Recombinant antigen and monoclonal antibody production for katanin P60
Katanin P60 için rekombinant antijen ve monoklonal antikor üretimi
- Tez No: 251777
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Genetik, Biology, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2009
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İstanbul Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 119
Özet
Mikrotübülleri kesen proteinlerden biri olan katanin, p60 ve p80 olarak tanımlanan iki alt üniteden oluşan bir heterodimerdir. p60 alt ünitesi mikrotübülün kafesini kırmak için ATP yi hidrolizleyen bir enzim iken, p80 alt ünitesi p60'ın aktivitesini düzenler ve sentrozoma lokalize eder. p60'ın kesim aktivitesi hücre bölünmelerinde ve postmitotik nöronların aksonal büyümesinde kritik rollere sahiptir. Katanin ayrıca, nöritlerin uzunluk, sayı ve dallanma modelleri gibi nöronal morfolojinin çeşitli durumlarında fonksiyon gösterebilmektedir. Katanin proteini şu ana kadar çok fazla çalışılmış olmasına rağmen, etkileştiği proteinler çok iyi anlaşılamamıştır. Monospesifik antikorlar, hücresel kataninin görüntülenmesi ve etkileşen proteinlerinin belirlenmesinde yardımcı olabilir. Dolayısıyla bu çalışmada, tam katanin p60 proteininden özellikliği, çözünebilirliği ve antijenik determinant içeriği göz önünde bulundurularak bir amino asit dizisi seçildi ve verimli bir anlatım sisteminde anlatımı yapıldı. Sonra, 6-8 haftalık Balb/c türü fareler saflaştırılmış rekombinant katanin p60 proteini ile bağışıklandırıldı. Yüksek bağışık cevabı olan fare üzerinde hibridoma teknolojisi kullanılarak füzyon çalışmaları polietilenglikol varlığında gerçekleştirildi. ELISA (Enzim Bağlantılı Immuno Sorbent Ölçümü) kross reaktivite test sonuçları, 295 melez klon arasından katanin p60' a karşı spesifik monoklonal antikor üretmeye aday bir melez klon, elde edildiğini göstermiştir. ELISA ve hibridoma alt izotipleme testlerine göre, bu monoklonal antikorun alt tipi IgM olarak belirlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Katanin, one of the proteins that severs microtubules, is heterodimer composed of two subunits termed p60 and p80. The p60 subunit is an enzyme that hydrolyzes ATP to break the lattice of the microtubule, whereas the p80 subunit regulates the activity of p60 and localizes it to the centrosomes. Severing activity of katanin p60 has critical roles in cell divisions and in axonal growth in postmitotic neurons. Katanin may also function in various aspects of neuronal morphology such as length, number and branching patterns of neuritis. Although, katanin has been extensively studied, interacting proteins of katanin p60 are not well understood. Monospecific antibodies could be helpful to monitor cellular katanin and find out its interacting proteins. Therefore, in this study, an amino acid sequence was selected from full katanin p60 protein considering specificity, solubility and inclusion of antigenic determinants of the protein and expressed efficiently. 6-8 weeks old Balb/c mice were then immunized with purified recombinant katanin p60 protein. Fusion study was carried out by using hybridoma technology with a mouse having high immune response in the presence of polyethylenglycol. ELISA (Enzyme Link Immuno Sorbent Assay) cross reactivity test results showed that one hybrid clone was obtained among 295 hybrid clone as a candidate for producing a specific monoclonal antibody against katanin p60. According to ELISA and mouse monoclonal antibody isotyping tests results, IgM was found as the subtype of this monoclonal antibody.
Benzer Tezler
- Production and characterization of monoclonal antibody against p60-katanin
P60-katanin?e karşı monoklonal antikor üretilmesi ve karakterizasyonu
MERAY AKKOR
Doktora
İngilizce
2011
Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ARZU KARABAY KORKMAZ
- Monoklonal antikor üretimi amaçlı E.coli hücrelerinde rekombinant insan interlökin-6 protein üretimi ve saflaştırılması
Production and purification of recombinant human interleukin-6 protein in E.coli cells for monoclonal antibody production
HAMİT YILDIZ
Doktora
Türkçe
2024
BiyoteknolojiKahramanmaraş Sütçü İmam ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET KAYRALDIZ
- Rekombinant DNA teknolojisi ile rekombinant bir antijene karşı antikor üretimi
Production of antibody against a recombinant antigen by using recombinant DNA techniques
IŞIN NERGİZ GEREN
Doktora
Türkçe
1999
Tıbbi BiyolojiMarmara ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BEYAZIT ÇIRAKOĞLU
- Anti-HER2 scFV antikor fragmanının Escherichia coli bakterisinde üretim bölgesinin optimizasyonu
Optimization of anti-HER2 scFV antibody fragment production region in Escherichia coli
SELEN CİLASUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. EDA ÇELİK AKDUR
- Development of hybridomas for the production of monoclonal antibodies against recombinant CaGa antigen of helicobacter pylori
Helicobacter pylori rekombinant CaGa proteinine karşı monoklonal antikorların üretimi için hibridoma geliştirilmesi
FATMA YURDAKUL
Yüksek Lisans
İngilizce
2013
BiyoteknolojiFatih ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BARİK SALİH