Alcaligenes latus phbcab (poli-3-hidroksibütirik asit biyosentez) genleri klonlanmış escherichia coli'de phb üretimi ve izolasyonu
Phb production and isolation from escherichia coli harboring alcaligenes latus phb biosynthesis operon
- Tez No: 315653
- Danışmanlar: PROF. DR. NURDAN PAZARLIOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Mikrobiyoloji, Biotechnology, Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 116
Özet
Polihidroksialkanoatlar (PHA), sahip oldukları fiziksel ve kimyasal özelliklerin yanı sıra biyouyumlu ve biyobozunur olmaları sebebiyle petrol bazlı plastiklerin alternatifi olabilecek potansiyele sahiptir. PHA biyopolimerleri besin açısından dengesiz koşullarda birçok gram (+) ve gram (-) bakteri tarafından sentezlenirler ve hücre içerisinde enerji depo materyali olarak biriktirilmektedir. Polihidroksibütirik asit (P3HB) en çok çalışılan ve bilinen PHA çeşididir.Bu tez çalışmasında endüstriyel PHB üretiminde kullanılan Alcaligenes latus DSM 1124 ırkında yer alan PHB biyosentez genlerinin Escherichia coli'ye aktarılarak yüksek miktarda PHB üretimi ve üretilen biyopolimerin izolasyonu hedeflenmiştir. Bu amaçla PZR yöntemi ile çoğaltılan Alcaligenes latus DSM 1124 ırkında yer alan PHB biyosentez genleri pSP 72, pUC 19 ve pQE 40 plazmitlerine başarılı bir şekilde aktarılmıştır. Elde edilen rekombinant plazmitler 10 farklı E. coli ırkına aktarılarak PHB üretimi için en uygun olan ırk ve plazmit olarak pQEAL1124 plazmitini taşıyan E. coli Rosetta ırkı belirlenmiştir. Uygun ırk belirlendikten sonra PHB üretiminin arttırılması amacıyla besiyeri, karbon kaynağı, sıcaklık, karıştırma hızı gibi optimizasyon çalışmaları gerçekleştirilerek %60'ın üzerinde verim elde edilmiştir.
Özet (Çeviri)
In addition to their physical and chemical properties, due to they are biodegredable and biocompatible polyhydorxyalkanaotes have potential to be alternative to petroleum based plastics. PHAs are synthesized by various gram positive and negative bacteria under unbalanced nutrient conditions and accumulated as an energy storage material in cytoplasm. Polyhydroxybutyrate (PHB) is the most studied and well known type of PHAs.The aim of this study is production and isolation of PHB from E.coli through transferring of PHB operon from A. latus DSM 1124. For this purpose, A. latus DSM 1124 PHB biosynthesis genes, amplified by using PCR, were ligated to pSP72, pUC19 and pQE40 vectors. After transformation of 10 different E. coli strains with obtained plasmids, E. coli Rosetta harboring pQEAL1124 plasmid was determined the most effective strain to produce PHB. After determining the most appropriate strain, in order to enhance PHB production medium, carbon source, temperature, shaking rate optimizations were performed. By performing optimizations E. coli accumulated PHB more than 60% of cell dry weight.
Benzer Tezler
- Synthesis of polyhydroxybutyrate and its copolymers by alcaligenes latus and alcaligenes eutrophus
Polihidroksibütirat ve kopolimerlerinin alcaligenes latus ve alcaligenes eutrophus ile sentezlenmesi
ZEYNEP GÜMÜŞYAZICI
Yüksek Lisans
İngilizce
1999
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜRDAL ALAEDDİNOĞLU
- Batık kültür fermentasyonu yönetimiyle bazı bakterilerden PHB üretimi
The production of PHB from some bacteria by using batch culture fermentation method
MUSTAFA ATEŞ
- Properties of biodegredable and compatible poly (3-hydroxybutyrak) and its copolymers
Biyobozunur ve biyouyuşumlu poli (3-hidroksi bufirat) ve kopolimerlerinin özellikleri
MUSTAFA KEMAL ÖZ
Yüksek Lisans
İngilizce
1999
KimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDAL BAYRAMLI
- Bacterial production and screening of polyhdroxyalkanoates by using a novel spectrofluorometric method
Polihidroksialkanoatların bakteriyel üretimi ve yeni spektroflorometrik bir metod olarak nil kırmızısı kullanılarak izlenmesi
BARIŞ EMRE DAYANÇ
Yüksek Lisans
İngilizce
1999
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜRDAL ALAEDDİNOĞLU
PROF. DR. VASIF NEJAT HASIRCI
- Controlled release of antibiotics from biodegradable polyhydroxyalkanate implants for the treatment of osteomyelitis
Osteomiyelit tedavisi için biyobozunur palihidroksi alkanoat implantlarından kontrollü antibiyotik salımı
FÜSUN TÜRESİN
Yüksek Lisans
İngilizce
1998
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. VASIF NEJAT HASIRCI
