Bazı nörokimyasal maddelerin sıçan beyninden mikrodiyaliz ile toplanması ve analitik yöntemlerle miktar tayini
Determination of certain neurochemicals in rat brain microdialysate by analytical methods
- Tez No: 195788
- Danışmanlar: PROF.DR. DİLEK DOĞRUKOL-AK
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Kimya, Pharmacy and Pharmacology, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Nörokimyasallar, Histamin, g-Aminobutirik Asit, Türevlendirme, Mikrodiyaliz, LC-MS, Neurochemicals, Histamine, g-Aminobutiric Acid, Derivatization, Microdialysis, LC-MS
- Yıl: 2007
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Anadolu Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 91
Özet
Bu çalismada siçan beyin mikrodiyalizatlarinda bazi nörokimyasal maddelerin tayini için elektrosprey iyonizasyonlu sivi kromatografi kütle spektrometri (ESILC- MS) yöntemi tanitilmaktadir. Iyon tuzagi kütle analizörü ile sekiz adet nörokimyasal (epinefrin, norepinefrin, dopamin, 3,4-dihidroksifenilasetik asit (DOPAC), histamin, g-aminobutirik asit, L-glutamat, asetilkolin) için kütle spektrumlari ve kütle parçalanmalari belirlendikten sonra sivi kromatografik ayirma kosullari incelenmistir. C18 kolon (2.1x100 mm, 3.5 ?m) ve % 0.1 asetik asit içeren su-asetonitril gradient hareketli faz sisteminde türevlendirici ajan olan 4-kloro-7-nitro-2,1,3-benzoksadiazol (NBD-Cl) ile türevlendirilerek ayrilan g- aminobutirik asit ve histamin için yöntemin validasyonu gösterilmistir. GABANBD için 267à249 m/z kütlesinden olusan parçalanma kütlesi, histamin için sadece 275 m/z ana kütlesi kullanilarak olusturulan kromatogramda miktar tayini yapilmistir. Dogrusal aralik g-aminobutirik asit için 10-500 ng.mL-1, histamin için 50-1000 ng.mL-1 bulunmustur. Yöntemin tayin sinirlari g-aminobutirik asit için 10 ng.mL-1, histamin için 50 ng.mL-1 olarak hesaplanmistir. Yöntemin GABA ve histamin için elde edilen dogrulugu % 98 dolayinda saglanan geri kazanim ile, tekrar edilebilirligi ise gün içi % 1.65-2.62, günler arasi % 1.23-4.93 bagil standart sapma degerleri ile gösterilmistir. Siçan beyninin ventral anterior nucleus, lateral hypothalamus ve corpus striatum bölgelerinden toplanan mikrodiyalizat örneklerinde g-aminobutirik asitin bazal düzeyleri ölçülerek sirasiyla 123.25±0.67, 151.41±18.53, 94.96±0.53 ng.mL-1 olarak bulunmustur.
Özet (Çeviri)
An electrospray ionization-liquid chromatography-mass spectrometry (ESI-LCMS) method is applied to the simultaneous determination of certain neurochemicals in rat brain microdialysate. The separation condition was examined for liquid chromatography after evaluation of mass spectra and mass fragments for eight neurochemicals (epinephrine, norepinephrine, dopamine, DOPAC, histamine, g-aminobutiric acid, L-glutamate, acetylcholine) by ion trap mass analyser. The method has been validated using C18 column (2.1x100 mm, 3.5 ?m) and gradient mobile phase containing 0.1 % glacial acetic acid in wateracetonitrile after derivatization of his tamine and g-aminobutiric acid with a fluorescent derivatization reagent of 4-chloro-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole (NBDCl). Characteristic precursor-to-product ion transitions, m/z 267à249 for GABANBD and only m/z 275 for histamin-NBD were monitored for the quantification. Linearity range was 10-500 ng.mL-1 for g-aminobutiric acid and 50-1000 ng.mL-1 for histamine. The limit of quantification was calculated as 10 ng.mL-1 and 50 ng.mL-1 for g-aminobutiric acid and histamine, respectively. Accuracy was shown 98 % method recovery for histamin and GABA. The method precision was shown by day to day repeatability and intermediate precision found as 1.65-2.62 % RSD and % 1.23-4.93 % RSD, respectively. Microdialysate sampling for g- aminobutiric acid and histamine was performed in ventral anterior nucleus, lateral hypothalamus and corpus striatum of rat brain and basal levels of g- aminobutiric acid were determined as 123.25±0.67, 151.41±18.53, 94.96±0.53 ng.mL-1 respectively.
Benzer Tezler
- Bazal ön uyaran aracılı inhibisyon değerlerine göre sıralanmış sıçanlardaki farmakolojik yanıt farklılıkları
Pharmacological response differences in rats sorted by baseline prepulse inhibition levels
SEMA ORAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
Eczacılık ve FarmakolojiUludağ ÜniversitesiTıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÖKHAN GÖKTALAY
- Nanopartiküller ile modifiye edilmiş karbon elektrotlarla elektrokimyasal tanı
Electrochemical detection using carbon electrodes modified with nanoparticles
ERKAN KARATAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERHAN BİŞKİN
- Bazı nörokimyasal bileşiklerin beyin dokusundan voltametri yöntemiyle tayini
Determination of some neurochemical compounds in brain tissue by voltammetry
PINAR TALAY PINAR
- İnsan omuriliğinde kokain ve amfetamin ile düzenlenen transkriptin (CART) lokalizasyonunun araştırılması
Investigation of the localization of cocaine and amphetamin-regulatedtranscript (CART) in the human spinal cord
ÖYKÜ DENİZ KANAT
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Anatomiİstanbul Medeniyet ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FERİHAN ÇETİN
PROF. DR. GÜLGÜN ŞENGÜL
- Epilepsi hastalarında kişilik özellikleri ve ilişkili etmenler
Personality traits and related factors in epilepsy patients
ESRA YAZICI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
PsikiyatriAtatürk ÜniversitesiRuh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NAZAN AYDIN