Geri Dön

Optimization of regeneration and Agrobacterium mediated transformation of wheat (Triticum aestivum L.cv. Yüreğir 89)

Buğdayda (Triticum aestivum L.cv. Yüreğir 89) rejenerasyonun ve Akrobakteriuma dayalı transformasyonun optimizasyonu

  1. Tez No: 153408
  2. Yazar: DİDEM DEMİRBAŞ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MERAL YÜCEL, PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Buğday, Başak taslağı, Rejenerasyon, Agrobacterium tumefaciens, GUS, Geçici gen ifadesi. vıı, Wheat immature inflorescence, Regeneration, Agrobacterium tumefaciens, GUS, Transient gene expression
  7. Yıl: 2004
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 157

Özet

oz BUĞDAYDA (Triticum aestivum L. ev. Yüreğir 89) REJENERASYONUN VE AGROBAKTERİUMA DAYALI TRANSFORMASYONUN OPTÎMİZAS YONU Demirbaş, Didem Yüksek Lisans, Biyoteknoloji Bölümü Tez yöneticisi: Prof. Dr. Meral Yücel Ortak tez yöneticisi: Prof. Dr. Hüseyin Avni Öktem Eylül 2004, 138 sayfa Bu çalışmada Yüreğir ekmeklik buğday çeşidinde (Triticum aestivum) olgunlaşmamış başak taslağına dayalı kültürlerin rejenerasyon parametrelerinin optimize edilmesi amaçlanmıştır. Karanlıkta inkübasyon süresinin ve eksplant bölgesinin rejenerasyon başarısına etkisi test edilmiştir. Olgunlaşmamış başak taslakları, uç, orta ve dip olmak üzere üçe kesilmiş ve 2mg /L diklorofenoksiasetik asit içeren kallus oluşum besiyerine konulmuştur. Eksplantlar 6, 9, ve 13 hafta karanlık inkübasyon sürelerinden sonra rejenerasyon ortamına alınmıştır. Kallus rejenerasyon kapasitesi, köklenme ve çimlenme yüzdeleri olarak belirlenmiştir. Çimlenme yüzdeleri 6 hafta karanlık inkübasyonunda % 72.0 ve 9 hafta karanlık inkübasyonunda %64.1 olarak bulunmuş; buna karşın 13 hafta karanlık inkübasyon süresinde % 26.1 'e düşmüştür. Bu, uzun süren karanlık inkübasyonunun kallus rejenerasyon kapasitesini azalttığım göstermektedir. Başak taslağının uç, orta ve dip bölgelerinin rejenerasyon kapasiteleri arasında anlamlı vıbir fark gözlenmemiştir, ki bu da başak taslağının her bölgesinin daha sonra yapılacak gen aktarımı çalışmalarında eksplant kaynağı olarak kullamlabileceğini göstermektedir. Rejenerasyon çalışmalarının yanısıra, Yüreğir ekmeklik buğday çeşidine pAL156 ikili vektörünü içeren Agrobacterium tumefaciens AĞLI susu ile gen aktarımı parametreleri optimize edilmiştir. Transformasyon etkinliği uidA geninin geçici ifadesi takip edilerek histokimyasal GUS tayini ile belirlenmiştir. Üç-dört haftalık kalkışların Agrobakteriuma dayalı transformasyona iyi cevap verdiği bulunmuştur. Bakteri ve bitldnin birlikte inkübasyonu esnasmda çeşitli besiyerleri test edilmiştir. Fenolik bileşik asetosiringonun ve antioksidant olarak askorbik asitin birlikte inkübasyon esnasmda kullamlmasımn başarılı transformasyon için gerekli olduğu saptanmıştır.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT OPTIMIZATION OF REGENERATION AND AGROBACTERIUM MEDIATED TRANSFORMATION OF WHEAT (Triticum aestivum L. ev. Yüreğir 89) Demirbaş, Didem M. Sc. Department of Biotechnology Supervisor: Prof. Dr. Meral Yücel Co-supervisor: Prof. Dr. Hüseyin Avni Öktem September 2004, 138 pages The objective of this study was to optimize regeneration parameters of immature inflorescence culture of Triticum aestivum ev. Yüreğir-89. The effects of dark incubation period and explant region on regeneration success were tested. Immature inflorescences were cut into 3 pieces as tip, mid, base and put onto 2mg /L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid containing callus induction medium. These explants were taken to regeneration after 6, 9, 13 weeks of dark incubation period. The regeneration capacities of calli were determined as rooting and shooting percentages. Shooting percentages were found to be 72.0 % for 6 weeks of dark incubation and 64.1 % for 9 weeks of dark incubation while it decreases to 26.1 % in 13 weeks of dark incubation period. This showed that prolonged dark incubation period decreased regeneration capacity of the callus. There was no significant difference in regeneration capacities of tip, mid and base regions of immature IVinflorescences, which reveals the potential of every region of inflorescence to be used as explant source in further transformation studies. Besides regeneration studies, optimization of transformation parameters for Turkish wheat cultivar Yüreğir by using Agrobacterium tumefaciens AGLI containing binary vector pAL156 was performed. Transformation efficiencies were determined by monitoring the transient expression of uidA gene via histochemical GUS assay. Three to four weeks old calli were found to be more responsive to Agrobacterium-mediated transformation. Different media were tested for utilization during co-cultivation period. It was found that including phenolic compound acetosyringone along with ascorbic acid as an antioxidant was essential for succesful transformation.

Benzer Tezler

  1. Optimization of tissue culture, regeneration and Agrobacterium mediated transformation parameters in winter wheat cultivars (Kızıltan-91 and Bezostaja-01)

    Kışlık buğdaylarda (Kızıltan-91 ve Bezostaja-01) doku kültürünün, rejenerasyonun ve agrobakteriuma dayalı transformasyon parametrelerinin optimizasyonu

    MUSA KAVAS

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    PROF.DR. MERAL YÜCEL

  2. Optimization of regeneration and agrobacterium mediated transformation of suger beet (Beta vulgaris L.)

    Şeker pancarında (Beta vulgaris L.) rejenerasyon ve agrobakteriye dayalı transformasyonun optimizasyonu

    MEHMET CENGİZ BALOĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    PROF.DR. MERAL YÜCEL

  3. Fasulye bitkisinde (Phaseolus vulgaris L.) partikül bombardımanı (biyolistik) yöntemiyle gen aktarımının optimizasyonu

    Optimization of regeneration and transformation conditions for common bean (Phaseolus vulgaris)

    MUSTAFA ÇEVRİM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    BiyolojiErciyes Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    Y.DOÇ.DR. MİKAİL AKBULUT

  4. Optimization of a regeneration and transformation system for lentil (Lens culinaris M.,cv.Sultan-I) cetyledonary petioles and epicoyyls

    Mercimek kotiledon petiollerinde rejenerasyon ve transformasyon sistemlerinin optimizasyonu

    ABDULLAH TAHİR BAYRAÇ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2004

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HÜSEYİN AVNİ ÖKTEM

    YRD. DOÇ. DR. FÜSUN İNCİ EYİDOĞAN

  5. Domateste doku kültürü, genetik transformasyon ve CRISPR/CAS9 sistemi ile genom işleme optimizasyonu

    Optimization of tissue culture, genetic transformation and CRISPR/CAS9 system with genome processes in tomato

    ZAFER SEÇGİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyoteknolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MUSA KAVAS

    DOÇ. DR. KUBİLAY YILDIRIM