Sephorose 4B affinite kromotografisi yöntemi ile aktin bağlayan proteinlerin saflaştırılması
Purification of actin binding proteins by using sephorose 4B affinity chromotography
- Tez No: 118140
- Danışmanlar: PROF.DR. RÜSTEM NURTEN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyofizik, Biophysics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2002
- Dil: Türkçe
- Üniversite: İstanbul Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyofizik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 65
Özet
5. ÖZET Çalışmada kullanılan EF-2, EF-1, S- 100, S-30 ve ribozom, sıçan karaciğer dokusundan; aktin, tavşan çizgili kas dokusundan, saflaştırıldı. tRNA sentetaz ise E.colf den elde edildi. EF-2'nin saflığı spektroskopik, elektro foretik yöntemlerle etkinliği ADP-ribozillenme ve poli Phe sistemlerinde incelendi. Elde edilen aktinin saflığı ise spektroskopik ve elektroforetik yöntemlerle belirlendi. Hazırlanan aktin-Sepharos 4B kolonu ile afinite kromatografîsi gerçekleştirildi. Sıçan karaciğerinden hazırlanan S- 100 kesimi bu kolondan geçirildiğinde aktin bağlayan proteinlerin kolon tarafından tutulduğu ve EF-la“nın bu yöntemle saflaştırılabileceği görüldü. Ayrıca S-30 kesiminin Sepharose 4B moleküler elek kromatografisiyle yüksek sukroz derişimi içeren ortamda yıkanması sonucu polizomlar ve F-aktin parçalanmadan kesimlendi. Yapılan ADP-ribozillenme deneyleri sonunda EF-2 ”nin yüksek molekül ağırlıklı bölgeye yayıldığı, ayrıca serbest olarak bir miktar bulunduğu saptandı. Aktin" nin Poli-fenilalanin sentez sistemine inhibe ettiği gösterildi 50
Özet (Çeviri)
ABSTRACT; EF-2, EF-1, S100, S30 and ribosomes were purified from rat liver tissue, actin from the rabbit muscle. tRNA was isolated from E.coli. The purity and relative quantity of EF-2 was assayed by use of electrophoresis and ADP-ribosylation. The quality of the purified actin was also assayed by electrophoretic methods. Actin-Sepharose 4B matrix was prepared and used for affinity chromatography. Rat liver S 100 fraction was applied to this column and EF-1 a was found among proteins retained by the column. It was concluded that EF-1 a can be purified by using this method. Elution of S30 through Sepharose 4B in a buffer containing high concentrations of sucrose appeared to allow fraction actin of polysomes and F-actin without degradation. Diphtheri-toxin mediated ADP-ribosylation precence of revealed that EF-2 in high molecular weight fractions, a finding which likely reflected an in vivo interaction of the factor with ribosomes and F-actin. Inhibition of the poly-Phe synthesis system was also observed. 51
Benzer Tezler
- Geobacillus thermodenitrificans HBB268 lipazının saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of lipase from Geobacillus thermodenitrificans HBB268
GİZEM ANTİKA
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
BiyokimyaAydın Adnan Menderes ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KUBİLAY METİN
- Demir oksit manyetik nanopartikülleri üzerine sığır karbonik anhidraz enziminin immobilizasyonu ve karakterizasyonu: co2 gideriminde potansiyel uygulanabilirliğinin araştırılması
Immobilisation and characterisation of bovine carbonic anhydrase enzyme on iron oxide magnetic nanoparticles: investigation of its potential applicability in co2 removal
MUHAMMET FIRAT
Doktora
Türkçe
2025
BiyoteknolojiBilecik Şeyh Edebali ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR
- Van gölü balığının (Chalcalburnus tarichii P.1811) beyin ve karaciğerinden asetilkolinesteraz (E.C.3.1.1.7) enziminin afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılması ve karakterizasyonu
The characterization of purification of acethylcholinesterase (E.C.3.1.1.7) enzyme from the brain and liver of lake Van fish
ESRİN AKMAN
- İnsan lökosit myeloperoksidazının saflaştırılması
Purification of myeloperoxidase from human leucocytes
LEYLA BİLGE DEVECİOĞLU
- Agrotis segetum (Dennis ve schiffermüller) (Lepidoptera: noctuidae) hemolenfindeki lektin aktivitesi
Lectin activity in agrotis segetum (Dennis and schiffermüller) haemolymph
NURSEL GÜL