Geri Dön

İmmün yetmezlik hastalarında carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) yöntemi ile lenfosit proliferasyonunun incelenmesi

Lymphocyte proliferation with the methot of carboxyfluourescein succinimidyl ester (CFSE) in common variable immunodeficiency (CVID) patients

PDF İndir

  1. Tez No: 272588
  2. Yazar: AYŞE GÜL İZGİ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. TUNÇ AKKOÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
  6. Anahtar Kelimeler: SDİY, CFSE, Lenfosit proliferasyonu, T Lenfosit izolasyonu ve B lenfosit izolasyonu, CVID, CFSE, Lymphocytes proliferation, B cell and T cell isolation
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Allerjik Hastalıklar Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 73

Özet

Sık Değişken İmmün Yetmezlik (SDİY); hipogamagloblunemi ve normal / düşük B hücre ile tanımlanan antikor eksikliği hastalıkları grubundandır ve tekrarlayan bakteriyel infeksiyonlar, otoimmün hastalıklar ve malignite ile karakterize edilmektedir. Bu çalışmada, SDİY hastalarındaki T ve B lenfositlerinin proliferasyonlarının incelenmesi amaçlandı. T ve B hücre alt gruplarında hastalığın immünopatogenezinde önemli rol oynadığı düşünülen CD19+, CD21+, CD27+ B hücreleri ve CD3+, CD8+, CD4+ T hücrelerinin Caboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) ile hücre proliferasyon yanıtlarına bakıldı. Çalışmaya SDİY tanısı almış hastalar (n:13) ve kontrol grubu için SDİY hastalarıyla yaş uyumu olan sağlıklı bireyler (n:5) alındı. Tüm çocuklardan 6 ml venöz kan heparinli tüpe alındıktan sonra, 3'er ml tam kandan negatif seçilim yöntemi Rosette Sep ile T ve B hücre izolasyonu yapıldı. İzolasyon sonunda T ve B hücrelerinin saflığına akım sitometrisi ile bakıldı. Daha sonra izole edilen lenfositler CFSE-FITC ile karanlık ortamda işaretlendi ve T hücre proliferasyonu için hücreler anti-CD2, anti-CD3, anti-CD28 (CDmix) ile uyarılarak 4 günlük kültürleri yapıldı. Kültür sonunda hücreler anti-CD3-PE, anti-CD4-PE, anti-CD8-APC ile boyandıktan sonra CD3+, CD4+, CD8+ T hücrelerinin proliferasyonu akım sitometrisi ile bakıldı. B hücre proliferasyonu için hücreler anti-IgM + IL-4 ile 4 gün kültür edildikten sonra hücreler anti-CD19-APC-Cy7, anti-CD27-PE, anti-CD21-APC ile boyanarak CD19+, CD27+ ve CD21+ B hücrelerinin proliferasyonu akım sitometrisi ile bakıldı. Sonuç olarak T lenfositlerin ve CD19+ B hücrelerinin proliferasyonlarının 1. bölünmesinde, CDmix ile uyarımlı SDİY hücreleri, CDmix ile uyarımlı kontrolden anlamlı olarak daha fazla prolifere olmuştur. CD4+ T hücrelerinin 2. bölünmelerinde CDmix ile uyarımlı SDİY hücreleri, uyarımsız SDİY hücrelerinden anlamlı olarak daha fazla prolifere olmuşlardır. CD27+ ve CD21+ B hücrelerinde ise anlamlı proliferasyon görülmemiştir.

Özet (Çeviri)

Lymphocyte Proliferation With the Methot of Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) in Common Variable İmmunodeficiency (CVID) Patients.Common variable immunodeficiency (CVID) is a heterogeneous disease in the group of predominantly antibody deficiencies, which is defined by hypogammaglobulinemia and normal or low number of B cells, and characterized by increased susceptibility to recurrent bacterial infections, autoimmune disorders, and malignancies. The goal of this thesis is to investigate the proliferation of the B and T lymphocytes of the patients with the CVID disorder. In this study we investigated that B cell subset proliferation, which are CD19+, CD21+, CD27+ B cells and T cell subset proliferation, which are CD3+, CD8+, CD4+ T cells. CVID patients and a control group whose members are of the same age with the patients but are healthy and free of CVID have been taken in to the study. Six milliliters of venous blood has been taken from all children and cell isolation on the B and T cells has been implemented on each 3ml of blood using the negative selection procedure called Rosette Sep as well as ficoll. After the isolation, the purity of the B and T cells was checked using flow cytometry. Later on, the lymphocytes, that have been isolated were marked in a dark environment using CFSE. For T cell proliferation, lyphocytes has been stimulated with anti-CD2, CD3, CD28 (CDmix) and have been cultured for four days. After the culture, cells are dyed with anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8 and later on CD3+, CD4+, CD8+ T cells proliferation is analyzed with flow cytometry. To proliferation the isoleted B cell, it is cultured for four days along with the anti-IgM+IL-4. Afterwards, B cells having been dyed with anti-CD19, anti-CD27, anti-CD21, the proliferation of cells CD19, CD27 and CD21+B cells are analyzed using flow cytometry. As a result, first division of at the proliferation of the T lymphocytes and the CD19+ B cells, there is significant difference between the stimulated control and stimulated CVID cells. So stimulated CVID more proliferate than stimulated control. Even more that second division of CD4+ T cell has significant proliferation. Stimulated CVID cells more proliferate than unstimulated CVID cells. CD27+ ve CD21+ B cells haven?t significate division.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    545780

    Primer immün yetmezlik hastalarında TREC/KREC analizi ile T ve B hücre gelişimi kontrolü

    Control of T and B cell development by TREC/ KREC analysis in primer immunodeficiency patients

    GİZEM ŞENTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Genetikİstanbul Üniversitesi

    Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MÜGE SAYİTOĞLU

    DOÇ. DR. ÖZDEN HATIRNAZ NG

  2. Tez No

    685646

    Primer immün yetmezlik tanılı hastaların kronik rinosinüzit açısından değerlendirilmesi

    Chronic rhinosinusitis in primary immunodeficient patients

    EZGİ BELHAN KARADENİZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYÇA KIYKIM

  3. Tez No

    669387

    Akut immün trombositopeni tanılı çocuklarda immün yetmezlik varlığının değerlendirilmesi

    Evaluation of immunodeficiency in children with acute immune thrombocytopenia

    MEHMET CEMAL DÖNMEZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSakarya Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA BÜYÜKAVCI

  4. Tez No

    894872

    2017-2022 yılları arasında Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk İmmünoloji-Alerji Polikliniği'nde besin alerjisi tanısı ile izlenen hastaların klinik, laboratuvar ve takip özellikleri

    Clinical, laboratory and follow-up characteristics of patients with a diagnosis of food allergy at Ankara University Faculty of Medicine pediatric immunology-allergy polyclinic between 2017 and 2022

    ERSİN ÖZKAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Allerji ve İmmünolojiAnkara Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ZEHRA ŞULE HASKOLOĞLU

  5. Tez No

    452223

    Kistik fibrozis dışı bronşektazi hastalarında immün yetmezlik sıklığı ve klinik parametrelerle ilişkisi

    The frequency of immun deficiency in patients with non cf bronchiectasis and relationship with clinical parametres

    MELAHAT BEKIR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Göğüs HastalıklarıMarmara Üniversitesi

    Göğüs Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BERRİN CEYHAN

Geri Dön