Streptomyces yokosukanensis ATCC 25520'de δ-aminolevulinik asit dehidrataz enziminin biyokimyasal karakterizasyonu
Isolation and biochemical characterization of δ-aminolevulinic acid dehydratase from Streptomyces yokosukanensis ATCC 25520
- Tez No: 181410
- Danışmanlar: PROF.DR. MUHSİN KONUK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: ALAD, enzim karakterizasyonu, Streptomycete, Streptomyces yokosukanensis, saflaştırma, ALAD, enzyme characterization, Streptomycete, Streptomycesyokosukanensis, purification
- Yıl: 2006
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Afyon Kocatepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 74
Özet
Bu çalışmada, nebularin olarak adlandırılan bir pürin ribosit antibiyotiğisentezleyen Streptomyces yokosukanensis ATCC 25520, δ-aminolevulinik asitdehidrataz (ALAD)'ının, amonyum sülfat ile çökeltmesi ve Sefakril S-200'de jelfiltrasyon tekniği sonucunda 90.76 kat saflaştırma gerçekleştirilmiştir. ncelenenverilere uygun olarak, enzimin tek polipeptidden oluştuğu ve molekülerağırlığının 34.8 kDa olduğu SDS-PAGE yöntemi ile saptanmıştır. Enziminoptimum sıcaklığı 45 ºC, ve optimum pH 'sı 8 olarak belirlenmiştir. Bazı ağırmetallerin; Pb2+ %61, Mg2+ %26, Co2+ %20, Fe3+ %51, Mn2+ %26, Zn2+ %36oranlarında inhibe ettiği ve ilginç olarak, Ni+2'nin enzim aktivitesini 15% arttırdığısaptanmıştır. Lineweaver-Burk grafiğinde, Vmax 30.3 µmol PBG/saat/mg proteinve Km değeri 1.21 mmol/reaksiyon karışım bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
In this study, δ-aminolevulinic acid dehydratase (ALAD) fromStreptomyces yokosukanensis ATCC 25520, producer of an unusual purineriboside antibiotic called nebularine, was purified and characterized. Purificationprocuders involved with ammonium sulphate precipitation and following gelfiltration techniques by use of Sephacryl S-200. After Gel filtration a 90.76-foldpurification was obtained. According to the data obtained from investigation, theenzyme was found to be a single polypeptide having molecular mass around 34.8kDa. This was determined by SDS-PAGE. Its optimal temperature around 45 ºC,and optimal pH was found to be 8. Some heavy metals inhibited its activity ratioof Pb2+ %61, Mg2+ %26, Co2+ %20, Fe3+ %51, Mn2+ %26, Zn2+ %36. Surprisingly,Ni+2 increased its activity up to 15%. In Lineweaver-Burk plot, Vmax was found as30.3 µmol PBG/h/mg of protein and Km value 1.21 mmol/reaction mixture.
Benzer Tezler
- Streptomyces clavuligerus'ta demir regülasyonu ve sekonder metabolit üretimi arasındaki ilişkinin belirlenmesi
Determination of interaction between iron regulation and secondary metabolite production in Streptomyces clavuligerus
BÜŞRA ABANOZ SEÇGİN
Doktora
Türkçe
2024
BiyoteknolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ASLIHAN KURT KIZILDOĞAN
- Streptomyces clavuligerus'ta AdpA pleiotropik regülatörünün antibiyotik biyosentezi üzerine etkisinin belirlenmesi
Determination of the effect of AdpA pleiotropic regulator on antibiotic biosynthesis in streptomyces clavuligerus
ÇİĞDEM OTUR
Doktora
Türkçe
2024
BiyoteknolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ASLIHAN KURT KIZILDOĞAN
- Streptomyces alboniger BA2'nin yeni doğal ürünlerinin karakterizasyonu ve biyolojik aktiviteleri
Characterization and biological activity of new natural products from Streptomyces alboniger BA2
EVLİN MIZRAKLI
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyolojiDicle ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EBRU İNCE BOSTANCI
- Streptomyces violaceusniger kümesi (clade) üyelerinin rizosferden izolasyonu ve karakterizasyonu
Isolation and characterisation of members of the Streptomyces violaceusniger clade from rhizosphere
MERAL UÇAK DOĞRAMACI
Yüksek Lisans
Türkçe
2005
BiyolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. NEVZAT ŞAHİN
- Effect of homologous multiple copies of aspartokinase gene on cephamycin C biosynthesis in Streptomyces clavuligerus
Streptomyces clavuligerus'da apartokinaz geninin homolog çoklu kopyalarının sefamisin C üretimine etkisi
BİLGİN TAŞKIN
Yüksek Lisans
İngilizce
2005
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAY ÖZCENGİZ
DR. SEDEF TUNCA