Deney modelinde zona pellusida ve embriyonik örtü proteinlerinin modifikasyonunda transglutaminaz aktivitesinin rolü
The role of transglutaminenase activity on protein modifications of zona pellucida and embryonic coats
- Tez No: 157326
- Danışmanlar: PROF.DR. RAMAZAN DEMİR
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Morfoloji, Morphology
- Anahtar Kelimeler: Sıçan, zona pellusida, transglutaminaz, immunohistokimya, ultrastrüktür, Rat, zona pellucida, transglutaminase, immunohistochemistry, ultrastructure VI
- Yıl: 2004
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
ÖZET Transglutaminaz (TG) hücredışı matriks moleküllerini kovalent olarak bağlayarak dokuların yapılarını stabilize eden bir enzimdir. Zona pellusida, tüm Eutheria sınıfı (plasentalı) memelilerin ovositlerini çevreleyen saydam, hücredışı, glikoprotein yapıda bir matrikstir. Ovosite özgü bu yapı, folikülogenez süresince sentezlenir ve gebeliğin pre-implantasyon aşamasına değin kalıcıdır. Zona pellusidamn ince yapısı, biyokimyasal kompozisyonu ve biyolojik fonksiyonları gerçekleştirmek için gerekli olan moleküler mekanizmaların anlaşılması hem infertilite hem de yeni doğum kontrol yöntemlerinin geliştirilmesinde klinik öneme sahiptir. Bu çalışmanın amacı, TG immunoekspresyonunu döllenmemiş ve döllenmiş sıçan ovositlerinde belirleyerek, zona pellusidamn fonksiyonel özellikleriyle korelasyonunu kurmak ve TG enzimi ile sperm blokajı arasında bir ilişkinin olup olmadığım araştırmaktır. Ergin dişi Rattus norvegicus türü sıçanlar (n=36, 18 döllenmemiş, 18 döllenmiş) PMSG ve hCG ile süperovule edildi; fertil ya da vazektomize erkeklerle çifüeştirildi. Toplanan ovositlerde immunohistokimyasal olarak TG immünoekspresyonu, elektron mikroskobik olarak ince yapılan incelendi. Ayrıca western-blot tekniğiyle de ovaryum dokusunda TG ekspresyonu araştırıldı. Döllenmeden önce, sadece ovosit membranı ve kortikal sitoplazmik bölgeler kuvvetli TG immünopozitif olmasına karşın, döllenmeden sonra, kortikal sitoplazma daha az pozitifti; ovosit membranı ve perivitellin aralık daha fazla TG immunoreaktivitesi gösterdi. TG ekspresyonu aşamalı olarak yeni oluşmuş zigot ve 2-hücreli embriyonun zona pellusidasmda artarken, sitoplazma ve perivitellin aralıkta azaldı. TG aktivitesi ile korteks granüllerinin oluşumu ve salınımı arasında belirgin bir ilişki gözlendi. Sonuç olarak, TG immunoreaktivitesi ile döllenmeyi takiben monospermik bariyerlerin oluşumu arasında bir ilişkinin olduğu gözlenmektedir. Elektron mikroskobik olarak ZP gözenek çapı döllenmeden sonra anlamlı bir şekilde azaldı (pO.001). Halbuki ovosit ve zigotun çaplan arasında anlamlı bir fark yoktu. Ovositin yüzeyindeki gözenekler daha tekdüzeydi. Aksine zigotların gözenekleri çeşitli ve daha küçüktü. Zigotların ZP yapısı daha yoğundu. Çalışmamızda sıçan ovositi ve embriyolarında bölgesel ve zamansal heterojen bir TG immunoreaMvitesinin belirlenmesi zona pellusidamn döllenmedeki rolü açısından ilginçti. Aynca, ZP yapısının embriyolarda daha kompakt olması da zonanın bariyer görevini kanıtladı.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Transglutaminase (TG) is an enzyme that stabilizes the structure of tissues by covalently ligating extra cellular matrix molecules. The zona pellucida is a translucent, extra cellular, glycoprotein matrix that surrounds the oocytes of all Eutherian mammals. This oocyte-specific structure is secreted during folliculogenesis and persists throughout the pre-implantation stage of pregnancy. An understanding of the biochemical composition of the zona pellucida and the molecular mechanisms by which it fulfils its biological functions is of clinical importance in the context of both infertility and the development of new approaches to contraception. The aim of this study is to identify the immunoexpression of TG of unfertilized and fertilized rat oocytes, in order to correlate its expression with the functional characteristics of the zona pellucida. Sexually mature female Rattus norvegicus strain rats (n=36, 18 pregnant, 18 pseudopregnant) were stimulated to superovulate with PMSG and hCG, then mated with either fertile or vasectomized males. Post-ovulatory oocytes were collected after mating. The oocytes were collected and examined by immunohistochemistry technique. In this study, TG expression was found to be developmentally regulated. Before fertilization, only the oocyte membrane and the cortical cytoplasmic regions express TG. After the fertilization, cortical cytoplasm becomes less positive, while the oocyte membrane and the perivitelline space contained more TG immunoreactivity. TG expression is gradually upregulated in the zona pellucida of the newly established zygote and the 2-cell embryo, but downregulated in the cytoplasm and perivitelline space. We have observed that the pore size of the ZP decreased significantly after fertilization (pO.001). However the diameter of the oocyte and zygote did not differ significantly. Our SEM observations revealed that the surface structure of oocyte contained many pores. These pores were uniformly distributed over the ZP. On the other hand the pores of the zygotes were not uniform and smaller. The ZP of the zygotes were more compact. Our data show that rat oocyte and embryos contain spatially and temporarily heterogeneous TG immunoreactivity interestingly in the zona pellucida relative to fertilization. In addition we found that the outer morphology of the ZP of fertilized oocytes was more compact as an evidence for zona barrier.
Benzer Tezler
- Ketaminin erişkin dönemde strese maruz kalan sıçanlarda görülen depresyon benzeri davranışlar ve nöronal morfoloji üzerindeki etkileri
Effects of ketamine on depressive-like behavior and neuronal morphology in adults rats exposed to stress
ELİF POLAT ÇORUMLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
PsikolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiSinir Bilimleri Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. EMEL ULUPINAR
- Metformin'in yanık staz zonu üzerindeki etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of metformin on the burns stasis zone
HASAN EMRE ÖZDEMİR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiFırat ÜniversitesiPlastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ERHAN CAHİT ÖZCAN
- Deney hayvanı modelinde platelet rich plasma'nın tek taraflı üreteral obstrüksiyonda renal protektif etkisinin araştırılması
Investigation of renal protective effect of platelet rich plasma in unilateral ureteral obstruction in experimental animal model
EMRAH ÖZSOY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
ÜrolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MEHMET AKYÜZ
- Tavşan deney modelinde vertebral instabilitenin peridural fibrozis oluşumuna etkileri
Başlık çevirisi yok
KEMAL GÖKKUŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2002
Ortopedi ve TravmatolojiMarmara ÜniversitesiOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OSMAN GÜVEN
- Tavşan deney modelinde subkonjonktival botulinum toksin-a uygulamasının kornea sinir pleksusları ve kornea stroma hücreleri üzerine etkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the effect of subconjunctival botulinum toxin-a application on corneal nerve plexuses and corneal stroma cells in rabbit experimental model
CAN ŞİROLU
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Göz HastalıklarıYeditepe ÜniversitesiGöz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. İLKE BAHÇECİ ŞİMŞEK