Geri Dön

Rozmarinik asitin antioksidan kapasitesinin belirlenmesi ve insan karbonik anhidraz izoenzimleri (HCA-I ve HCA-II) üzerine inhibisyon etkisinin incelenmesi

Determinaton of antioxidant capacity of rosmarinic acid and investigation of its inhibition effects on human carbonic anhydrase izoenzymes (HCA-I and HCA-II)

  1. Tez No: 284225
  2. Yazar: MERYEM NAR
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. İLHAMİ GÜLÇİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Antioksidan aktivite, enzim inhibitörü, karbonik anhidraz, rozmarinik asit, Antioxidant activity, carbonic anhydrase, enzyme inhibition, rosmarinic acid
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Bölümü
  12. Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 132

Özet

Rozmarinik asit doğal bir karboksilik asit olup Lamiaceae familyasına ait oğul otu, biberiye, kekik, adaçayı ve nane gibi birçok bitkide bulunur. Yapılan çalışmada rozmarinik asitin muhtemel antioksidan ve radikal giderme aktivitesi değerlendirildi. Ayrıca rozmarinik asitin insan eritrosit karbonik anhidraz izoenzimi I ve II (hCA-II ve hCA-II) üzerine inhibisyon etkisi incelendi.Rozmarinik asitin antioksidan ve radikal giderme aktivitesini değerlendirmek için ferik tiyosiyanat metoduna göre total antioksidan aktivitesi, 2,2´-azino-bis(3-etilbenztiyoazolin-6-sülfonik asit) radikal (ABTS?+) giderme aktivitesi, 1,1-difenil-2-pikril-hidrazil serbest radikal (DPPH?) giderme aktivitesi, N,N-dimetil-p-fenilendiamin radikal (DMPD?+) giderme aktivitesi, süperoksit anyon radikali (O2?-) giderme aktivitesi, potasyum ferriksiyanit indirgeme metodu ile indirgeme kuvveti, Kuprak metodu ile kuprik iyonları (Cu2+) indirgeme kapasitesi, FRAP metoduna göre indirgeme kapasitesi ve ferrozin ve bipiridil reaktifleri ile ferröz iyonları (Fe2+) şelatlama aktivitesi çalışıldı. Ayrıca BHA, BHT ?-tokoferol ve troloks referans antioksidan olarak kullanıldı. Kullanılan rozmarinik asit bütün metotlarda kuvvetli antioksidan ve radikal giderme aktivitesi sergiledi.Bununla beraber, çalışmanın ikinci kısmında ise rozmarinik asitin insan eritrosit karbonik anhidraz izoenzimi I ve II (hCA-II ve hCA-II) üzerine in vitro inhibitör etkisi araştırıldı. Öncelikle hCA-I ve hCA-II izoenzimleri sırasıyla Sepharose-4B-L-Tirozin Sülfanamit afinite kolon kromatografisi ile %57.9, %67.2 verimle 76.5 ve 509.3 kat saflaştırıldı. Enzim saflığını belirlemek için, sodyum dodesil sülfat-poliakrilamit jel elektroforezi (SDS-PAGE) yapıldı ve tek bant gözlendi. Daha sonra I50 değerlerini bulmak için, hidrataz aktivitesi kullanılarak rozmarinik asitin karbonik anhidraz izoenzimi I ve II (hCA-I ve hCA-II) üzerine inhibisyon etkisi araştırıldı. Bu amaçla rozmarinik asitin karbonik anhidraz izoenzimi I ve II (hCA-I ve hCA-II) üzerine inhibisyon etkileri 4-nitrofenil asetat substratı ile esteraz aktivite metodu kullanılarak da araştırıldı. Rozmarinik asit, hCA-I icin 0,086 mM ve hCA-II için de 0,057 mM Ki değerlerine sahip olduğu gözlendi. Rozmarinik asit, (hCA-I, II) için p-nitrofenil asetat substratı ile yarışmasız inhibisyon gösterdi. Rozmarinik asit antioksidan özelliğinden dolayı daha güvenli hCA-I ve hCA-II inhibitörü olarak kullanılabilir.

Özet (Çeviri)

Rosmarinic acid is a natural polyphenol carboxylic acid and found in many herbs belonging to Lamiaceae family such as such as lemon balm, rosemary, oregano, sage, thyme and peppermint. In the present study, rosmarinic acid was evaluated for possible antioxidant and radical scavenging activity. Also the inhibitory effects of rosmarinic acid were used on human erythrocyte izoenzymes I and II (hCA-I and hCA-II).In order to evaluate antioxidant and radical scavenging activity of rosmarinic acid, different in vitro methods such as total antioxidant activity by ferric thiocyanate method, 2,2´-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) radical (ABTS?+) scavenging activity, 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl free radical (DPPH?) scavenging activity, N,N-dimethyl-p-phenylenediamine radical (DMPD?+) scavenging activity, superoxide anion radical (O2?-) scavenging activity, total reducing power by potassium ferricyanide reduction method, cupric ion (Cu2+) reduction capacity by Cuprac method, hydrogen peroxide scavenging activity and ferrous ions (Fe2+) chelating activities using by ferrozine and bipyridyl reagent were performed separately. Also, BHA, BHT, ?-tocopherol and trolox, a water-soluble analogue of ?-tocopherol, were used as the reference antioxidant compounds. Rosmarinic acid exhibited powerful antioxidant and radical scavenging effects in used all methods.In addition, in the second part of this study, the in vitro inhibitory effects of rosmarinic acid on erythrocyte carbonic anhydrase isoenzymes (hCA-I and hCA-II) were investigated. Firstly, hCA-I and hCA-II were purified by Sepharose-4B-L-Tirozin Sülfanamid affinity chromatography column with a yield of 57.86, 67.17% and 76,52 and 509,29 fold purification of each isoenzyme, respectively. For determination of enzyme purity, sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was performed and single band was observed.Then, for determination of I50 values, the inhibition effects rosmarinic acid on human carbonic anhydrase iso enzymes I and II (hCA and hCA-II) were investigated using by hidratase assay. For this purpose, the inhibition effects of human carbonic anhydrase isozymes I and II were investigated by using the esterase assay, with 4-nitrophenyl acetate as substrate. Rosmarinic acid showed KI value such as 0,086 mM dor hCA-I and 0,057 mM for hCA II. The inhibition type found to be non-competitive. Rosmarinic acid can be used as safer hCA I and hCA II isoenzyme inhibitors due to their antioxidant properties.

Benzer Tezler

  1. Bazı antioksidan ajanların ve siRNA-aracılı susturmanın glioma hücrelerinde stres proteinlerinin anlatımına etkileri

    Effects of some antioxidant agents and siRNA-mediated silencing on the expression of stress proteins in glioma cells

    ASLIHAN ŞENGELEN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Biyokimyaİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. EVREN ÖNAY UÇAR

  2. Bazı aromatik bitkilerden elde edilen rozmarinik asit, karnosol ve karnosik asitin sardalya (Sardina pilchardus Walbaum 1972) filetosu üzerindeki antioksidan ve antimikrobiyal etkilerinin incelenmesi

    Investigation of antioxidant and antimicrobial effects of rozmarinic acid, carnosol and carnosic acid from some aromatic plants on the sardine (Sardina pilchardus Walbaum 1972) fillet

    MEHMET KENAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Su ÜrünleriÇukurova Üniversitesi

    Su Ürünleri Avlama Teknolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FATİH ÖZOĞUL

  3. Bitki büyüme düzenleyicilerin fesleğen (Ocimum basilicum L.)'de tuz stresi ve antioksidan bileşenler üzerine etkileri

    Effects of plant growth regulators on antioxidant compounds and salt stress in sweet basil (Ocimum basilicum L)

    NİLGÜN BİLGİNER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BotanikKahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞENGÜL KARAMAN

  4. Antioxidant and cytotoxic properties of salvia fruticosa m. and its effects on gene expressions of some CYP450 and antioxidant enzymes in HT-29 cell line

    Salvıa frutıcosa m. bitkisinin antioksidan ve sitotoksik özellikleri ve HT-29 hücre hattında bulunan bazı CYP450 ve antioksidan enzimlerin gen ifadeleri üzerine etkileri

    AHMET ALTAY

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TAHSİN FARUK BOZOĞLU

    DOÇ. DR. ÖZLEM TOKUŞOĞLU

  5. Ratlarda rosmarinik asitin akut pankreatit üzerindeki koruyucu etkinliğinin incelenmesi

    Evaluation of the protective effects of rosmarinic acid on acute pancreatitis in rats

    MEHMET RENÇBER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Genel CerrahiDicle Üniversitesi

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ABDULLAH OĞUZ