Fare spinal motor nöronlarının in vitro yaşatılması
Survival of mouse spinal motoneurons in vitro
- Tez No: 248006
- Danışmanlar: DOÇ. DR. GÜRKAN ÖZTÜRK
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Fizyoloji, Physiology
- Anahtar Kelimeler: Spinal motor nöron, kültür, erişkin, soğuk, yaşam, Spinal motoneuron, culture, adult, cold, survival
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yüzüncü Yıl Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 98
Özet
Sinir hücrelerini in vitro yaşatmak oldukça güçtür ve motor nöron hücresi için bu daha da güçtür. Literatüre bakıldığında kültürdeki motor nöronlar için 24 saat yaşam bildirilmiştir. Bu çalışmada, motor sinir hücrelerini daha iyi tanımlamak ve uzun süreli çalışmalar yapmak üzere kültürdeki motor nöron ömrünü uzatmayı amaçladık. Yetişkin fare spinal kordundan ayrıştırılan motor nöronların serum, faktör ve doku ekstraktı olmadan kültürünü yaptık. İnkübasyondan önce kültürdeki motor nöronları 3 gün boyunca + 4 °C soğukta beklettik ki bu literatürde olmayan yeni bir metodtur. Bunun ardından 37 °C'de bir inkübatöre alındıktan sonra ortalama 6-7 gün daha yaşadılar. Geliştirdikleri uzantıları ve hücrelerin kimliklerini immünositokimya ile tanımlamak için kolin asetil transferaz, periferin, p75, kalsitonin gen ilişkili peptid spesifik marker'leri kullandık. Soğukta bekletme sırasında yeni bir protein sentezi mi oluyor sorusuna bir cevap vermek için transkripsiyon (DRB) ve translasyon inhibitörleri (ANI) ile deneyler yaptık. Sonuçlar hücreleri soğukta uyutma sırasında hayatta kalmayı destekleyecek bazı yeni proteinlerin sentezlendiğini düşündürdü. Ayrıca kültürdeki motor nöronların hayatiyetlerine olan etkilerini değerlendirmek için kültür vasatına değişik faktörler (FGF-2, LIF, EGF, NGF, BDNF) ve normalden daha fazla L-glutamin (% 25 fazla) ekledik. FGF-2 ve fazladan glutamin takviyesi hücrelerin canlılık oranını ve kültürdeki yaşam süresini anlamlı derecede arttırdı. LIF'in benzer ancak daha zayıf pozitif bir etkisi gözlenirken, diğer faktörlerin olumsuz etkiye sahip oldukları gözlendi. Sonuç olarak geliştirdiğimiz bu yeni kültür metodunda, fare spinal ön yarısından elde ettiğimiz motor nöronları ortalama 10 gün yaşatmayı başardık.
Özet (Çeviri)
It is very difficult to keep neuron cells alive in vitro and it is even more difficult for motoneurons. In the literature a maximum of 24 hours survival is reported for cultured adult motoneurons. İn this study, we aimed to enhance the motoneuron survival in culture to be able use them for long term studies. The motoneurons dissociated from spinal cord of adult mouse were cultured without serum, factor and tissue extract. Before incubation we kept culture motoneurons in cold at + 4 °C for 3 days which is a new method. After this, they were transferred to an incubator at 37 °C where they lived 6-7 days more. To identify the cells and their growing neurites with immunocytochemistry, we used choline asetil trasferaz, peripherin, p75, calcitonin gen related peptid as specific markers. To give an answer to the question of whether new protein synthesis occurs in cold, we did experiments with transcription (DRB) and translation inhibitors (ANI). Results indicated that some new survival enhancing proteins are synthesized when we kep the cells in cold. We added different factors (FGF-2, LIF, EGF, NGF, BDNF) and extra L-glutamin (% 25 more) to the culture medium and we evaluated their affects on the motoneuron viability. FGF-2 and extra glutamin significiantly enhanced the survival rate and duration in culture. While LIF also had a possitive effect, other factors were detrimental for the cells. In conclusion, in this new culture method, we managed to keep the motoneurons isolated from the anterior half of the spinal cord alive up to ten days.
Benzer Tezler
- Contribution of cell type specific changes of monocarboxylate transporters to amyotrophic lateral sclerosis (ALS) disease and application of boron derivatives as an alternative treatment
Monokarboksilat taşıyıcılarının hücre tipine özgü değişikliklerinin amyotrofik lateral skleroz (ALS) hastalığına etkileri ve bor türevlerinin alternatif tedavi olarak yöntemi uygulanması
NERMİN BAŞAK ŞENTÜRK
Doktora
İngilizce
2022
BiyoteknolojiYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET OZANSOY
- Amyotrofik lateral skleroz modeli farelerde 7,8-Dihidroksiflavon'un alt ve üst motor nöronlar üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of 7,8-dihydroxyflavone on lower and upper motor neurons in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis
ORHAN TANSEL KORKMAZ
Doktora
Türkçe
2023
FizyopatolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiDisiplinlerarası Sinir Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VAROL ŞAHİNTÜRK
- Yenidoğan fare motor nöron ve primer duyusal nöron ko-kültüründe sinaps oluşumu modellemesi
Yenidoğan fare motor nöron ve primer duyusal nöron ko-kültüründe sinaps oluşumu modellemesi
FİKRİ ERDEMCİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
Histoloji ve EmbriyolojiYüzüncü Yıl ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ENDER ERDOĞAN
- İnsan omuriliğinde kokain ve amfetamin ile düzenlenen transkriptin (CART) lokalizasyonunun araştırılması
Investigation of the localization of cocaine and amphetamin-regulatedtranscript (CART) in the human spinal cord
ÖYKÜ DENİZ KANAT
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Anatomiİstanbul Medeniyet ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FERİHAN ÇETİN
PROF. DR. GÜLGÜN ŞENGÜL
- Spinal musküler atrofi'li farelerde, adeno ilişkili virüs serotipi 9 vektörü kullanarak prenatal gen tedavisi
Prenatal gene therapy using adeno-associated virus serotyp-9 vectors in SMA mice
AFROOZ RASHNONEJAD
Doktora
Türkçe
2017
BiyoteknolojiEge ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FERİŞTAH FERDA ÖZKINAY
DR. GUANGPING GAO