Effect of simultaneous beta-lactamase inhibitor protein expression on cellular beta-lactamase activity
Eş zamanlı beta-laktamaz inhibitör protein ekspresyonunun hücresel beta-laktamaz aktivitesine olan etkisi
- Tez No: 312127
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BERNA SARIYAR AKBULUT, YRD. DOÇ. DR. ELİF ÖZKIRIMLI ÖLMEZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya Mühendisliği, Chemical Engineering
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 81
Özet
Beta-laktam antibiotikleri bakteriyel enfeksiyonların tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Ancak, beta-laktam antibiotiklerinin yetersiz ve yanlış kullanılmasına bağlı olarak, bakterileriler beta-laktam antibiotiklerini etkisiz hale getirecek mekanizmalar geliştirmiştir. En sık görülen mekanizma, beta-laktam halkasını hidroliz eden ve bakteriye antibiyotik direnci kazandıran TEM-1 beta-laktamaz üretimidir. 165 amino asitten oluşan beta-laktamaz inhibitör proteini (BLIP) Streptomyces clavuligerus tarafından üretilen, yüksek ilgiye sahip bir beta-laktamaz inhibitörüdür. Bu çalışmada, BLIP'in inhibitor etkisi, hücrelerin büyüme profilleri, canlı hücre sayısı ve eşzamanlı beta-laktamaz ile BLIP üreten rekombinant hücrelerdeki beta-laktamaz aktivitesi incelenilerek araştırıldı. Canlı hücre başına beta-laktamaz aktivitesi BLIP varlığında ve yokluğunda belirlendi. BLIP ile beta-laktamaz varlığı SDS-PAGE ve Native-PAGE analizleri ile doğrulandı. BLIP yokluğunda, E. coli BL21(DE3) (pUC18 + pET-26EA) ve E. coli BL21(DE3) (pUC18 + pET-26b(+)) hücreleri benzer düzeyde ß-laktamaz aktivitesi göstermişlerdir. Eşzamanlı BLIP ve R-TEM-1 beta-laktamaz ekspresyonu gerçekleştiğinde, periplasmadaki beta-laktamaz aktivitesi önemli oranda düşmüştür.
Özet (Çeviri)
Beta-lactam antibiotics are commonly used in the treatment of bacterial infections. However, due to underuse and misuse of beta-lactam antibiotics, bacteria have developed mechanisms that counteract beta-lactam antibiotics. The most common mechanism is production of TEM-1 beta-1actamase that hydrolyzes the beta-lactam ring and enables bacteria to gain antibiotic resistantance. Beta-lactamase-inhibitory protein (BLIP), a 165 amino acid protein produced by Streptomyces clavuligerus, is a high affinity beta-lactamase inhibitor. In this study, the inhibitory effect of BLIP was investigated by examining growth profiles, cell viability and in-vivo beta-lactamase activity of recombinant cells simultaneously expressing beta-lactamase and BLIP. beta-lactamase activity per viable cell was determined in the absence and presence of BLIP. The presence of both BLIP and beta-lactamase was verified by SDS-PAGE and Native-PAGE analysis. In the absence of BLIP, E. coli BL21(DE3) (pUC18 + pET-26EA) and E. coli BL21(DE3) (pUC18 + pET-26b(+)) cells showed comparable beta-lactamase activity. The activity of beta-lactamase in the periplasmic extract of E. coli BL21(DE3) (pUC18 + pET-26EA) cells decreased considerably when R-TEM-1 beta-lactamase and BLIP were expressed simultaneously.
Benzer Tezler
- Peroksidazın üç fazlı ayırma yöntemi ile pazıdan (Beta vulgaris L.var. cicla) saflaştırılması
Purificaton of peroxidase from chard (Beta vulgaris L. var. cicla) by three phase partitioning method
MEHMET YAMAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Biyokimyaİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. REFİYE YANARDAĞ
- Investigation of two dimensional materials with simultaneous atomic force/scanning tunneling microscopy
İki boyutlu malzemelerin eşzamanlı atomik kuvvet / taramalı tünelleme mikroskobu ile incelenmesi
MAJID FAZELI JADIDI
Doktora
İngilizce
2019
Fizik ve Fizik Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiFizik Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HAKAN ÖZGÜR ÖZER
- İnsülinoma kökenli fare beta hücre hatlarında TRAIL'ın apoptotik etkinliğinin araştırılması
Investigation of the apoptotic effect of TRAIL on insulinoma derived mouse beta cell lines
ÖZLEM YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Tıbbi BiyolojiAkdeniz ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. AHTER DİLŞAD ŞANLIOĞLU
- Uzun kodlamayan RNA (lncRNA) linc00968 'in alzheimer hücre kültürü modellerinde apoptoz üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of long non-coding RNA (lncRNA) linc00968 on apoptosis in alzheimer cell culture models
SERAP KURT
Doktora
Türkçe
2024
Tıbbi BiyolojiDokuz Eylül ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEFA KIZILDAĞ