Transformation of E. coli by electroporation
Elektrogözenek yöntemi ile E.coli transformasyonu
- Tez No: 10595
- Danışmanlar: PROF. DR. UFUK GÜNDÜZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Elektrogözenek, transformasyon, E.coli, plasmit DNA' sı, transformasyon verimi, Electroporation, transformaton, E.coli, plasmid DNA, transformation efficiency
- Yıl: 1990
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 94
Özet
Elektrogözenek yöntemi ile E.coli transformasyonu EREN, Emel Fed-Edebiyat Fakültesi Biyoloji Bölümü, Master Tezi Tez Yöneticisi Prof. Dr. Ufuk Gündüz 80 Sayfa, Eylül, 1990 ÖZET: Elektrogeçirgenlik yoluyla işlevsel DNA moleküllerinin hücre içine sokulması hücre biyolojisi açısından kullanışlı bir yoldur. Bu geçirgenlik safhası uygun koşullar altında hücre zarına elektrik alanı uygulamasıyla sağlanır. Geçirgenlik geçici olmakla birlikte birkaç dakika sürdürülebilir. İlgilenilen bileşikleri ve hücreleri içinde bulunduran bir tampon çözelti elektrik alanı uygulama sırasında hücre içeriğini yaşamsal bir zarar vermeksizin değişmesini sağlar. İkDalton moleküler ağırlığa kadar olan bileşikler ve nükleik asitler hücre zarının yeni yapısından geçebilirler. Bu çalışmada gram negatif bir bakteri olan Echerichia coli ' nin plasmid DNA'sıyla elektriksel alan uygulamalı transformasyonu denenmiştir. Cihaz çeşitli değerlerdeki elektriksel gerilimlerinin spektrofotometre küvetlerinin içinde bulunan elektrodlara boşalımını sağlamaktadır. Elektriksel alan şiddeti, puis devamlılık süresi, bakteriyel büyüme fazı, DNA ve başlangıç hücre konsantrasyonu, ön ve son bekletme süreçleri, farklı gözenek tamponları gibi değişkenler incelenerek iki değişik E.coli türünde denenmiştir.Aktarılan genlerin uygulama sırasında zarar görmediği ise plasmit DNA' sı üzerinde taşınan antibiyotik dirençliliği ve B-galaktosidaz enziminin işlerliğine bakılarak kontrol edilmiştir.
Özet (Çeviri)
Transformation of Echerichia coli by Electroporation EREN, Emel, Faculty of Arts and Sciences Department of Biology, Master of Science Supervisor, Prof.Dr. Ufuk Gündüz SO pages, September, 1990 ABSTRACT The introduction of functional DNA molecules into cells by electropermeabilization is a very powerful tool for molecular biology. When performed under suitable conditions, the electric field induction causes a permeabilized cell membrane state. This state is transient but can nevertheless be maintained for some minutes. The exchange of materials present inside and outside the cell membrane can take place without any harmfull effect on cell viability. This occurs simply by suspending the cells in a buffer containing the compounds of interest during electric pulsation. Molecules with molecular weight up to 1 kDa and nuclelic acids can cross this new organization of membrane. In this study, the possibility of electric field mediated transf orraaton of a gram-negative bacteria (Echerichia coli) with plasmid DNA was investgated. The apparatus was constructed to produce electric discharge of varying intensities between two electrodes in a spectrophotometer cuvette. The parameters including field strengths, pulse duration bacterial phase of growth, DNA input, initial cell concentration pre- Xlland post - incubational periods, different electroporation media were studied and optimized for two different E.coli strains. The integrity of the transformed genes were checked by following antibiotic resistance and B-galactosidase activities carried on plasmid DNA.
Benzer Tezler
- Transformation of saccharomyces cerevisiae with a shuttle vector plasmid DNA from E.Coli by electroporation
Saccharomyces cerevisiae hücrelerinin E.Coli'den alınmış bir 'shuttle vektör' plazmit DNA'sı ile elekroporasyon yöntemi ile transformasyonu
FARZİN ROUHVAND
- ermTR geninin eritromisine hassas Streptococcus pyogenes NZ131 ve Staphylococcus aureus RN4220 suşlarındaki etkilerinin incelenmesi
Effects of ermTR gene in erythromycin susceptible Streptococcus pyogenes NZ131 and Staphylococcus aureus RN4220
ERMAN ORYAŞIN
Doktora
Türkçe
2012
BiyolojiAdnan Menderes ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. H. HALİL BIYIK
DOÇ. DR. BÜLENT BOZDOĞAN
- Cloning sequencing and expression of L-lactate dehydrogenase gene from Clostridium thermocellum and isolation, characterization and transformation of various cellulolytic, thermophilic, ethanol-producing bacteria
Clostridium thermocellum'dan L-laktat dehidrogenaz geninin klonlanması ekspresyonu ve çeşitli sellülolitik, termofilik, etanol üreten bakterilerin izolasyonu, karakterizasyonu ve transformasyonu
MELEK ÖZKAN
Doktora
İngilizce
2002
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ
DOÇ. DR. ZÜMRÜT ÖGEL
- Cloning of 32-mer MaSP1 Gene into pBbB6c plasmid vector and transformation to Escherichia coli neb 10-beta
32-mer MaSP1 geninin pBbB6c plazmid vektörüne klonlanmasi ve Escherichia coli neb 10-beta'ya transformasyonu
RUVEYDA BENK
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyomühendislikAbdullah Gül ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ FATİH ORTAKCI
DR. YAHYA ÖZ