ß-galactosidase of Kluyveromyces lactis: Immobilization, characterization and hydrolysis behavior of enzyme
Kluyveromyces lactis ß-galaktozidaz enzimi: İmmobilizasyon, karakterizasyon ve hidroliz davranişi
- Tez No: 232975
- Danışmanlar: DOÇ. DR. CANAN TARI, PROF. DR. ŞEBNEM HARSA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Gıda Mühendisliği, Food Engineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2008
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 75
Özet
ß-galaktosidaz enzimi, atık peyniraltı suyu ve dondurma gibi tatlı vedondurulmuş ürünlerde laktoz kristalizasyonundan kaynaklanan bazı problemlerinönlenmesi sağlanmak amacıyla kullanılabildiklerinde büyük bir ticari önemesahiptirler. Tüm dünya üzerinde pek çok insan laktoz tahammülsüzlüğü sorunuyla karşıkarşıyadır ve laktaz preparatları bu kişiler tarafından kullanılmaktadır. Betagalaktozidazenzimi aynı zamanda laktozu galaktooligosakkaritlere parçalamasındandolayı prebiyotiklerin üretiminde de kullanılmaktadır. İmmobilize ß-galaktozidazpreparatları pek çok işlemde tercih edilmektedirler çünkü tekrar kullanılabilirler veaktivitelerini kimyasal kararlılıklarını kaybetmeden uzun süre koruyabilirler.Bu çalışmada kitosan-hidroksiapatit kompleks küreleri hazırlanmış ve ticariolarak sağlanan beta--galactosidaz enziminin (Kluyveromyces lactis) bu kürelereimmobilizasyonu gerçekleştirilmiştir. İmmobilizasyon mekanizması ve etki edenparametrelerin (başlangıç glutaraldehit konsantrasyonu, sıcaklık, pH, başlangıç laktazderişimi, katı matris-sıvı oranı) immobilizasyon mekanizmasına etkisi incelenmiştir.Optimum glutaraldehit derişimi 0,1% olarak tespit edilmiştir. Sıcaklık, ortamasitliği ve katı-sıvı oranının laktaz/kitosan-hidroksiapatit sisteminin çalışması içinoptimum değerleri sırasıyla 200C, pH 7.5 and 0.3g/ml Vk/Vs olarak belirlenmiştir. Aynızamanada immobilize enzimin ortam asitliği ve sıcaklık bakımından karakteristiği elealınmış ve pH 6-7.5 aralığında relatif aktivitesinin 83.2% sini koruduğu ve optiumumsıcaklığın hem immobilize enzim hem de serbest enzim için 370C olarak kaldığıgözlenmiştir. The Michaelis sabitlerine bakıldığı zaman ise, serbest enzim için Km andVmax değerlerinin sırasıyla 1.011 mM and 1098.9 ?mol ONP min?1 mg?1 protein,immobilize enzim için ise sırasıyla 9.5 mM and Vm 454.5 ?mol ONP min?1 mg?1 proteinolarak bulunmuş ve sonuçta immobilizasyonla birlikte reaksiyon hızında bir düşüşgözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
ß-galactosidase (lactase) enzyme is of great industrial interest, since it can be usedto solve problems associated with whey disposal and lactose crystallization in sweetenedand frozen dairy products such as ice cream. All over the world, many people sufferfrom lactose intolerance and lactase preparations are used as supplements for thesepersons. ß-galactosidase is also used to produce prebiotics since this enzyme hydrolyseslactose into galactooligosaccharides. Immobilized ß-galactosidase preparations arepreferred in many processes because they can be recycled and maintain their activitiesfor a long time without loosing their chemical stability.Novel cross-linked chitosan-hydroxyapatite composite support has beenprepared, lactase from Kluyveromyces lactis was immobilized onto these beads. Lactaseimmobilization mechanism and effect of factors such as initial glutaraldehydeconcentration, temperature, pH, initial lactase concentration, solid-liquid ratio onimmobilzation mechanism were studied.Optimum cross-linking was obtained at the glutaraldehyde concentration of 100mg/L. The optimum values of temperature, pH and solid/liquid ratio on lactase/HAChitosanwere found to be 200C, pH 7.5 and 0.3g/ml Vg/Vl, respectively. The pH andthermal stabilities of free and immobilized enzymes were also investigated and it wasobserved that the relative activity remained above 83.2% within pH 6-7.5 and maximumactivity yield was obtained at 370C for free and all immobilized enzymes. The Michaelisconstant Km and Vmax of immobilized and free enzyme on chitosan-hydroxyapatitecomposite beads were found to be 9.5 mM and Vm 454.5 ?mol ONP min?1 mg?1 proteinand 1.011 mM and 1098.9 ?mol ONP min?1 mg?1 protein, respectively.
Benzer Tezler
- Epoksi grubu içeren polimerler kullanılarak ß- galaktosidaz enziminin immobilizasyonu
Immobilization of ß- galactosidase by using epoxy polymers
MÜKERREM HALE TAŞYÜREK
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyoteknolojiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YEKTA GÖKSUNGUR
- ß-galaktozidaz ve glukoz izomeraz'ın eupergit desteğe kovalent immobilizasyonu ve immobilize enzimlerin laktoz hidrolizi ve glukoz izomerizasyonunda kullanılması
Immobilization of ß-galactosidase and glucose isomerase onto eupergit support and using of immobilized enzymes for lactose hyrolysis and glucose isomerization
DİLEK ALAGÖZ
- Farklı yöntemlerle immobilize edilmiş ß-galaktosidazın galaktooligosakkarit sentezi üzerine etkisi
The effect of ß-galactosidase immobilized by different methods on galactooligosaccharide synthesis
UMUT AYKUT
Doktora
Türkçe
2011
Gıda MühendisliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İSMAİL HAKKI BOYACI
YRD. DOÇ. DR. HASAN TEMİZ
- Beta-gakaktosidaz kullanımı ile galaktooligosakkarit sentezi ve sentezin yanıt yüzey yöntemi kullanımı ile optimizasyonu
Optimization of ß-galactosidase catalyzed synthesis of galactooligosaccharides using response surface methodology
ÖZGE CAN
- Beta-galaktosidaz enzim üretiminin optimizasyonu ve saflaştırılması
Optimization of beta-galactosidase enzyme production and its purification
SEVAL DAĞBAĞLI
Doktora
Türkçe
2009
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YEKTA GÖKSUNGUR