Affinity chromatographic purification of recombinant human growth hormone
Afinite kromatografi yöntemiyle rekombinant insan büyüme hormonunun saflaştırılması
- Tez No: 177469
- Danışmanlar: PROF. DR. PINAR ÇALIK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2008
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 116
Özet
Çalışmanın amacı insan büyüme hormonunun fermentasyon ortamından afinite kromatografi yöntemi ile ayrılmasıdır. Bunun için, insan büyüme hormonuna özgün oligonükleotit aptamer, bir aptamer bankası içerisinden seçilmiş ve bu seçilen aptamer sentezlenip ligand olarak kullanılmıştır. Ligand-insan büyüme hormonu complex oluşumuna pH'ın etkisi araştırılmış ve en yüksek complex oluşumunun pH=7.0 değerinde gerçekleştiği tespit edilmiştir. İnsan büyüme hormonu fermentasyon ortamından %99.8 saflık, %41 geri kazanım ile ayrılmıştır. Denge verileri Langmuir tipi izoterme uymuş; doygunluk sabiti (q0) ve afinite denge sabiti (K) sırasıyla, 0.338 mg hGH/µmol aptamer ve 0.059 mg hGH/ml olarak hesaplanmıştır. Kolon deneyleriyle elde edilen denge verileri de Langmuir tipi izotermelerine uymuştur; doygunluk sabiti (q0) ve afinite denge sabiti (K) sırasıyla, 0.027 mg hGH/µmol aptamer ve 1.543 mg hGH/ml olarak hesaplanmıştır. Aptamer afinite kromatografi yöntemiyle, rekombinant insan büyüme hormonu yüksek saflıkla elde edilmiştir.
Özet (Çeviri)
The purpose of the study is to purify human growth hormone from the fermentation broth by affinity chromatography. For this purpose, human growth hormone specific oligonucleotide aptamers are selected among an aptamer library; selected oligonucleotides were synthesized and used as ligands. Effect of pH on ligand-human growth hormone complex formation was investigated and the highest complex formation was obtained at pH= 7.0. Human growth hormone is separated from the fermentation broth with 99.8% purity and 41% overall yield. The equilibrium data obtained was described by Langmuir type isotherm where saturation constant (q0) and affinity constant (K) are calculated as 0.338 mg hGH/µmol aptamer and 0.059 mg hGH/ml, respectively. Further, equilibrium data obtained using aptamer affinity column was described by Langmuir type isotherm where saturation constant (q0) and affinity constant (K) are 0.027 mg hGH/µmol aptamer and 1.543 mg hGH/ml, respectively. It is possible that, selected aptamer can be used for purification of bulk amounts of recombinant human growth hormone by using aptamer affinity chromatography.
Benzer Tezler
- Analysis and characterization of the Pichia pastoris secretome for pharmaceutical protein production
Pichia pastoris sekretomunun farmasötik protein üretimi için analizi ve karakterizasyonu
HATİCE PINAR KIRLI
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ HARUN KOKU
PROF. DR. PINAR ÇALIK
- Development and structural determination of antiangiogenic recombinant antibody structures for cancer treatment
Kanser tedavisine yönelik antianjiogenik rekombinant antikor yapılarının geliştirilmesi ve yapısal tayini
MELİS DENİZCİ ÖNCÜ
Doktora
İngilizce
2022
Biyomühendislikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
DR. AYLİN ÖZDEMİR BAHADIR
- Rekombinant anti-vegf üretilmesi ve nanokonjugatının geliştirilmesi
Preparation of recombinant anti-vegf antibody and development of it's nanoconjugate
DERYA KARAARSLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyoteknolojiAnadolu Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ARZU ERSÖZ
- Expression, purification, and characterization of recombinant human IL-2
Rekombinant insan IL-2'nin ekspresyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu
BUSE AKGÜN
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
- Hematopoetik hücrelerin üretilmesi, çoğaltılması ve farklılaşmasında görevli epo ve tpo'nun medikal biyoteknolojik ürün olarak üretilmesi, saflaştırılması ve karakterizasyonu
Production, propagation and differentiation of hematopoetic cells producing, purification and characterization of epo and tpo as medical biotechnological product
DUYGU DÜZGÜN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyomühendislikTokat Gaziosmanpaşa ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SEÇİL ERDEN TAYHAN