON, NF-kB/COX-2, and NF-kB/IL-1β pathways caused by lower extremity I/R.
Benzer Tezler
- Sıçanlarda oluşturulan bilateral arka bacak iskemi/reperfüzyon zedelenmesi modelinde rıpk1 inhibisyonunun kan basıncı ve kalp hızı ile kardiyak, renal, pulmoner, hepatik ve serebral dokulardaki nekroenflamatuvar değişiklikler üzerindeki etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of ripk1 inhibition on blood pressure, heart rate, and necroinflammatory changes in cardiac, renal, pulmonary, hepatic, and cerebral tissues in a bilateral hind limb ischemia/reperfusion injury model in rats
ELİF İKİZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Eczacılık ve FarmakolojiMersin ÜniversitesiEczacılık Farmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BAHAR TUNÇTAN
- Sıçanlarda LPS ile oluşturulan septik şok modelinde uzaktan iskemik ön koşullandırmanın artan nitrozatif/oksidatif strese bağlı olarak gelişen kardiyovasküler yanıt ve enflamatuvar doku zedelenmesine karşı koruyucu etkisine U-II/UT yolunun katkısının araştırılması
Investigation of the contribution of U-II/UT pathway to the protective effect of remote ischemic preconditioning against cardiovascular response and inflammatory tissue injury due to increased nitrosative/oxidative stress in LPS-induced septic shock model in rats
PARINAZ AMINI DIDANI
Yüksek Lisans
Türkçe
2026
Eczacılık ve FarmakolojiMersin ÜniversitesiEczacılık Farmakoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BAHAR TUNÇTAN
- Ratlarda gliserol ile oluşturulan rabdomiyolizin indüklediği akut renal yetmezlikte kefirin etkinliği
Effects of kefir with the glycerol of rhabdomyolysis-induced acute renal failure in rats
PINAR KARABACAK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
Anestezi ve ReanimasyonSüleyman Demirel ÜniversitesiAnesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. FİLİZ ALKAYA SOLMAZ
- 6-OHDA parkinson modeli sıçanlarda substansiya nigra pars retikulataya uygulanan derin beyin stimulasyonunun etkileri
The effects of deep brain stimulation of the substantia nigra pars reticulata in 6-OHDA parkinsonism model in rats
EYLEM TURGUT
- Venöz yetmezlik modellerinde flep viabilitesinin incelenmesi
Investigation of flap viability in venous insufficiency models
MUSA BURAK ÇATALKAYA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahiİzmir Katip Çelebi ÜniversitesiPlastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ERSİN AKŞAM