Geri Dön

Maternal dolaşımdaki fetal hücrelerin kullanılmasıyla Polimeraz Zincir reaksiyonuna(PCR) dayalı noninvazif prenetal tanı yöntemlerinin geliştirilmesi

Development of noninvasive prenatal diagnostic procedures by using fetal cells in the maternal circulation

PDF İndir

  1. Tez No: 156901
  2. Yazar: GÖZDE GÜVENÇ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. YAVUZ TAGA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2004
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 102

Özet

1. ÖZET Maternal Dolaşımdaki Fetal Hücrelerin Kullanılmasıyla PCR'a Dayalı Noninvazif Prenatal Tanı Yöntemlerinin Geliştirilmesi Herediter hastalıkların prenatal olarak kesin tanısının konulması fetal örneklerin toplanması esasına dayanmaktadır. Bu yöntemler invazif olan ve beraberinde bazı riskleri içeren yöntemlerdir. Bu nedenle invazif olmayan (girişimsel olmayan), anneye ve fetüse risk getirmeyen güvenilir ve etkin tanı yöntemlerine ihtiyaç vardır. Çalışmamızda maternal dolaşımdaki fetal hücrelerin kullanılmasıyla PCR'a dayalı noninvazif prenatal tanı yöntemleri geliştirildi. Bunun için fetal hücrelerin kullanılmasında kaynak olarak hem normal erişkin dolaşımda bulunmayan hem de maternal dolaşımda en fazla miktarda görülen fetal çekirdekli eritrositler (FNRBC) kullanıldı. Gebelikleri 8-20 hafta olan hamile kadınlardan toplanan kanlardan, FNRBC'ler öncelikle histopaque ile dansite gradyeni oluşturularak zenginleştirildi. Zenginleştirilen FNRBC'ler yüzeylerinde ekprese ettikleri transferin reseptörü yardımıyla ve değişik yaklaşımlar kullanılarak manyetik separator ile izole edildiler. Elde edilen FNRBC'lerden fetüse ait olan DNA'lar izole edildi. Bu DNA'lann anneye mi fetüse mi ait olduğunu ispatlamak için erkek fetüslerde bulunan ve anneye ait olmayan Y kromozumuna ait diziler farklı primerler ve farklı yaklaşımlar kullanılarak PCR ile çoğaltılarak gösterildi. En etkili şekilde cinsiyet tansının konulması için nested PCR ve RT-PCR bir arada kullanıldı. Çalışmamızda genetik analiz incelemesi, özellikle iki hastalık üzerinde odaklandı, Trizomi 18 ve Trizomi 21 (Down Sendromu). Trizomi 18' in pozitif DNA kontrolüne sahip olamamız nedeniyle bu kromozomal hastalık üzerinde ayırıcı bir tam yapma şansına ulaşılamadı. Down sendromunda sağlayabildiğimiz pozitif kontroller sayesinde ve D21S11F, D21S11R primerlerini kullanarak ve farklı yaklaşımlarla hem konvansiyonel PCR hem de RT-PCR(real time PCR) ile Trizomi 21 prenatal tanı yöntemleri geliştirildi. Sonuç olarak çalışmamızda yeni yaklaşımlarla FNRBC'Ierin izole edilmesi ve bu hücrelerden elde edilen fetal DNA örneklerinin genetik analiz yöntemlerinde kullanılabileceği ve girişimsel olmayan prenatal tanıda yararlı olacağı gösterilmiştir.

Özet (Çeviri)

2. SUMMARY Development of Noninvasive Prenatal Diagnostic Procedures by Using Fetal Cells in the Maternal Circulation Prenatal diagnosis depends on the correct collection of fetal specimens. However most of these procedures are invasive and possess certain risks. For this reason it is necasssary to develop noninvasive techniques which do not possess any risk for the fetus and the mother. In our study we developed noninvasive prenatal diagnosis methods using the fetal cells in the maternal circulation. For this approach as a source of the fetal cells fetal nucleated red blood cells (FNRBC) which are not present in the adult circulation and which are abundant in the maternal circulation have been chosen. FNRBCs were first enriched by a histopaque density gradient technique from the blood collected from pregnant women with a gestation of 8-20 weeks. The enriched FNRBCs are then isolated with the help of transferrin receptor that they express on the plasma membrane, by a magnetic separator. Fetal DNA was then obtained from these FNRBCs. In order to prove the heritage of these DNA to the fetus or the mother, certain primers specific to th Y chromosome were used for' PCR procedures. The most successful approach in the discrimination of sex was the utilization of nested PCR and RT-PCR (real time PCR) together. In our trial we focused on two chromosomal defect diseases, Trisomy 1 8 and Trisomy 21 (Down Syndrome). Since we could not obtain positive control DNA for Trisomy 18 we were unable to devise differential diagnostic procedure. On the othe hand we obtained positive control DNA for Down Syndrome and using primers D21S11R and D21S11F, and with different approaches we were able to develop both conventional PCR and RT-PCR procedures successfully. As a conclusion our trial has shown that by using different and innovative approaches isolation of FNRBCs from maternal blood and the DNA obtained from these fetal cells is useful in the genetic analysis studies and noninvasive prenatal diagnosis.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    411650

    Ordu ekolojik koşullarında bazı kuru fasulye (Phaseolus vulgaris L.) çeşit ve genotiplerinin verim, verim öğeleri ile tohum ve teknolojik özelliklerinin belirlenmesi

    Determination of yield and components with seed and technological characteristics of some dry beans (Phaseolus vulgaris L.) varieties and genotypes on in ecological conditions of Ordu

    YAŞAR ÖZBEKMEZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    ZiraatOrdu Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURİ YILMAZ

  2. Tez No

    411700

    Onkojenik Hpv genotiplerinin Pcr-elisa yöntemi ile saptanması

    Detection of oncogenic hpv genotypes by Pcr-Elisa assay

    ALPER KANDİŞER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    MikrobiyolojiAkdeniz Üniversitesi

    Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL GÜLTEKİN

  3. Tez No

    411772

    Bayan futbolcularda 8 haftalık hazırlık çalışmalarının bazı biyomotorik ve fizyolojik özellikler üzerine etkisinin araştırılması

    The investigation of the effects of eight weeks prepara-tory work on some biomotorical and physiological properties of female soccer players

    ARİF İMAMOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    SporOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Beden Eğitimi ve Spor Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MURAT ELİÖZ

  4. Tez No

    411781

    Besinsel liflere bağlı biyoaktif maddelerin antioksidan kapasitesi ve rejenerasyon davranışının quencher metoduyla belirlenmesi

    Determination of antioxidant capacity and regeneration behaviour of bioactive materials bound to dietary fibers with quencher procedure

    ECEM EVRİM ÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Gıda MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VURAL GÖKMEN

  5. Tez No

    411783

    Prenatal dönemde farklı dozlarda uygulanan diklofenak sodyumun merkezi sinir sistemi gelişimi üzerine toksik etkisinin araştırılması

    The toxic effects of different doses of diclofenac sodium on the development of the central nervous system exposed during prenatal period

    EBRU ELİBOL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Histoloji ve EmbriyolojiOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Anatomi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SÜLEYMAN KAPLAN

Geri Dön