Geri Dön

Presenilin 2 cDNA'sının klonlanması ve ailesel alzheimer hastalığı patogenezinde etkin mutasyonları taşıyan vektörlerin oluşturulması

Cloning of presenilin 2 cDNA and construction of vectors carrying familial alzheimer?s disease causing mutations

  1. Tez No: 318539
  2. Yazar: GÖZDE ÖZTAN
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. YRD. DOÇ. DR. M. BAKİ YOKEŞ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Haliç Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 99

Özet

Yapılan bu çalışmayla pcDNA3 vektörünün SmaI restriksiyon enzimi kesimnoktası içine daha önceden klonlanmış olan Presenilin 2 geninin cDNA'sı BamHI veKpnI restriksiyon enzimleri ile kesilerek çıkarılmış, aynı restriksiyon enzimlerininkesim noktalarını taşıyan pBluescript II SK (+) vektörüne klonlanmıştır. Klonlananvektör ile transform edilen XL-1 Blue E. Coli hücreleri LB/Agar katı besiyerindeüretilerek pozitif koloniler seçilmiştir. Seçilen pozitif kolonilerden plazmid DNA'sıizole edilmiş ve dizi analizi ile klonlamanın gerçekleştirildiği gösterilmiştir.Klonlanan cDNA dizisi üzerinde yönlendirilmiş mutagenez ile Ala252Thr vePro334Arg mutasyonları oluşturulmuş ve XL-1 Blue hücreleri mutant cDNA dizisitaşıyan vektörlerle transform edilerek, bu vektörleri taşıyan saf kültürler eldeedilmiştir. İleride Haliç Üniversitesi Moleküler Biyoloji ve Genetik Laboratuvarındayapılacak olan hücre kültürü çalışmalarında söz konusu mutasyonların etkilerininçalışılabilmesi için gerekli vektörel alt yapı sağlanmıştır.

Özet (Çeviri)

In this study, cDNA of Presenilin 2 gene which has been cloned to the SmaIrestriction enzyme site of pcDNA3 was cut out by BamHI and KpnI enzymes. ThecDNA fragment was further inserted between the BamHI and KpnI sites of thepBluescript II SK (+) vector. XL-1 Blue E.coli cells were transformed with thevector and positive colonies on LB/Agar medium were selected to plasmid DNAisolation. The tranformation was confirmed by DNA sequence analysis.The cloned cDNA sequence was changed by site-directed mutagenesis method toconstruct vectors carrying Ala252Thr and Pro334Arg mutations. The XL-1 Bluecells were transformed by the mutant clones to obtain pure colonies. As a result ofthis study, useful vector constructs were created in Halic University, MolecularBiology and Genetics Laboratory, which will be essential in the future studies forinvestigating the effects of the Presenilin 2 mutations in cell cultures.

Benzer Tezler

  1. Presenilin 2 cDNA'sının klonlanması ve ailesel alzheimer hastalığı patogenezinde etkin mutasyonları taşıyan vektörlerin oluşturulması

    Cloning of presenilin 2 cDNA and construction of vectors carrying familial alzheimer's disease causing mutations

    GÖZDE ÖZTAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    GenetikHaliç Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MEHMET BAKİ YOKEŞ

  2. Presenilin 1 cDNA'sının klonlanması ve ailesel alzheımer hastalığı patogenezinde etkin mutasyonları taşıyan vektörlerin oluşturulması

    Cloning of presenilin 1 cDNA and construction of vectors carrying familial alzheimer?s disease causing mutations

    DENİZ ŞUMNULU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    GenetikHaliç Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MEHMET BAKİ YOKEŞ

  3. Erken yaşta başlayan alzheimer hastalığı'nda TRPC1'in rolü

    The role of TRPC1 on early-onset alzheimer's disease

    MİNE KOCABIYIK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Eczacılık ve FarmakolojiEge Üniversitesi

    Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YASEMİN ERAÇ

  4. Türk populasyonundaki alzheimer hastaları ile presinilin-2 geninin ilişkisi

    The association of presenilin-2 gene with alzhemieris disease in Turkish population

    YASEMİN AKALIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    GenetikGazi Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAKKI TAŞTAN

  5. Türk toplumunda TAF8 ve ApoD'nin sporadik alzheimer hastalığındaki ilişkisi

    Association between TAF8 and ApoD and sporadic alzheimer disease in the Turkish population

    FATİH TEPGEÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Genetikİstanbul Üniversitesi

    Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NİHAN ERGİNEL-ÜNALTUNA