Geri Dön

Cloning, expression and purification of recombinant elongation factor ts from hyperthermophilic bacteria geobacillus anatolicus

Hipertermofilik geobacillus anatolicus bakterilerinden rekombinant elongasyon faktörü Ts'nin klonlanması, ekspresyonu ve saflaştırılması

PDF İndir

  1. Tez No: 181238
  2. Yazar: TOROS ŞAHİN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. NEŞE BİLGİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Mikrobiyoloji, Bioengineering, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2006
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Geobacillus anatolicus elongasyon faktörü Ts His kuyruklu bir rekombinant proteinolarak Escherichia coli içerisinde klonlanmış, ekpresyonu yapılmış ve saflaştırılmıştır. Buçalışmanın ilk adımı Geobacillus anatolicus tsf geninin nükleik asit dizisininbelirlenmesidir. Bu amaç için, Geobacillus anatolicus'a filogenetik olarak en yakınbakterilerin tsf ve tsf'ye komşu genleri kullanılarak tsf genini taşıyan kromozomal bölgeninçoğaltılması amacıyla uygun oligonükleotit primerleri tasarlanmıştır. Daha sonra, bu dizibilgisi kullanılarak, C terminal bölgesinde 6 ek Histidin amino asiti olan tam tsf geniniuygun bir ekspresyon vektörüne klonlamak amacıyla uygun primerler tasarlanmıştır. Buekspresyon vektörü, proteinin Escherichia coli içinde yüksek miktarda ekspresyonununsağlanması için kullanılmış ve proteinin saflaştırılması yapılmıştır. Rekombinant proteinihomojen bir şekilde saflaştırabilmek amacıyla Ni-afinite kromatografisi kullanılmıştır.Geobacillus anatolicus EF-Ts proteininin Escherichia coli EF-Tu proteinine bağlanmadatam olarak aktif olduğu bulunmuştur.

Özet (Çeviri)

Elongation factor EF-Ts from Geobacillus anatolicus was cloned, expressed andpurifed as a His-tagged recombinant protein in Escherichia coli. The first step in this studywas the determination of the nucleic acid sequence of the tsf gene of Geobacillusanatolicus. In order to achive this first goal, sequence data for the tsf gene and theneighbouring genes of the the bacteria phylogenetically related to Geobacillus anatolicuswere used to design the appropriate oligonucleotide primers to amplify the chromosomalregion carrying the tsf gene. This sequence information was then used to design primers toclone the complete tsf gene including 6 additional histidine residues at its C-terminal intoan appropriate expression vector. This vector was used to express and purify the protein inhigh quantities in Escherichia coli. Ni-affinity chromotography was then used to purify therecombinant protein to homogeneity. Geobacillus anatolicus EF-Ts was found out to befully active in binding Escherichia coli EF-Tu.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    181199

    Cloning, expression and purification of recombinant elongation factor tu from hyperthermophilic bacteria geobacillus anatolicus

    Hipertermofilik geobacillus anatolicus bakterilerinden rekombinant elongasyon faktörü tu'nun klonlanması, ekspresyonu ve saflaştırılması

    BARIŞ AKALIN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2006

    BiyolojiBoğaziçi Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEŞE BİLGİN

  2. Tez No

    651927

    Transgenik tütünde CRISPR/CAS9 sistemi kullanılarak sistein proteaz gen (NtCP6) ekspresyonunun susturulmasına yönelik çalışmalar

    Studies for silencing the protease gen (NtCP6) expression by using CRISPR/CAS9 system in transgenic tobacco

    ÇİĞDEM BOZKURT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    BiyoteknolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ FATMA İNCİ ÖZDEMİR

    PROF. DR. YELDA ÖZDEN ÇİFTÇİ

  3. Tez No

    170895

    Cloning, expression and purification of the recombinant DNA polymerase I from the hyperthermophilic bacteria Geobacillus anatolicus

    Hipertermofilik Geobacillus anatolicus bakterilerinde rekombinant DNA polimeraz I'in klonlanması, ekspresyonu ve saflaştırılması

    MELİKE ÇAĞLAYAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2005

    Tıbbi BiyolojiBoğaziçi Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. NEŞE BİLGİN

  4. Tez No

    485252

    Cloning, heterologous expression and purification of PHI 29 DNA polymerase variants

    PHI 29 DNA polimeraz türevlerinin klonlanması, heterolog ekspresyonu ve saflaştırılması

    FATMA ARAS

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Biyokimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURAN DEVECİ AKSOY

  5. Tez No

    512370

    İnsan karbonik anhidraz VII enzim geninin eE coli'de klonlanması, ekspresyonu, rekombinant enzimin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin bu enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

    Cloning and expression of human carbonic anhydrase VII gene in E. coli, purification, characterization of recombinant enzyme and investigation of some antibiotics effects on enzyme activity

    HATİCE ESRA ASLAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR

Geri Dön