Primer sıçan karaciğer hücrelerinin hidrojel yapılı kitosan ve alginat gibi polimerlerde enkapsülasyonu ve ın vıtro ortamda bazı özelliklerinin incelenmesi
Encapsulation of primary rat liver cells in chitosan and alginate hydrogel polymers and characterization of their in vitro properties
- Tez No: 232983
- Danışmanlar: PROF. DR. Y. MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyomühendislik, Kimya, Bioengineering, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2008
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 141
Özet
Bu çalışmada, primer sıçan hepatositleri, (i) üç tabakalı alginat-kitosan-alginat (AKA) kapsülleri ile, (ii) kalsiyum alginat ve (iii) kitosan mikrokürelerinde enkapsüle edilerek, in vitro ortamda, statik ve dinamik kültür koşullarında kültürleri gerçekleştirilmiştir. Optimum hücre yoğunluğunda enkapsüle edilen hepatositlerin hücre canlılığı ve metabolik aktiviteleri belirlenerek tek tabaka kültür sistemleri ile karşılaştırılmıştır. Farklı membran sistemlerinde enkapsüle edilen hepatositlerin enkapsülasyon verimlerinin, %90'ın üzerinde olduğu belirlenmiştir. Özellikle AKA mikrokapsül sistemi içerisinde enkapsüle edilen hepatositlerin, canlılıklarını büyük oranda korudukları MTT testi ile kanıtlanmıştır. AKA mikrokapsüllerdeki hepatositlerin metabolik aktivitelerinin, alginat ve kitosan mikrokürelerdekilerden daha yüksek olduğu bulunmuştur. Mikroyerçekimli ortamı simüle eden STLV biyoreaktörüyle sağlanan dinamik kültür koşullarında, üç farklı membran sistemi içerisinde enkapsüle edilen hepatositlerin canlılık ve metabolik aktivitelerinin daha uzun sürelerle korunabildiği belirlenmiştir. Üç boyutlu yapılarda enkapsüle edilen hepatositler, -80 oC ve -196 oC'de (sıvı azot içerisinde) dondurularak belirlenen periyotlarda saklanmış; çözme işleminden sonra hücrelerin canlılıkları ve metabolik aktiviteleri yeni izole edilmiş hepatositlerin tek tabaka kültürleriyle karşılaştırılmıştır. AKA mikrokapsüllerin hücre kültürü ve kriyoprezervasyon için yeterli mekanik dayanıma sahip olduğu ve primer sıçan hepatositlerinin enkapsülasyonu için uygun bir ortam sağladığı sonucuna ulaşılmıştır. Üç tabakalı AKA membran sisteminin, biyoyapay karaciğer destek sistemlerinde hücresel birim olarak kullanılabilme potansiyeli olduğu düşünülmektedir.
Özet (Çeviri)
In this study, primary rat hepatocytes were encapsulated in: (i) trilayered alginate-chitosan-alginate (ACA) capsules, (ii) calcium alginate, and (iii) chitosan spheres, and in vitro-cultivated under both static and dynamic culture conditions. Optimal cell concentration, cell viability and metabolic activities of the encapsulated hepatocytes were determined and compared with that of hepatocyte monolayer culture. The hepatocyte encapsulation yield of all types of membranes was found to be over 90%. Encapsulated hepatocytes, especially in ACA microcapsules highly preserved their viability confirmed by the MTT-based test. Metabolic activities of encapsulated hepatocytes in ACA microcapsules were found to be higher than that of both calcium alginate and chitosan microspheres. The cell viability and metabolic activities of hepatocytes in all encapsulation systems increased when cultured inside the STLV bioreactor simulating microgravity conditions. Encapsulated hepatocytes in these systems were successfully cryopreserved at both -80 oC and -196 oC (in liquid nitrogen) for predetermined and thawing, the viability and metabolic activities of cryopreserved hepatocytes were determined and compared with that of new isolated hepatocytes monolayer cultures. Results confirmed that ACA microcapsules had enough mechanic stability to resist cell culture and cryopreservation procedures, and provided a suitable environment for the viability and metabolic activity of primary rat hepatocytes. Trilayered ACA membrane systems have a potential to be use as cellular unit in bioartificial liver systems.
Benzer Tezler
- Silymarinin primer karışık glia hücrelerinin çoğalmasına etkisi
The effect of silymarin on primer mixed glial cells proliferation
DUYGU GEZGİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2007
FizyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. RUHİ UYAR
- Sıçan primer karaciğer hücre kültürü üzerine deltametrinin apoptotik ve oksidatif etkilerinin incelenmesi
Investigation of apoptotic and oxidative effects of deltamethrine on primary cell culture of rat hepatocytes
AYHAN GACAR
Doktora
Türkçe
2016
PatolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiPatoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TOLGA GÜVENÇ
- İn vivo sıçan dunning prostat kanser hücreleri ve diyabet modelinde metforminin etkileri
The effects of metformin in vivo rat dunning prostate cancer cells and diabetes model
PINAR KÖROĞLU
- Sıçanların solunum, sindirim ve boşaltım sistemlerindeki makrofajların histolojik yapılarının ışık ve elektron mikroskobik olarak incelenmesi
Light and electron microscopic examination of rat macrophages in respiratory, digestive and urinary systems.
ASLI ÇETİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
Morfolojiİnönü ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FERAL ÖZTÜRK
- Kollajenaz perfüzyonu ile izole edilmiş primer hepatositlerde farklı koşullarda gen ekspresyonunun incelenmesi
Isolation of primary hepatocytes by collagenase perfusion and analysis of gene expression under different conditions
ZELAL ADIGÜZEL
Yüksek Lisans
Türkçe
2004
Tıbbi BiyolojiMarmara ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. KEMAL BAYSAL
PROF.DR. BEYAZIT ÇIRAKOĞLU