Geri Dön

Recovery of antithrombin III from milk by expanded bed chromatography

Genişletilmiş yatak kromatografisi ile antithrombin III'ün sütten geri kazanılması

  1. Tez No: 112176
  2. Yazar: AYŞE SİNEM ÖZYURT
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. KUTLU ÜLGEN, PROF. DR. BETÜL KIRDAR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya Mühendisliği, Chemical Engineering
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2001
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 96

Özet

ÖZET GENİŞLETİLMİŞ YATAK KROMATOGRAFİSİ KULLANILARAK ATIIFÜN SÜTTEN SAFLAŞTIRILMASI İÇİN YENİ BİR YÖNTEM GELİŞTİRİLMESİ Tedavi amaçlı proteinlerin üretimi için yüksek verim ve düşük maliyetli yeni ekipman ve maddelerin geliştirilmesi çok önemlidir. Antithrombin kanın pıhtılaşma sürecinin ana düzenleyicisi ve insanlarda klinik deneylere başlanan transgenik metodlarla üretilmiş ilk proteindir. Bu çalışmada, antithrombinin saflaştırılması için genişletilmiş yatak teknolojisi kullanılarak yeni bir yöntem geliştirilmiştir. Sütün yağı santrifüj yapılarak giderilmiş ve kasemleri ise çinko klorür ile çöktürülmüştür. Sonra, yağı alınmış ham süt iyon değiştirici dolgu maddesi içeren genişletilmiş bir yatağa direk olarak beslenmiştir. Katyon değiştiricisi (Pil) yüzde 100 adsorpsiyon ve yüzde 13 geri kazanma verimi verirken, anyon değiştiricisi (DE 52) ise yüzde 100 adsorpsiyon ve yüzde 84 geri kazanma verimi göstermiştir. 25 mM Tris-HCl (pH 8.0) ve 20 mM L-Histidine (pH 6.0) tampon çözeltileri kullanımı ile yüzde 84 geri kazanma verimi elde edilerek antithrombinin 5 katma kadar saflaştırılması gerçekleştirilmiştir. 2 M (NH^SCVün desorpsiyon ajanı olarak kullanımı iyon değiştirici genişletilmiş yatakta antithrombinin saflaştırılması için en uygun durum olarak belirlenmiştir. Genişletilmiş yatak boyunun, sabit yatak dolgu maddesinin 2 ila 3 katı olduğu durumlarda etkili bir genişletilmiş yatak adsorpsiyonu elde edilmiştir. Kromatografik kolon çaplan karşılaştırıldığında, kolon çapı 1 cm' den 2 cm' e çıktığı zaman adsorpsiyon veriminin de 2 katma çıktığı gözlenmiştir. Bununla beraber, ATIII en küçük çaplı kolonda, yani 1 cmlik kolonda, en fazla konsantre edilebilmiştir.

Özet (Çeviri)

IV ABSTRACT DEVELOPMENT OF A NEW METHOD OF PURIFICATION OF ATIII FROM THE MILK BY USING EXPANDED BED CHROMATOGRAPHY The development of new equipment and materials with low cost and high efficiency are very important in the production of therapeutic proteins. Antithrombin is the main inhibitor of blood coagulation and first transgenically produced protein which has entered human clinical trials. In the present work, a new method of purification for antithrombin was developed using expanded bed chromatography technique. Milk fat is removed by centrifugation and caseins are precipitated by zinc chloride. Next, crude skim milk is directly fed to an expanded bed column containing the ion exchange matrix. The use of a cation exchanger (PI 1) resulted in 100 per cent adsorption and 13 per cent recovery whereas the use of an anion exchanger (DE 52) resulted in 100 per cent adsorption and 84 per cent recovery of adsorbed antithrombin. 25 mM Tris-HCl (pH 8.0) and 20 mM L- Histidine (pH 6.0) buffers resulted in 84 per cent recovery and upto 5 fold purification of antithrombin. 2 M (NH^SC^ is determined to be the best eluting agent in ion exchange expanded bed chromatography of antithrombin. Effective expanded bed operation is achieved when the volume of expanded bed is between 2 or 3 times of the packed material. A comparison of column diameters revealed that the elution yields increase by 2 fold while the column diameter increases from 1 cm to 2.5 cm. However, ATIII is concentrated best in the smallest diameter column of 1cm.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    91758

    Sürekli ayaktan periton diyalizi hastalarında intraperitoneal uygulanan düşük molekül ağırlıklı heparinlerin koagülasyon-fibrinoliz döngüsü üzerine

    The Effects of intra peritoneally administered low molecular weight heparins on coagulation-fibrinolysis cascade at continuous ambulatory peritoneal dialysis patients

    KUTLAY NACİ TUTUCU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2000

    NefrolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AYKUT SİFİL

  2. Tez No

    82602

    Recovery of copper and zine from copper converter flue dust

    Bakır konverteri baca tozlarından bakır ve çinkonun geri kazanımı

    EMRAH GERÇEKER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1999

    Metalurji MühendisliğiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Metalurji ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET GEVECİ

  3. Tez No

    83633

    Çapraz akış mikrofiltrasyon sistemi kullanılarak s. cerevisiae ile peyniraltı suyundan proteinin geri kazanılması

    Recovery of protein from whey with s. cerevisiae by using crossflow microfiltration system

    BETÜL BAYGÜVEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Çevre MühendisliğiAtatürk Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BÜLENT KESKİNLER

  4. Tez No

    83662

    Amonyum sülfit ve asetonitril yardımıyla bakırlı liç çözeltilerinden bakır tozlarının kazanımı

    Recovery of copper powders from copper leach solutions by ammonium sulfide and acetonitrile

    DEMET SERGİLİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Kimya MühendisliğiAtatürk Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SABRİ ÇOLAK

  5. Tez No

    84489

    Sarıkaya yöresi altere granitlerinden feldspatin kazanımı

    Recovery of feldspar from altered granites of Sarıcakaya Region

    Y. HAKAN GÜRSOY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    Maden Mühendisliği ve MadencilikEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Maden Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. BAHRİ ÖTEKAYA

Geri Dön