Geri Dön

Nadph-sitokrom P450 redüktaz enziminin Van Gölü balığı karaciğer mikrozomlarından saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı kimyasal maddelerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

Purification and characterization of nadph-cytochrome P450 reductase from Van Lake fish liver microsomes and investigation of some chemical substances? effects on the enzyme activity

  1. Tez No: 322527
  2. Yazar: MÜSLÜM KUZU
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 143

Özet

Bu çalışmada Van Gölü balığı karaciğer mikrozomlarından NADPH-sitokrom P450 redüktaz enzimi DEAE-selüloz iyon değişim kromatografisinin iki basamaklı uygulanması ile 0,20463 EÜ x mg-1 spesifik aktivitesiyle %54,4 verimle 38 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflığını kontrol etmek ve monomer molekül kütlesini belirlemek amacıyla SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant gözlendi. NADPH-sitokrom P450 redüktaz enzimi için monomer molekül kütlesi 70 kDa olarak belirlendi. Enzim için yapılan karakterizasyon çalışmalarında optimum iyonik şiddet, optimum pH, optimum sıcaklık, stabil pH, Ea, ve Q10 değerleri belirlendi. Enzimin sitokrom c ve NADPH substratları için KM ileVmax değerleri belirlendi. Ayrıca enzim için kcat ve V0 değerleri de hesaplandı. Enzim aktivitesi üzerine bazı metallerin, antibiyotiklerin ve akvaryum balıkçılığında kullanılan ilaçların etkileri araştırıldı. İnhibisyon etkisi gösteren metallerin IC50 değerleri ve Ki sabitleri hesaplandı.

Özet (Çeviri)

In this study, NADPH-cytochrome P450 reductase was purified from Van Lake fish liver microsomes by first and second DEAE-cellulose column chromatograph with 0,20463 EUxmg-1 of specific activities, 54,4% of purification yield and 38 of purification folds. Purity of the enzyme was identified, and monomer molecular weight of the enzyme was determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. SDS-PAGE results showed a single band and the molecular weight of NADPH-cytochrome P450 reductase was determined as 70 kDa. In addition to these, optimum ionic strength, optimum pH, optimum temperature, stable pH, Ea, and Q10 values were determined for enzyme in performed kinetic studies. KM and Vmax were determined for NADPH and cytochrome c. Additionaly, kcat and V0 values were calculated for enzyme. Effects of some metals ions, antibiotics and some drugs used in the aquarium fishery on the activity of the enzyme were investigated. IC50 values and Ki values of metals showing the inhibition effect were calculated.

Benzer Tezler

  1. Hindi Karaciğerinden NADPH-Sitokrom P450 Redüktaz Enziminin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Bazı Kimyasal Maddelerin Enzim Aktivitesi Üzerine Etkilerinin İncelenmesi

    Purification and Characterization of NADPH Cytochrome P450 Reductase Enzyme from Turkey Liver and Investigation of The Effects of Some Chemical Substances on Enzyme Activity

    EBRU AKKEMİK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ

  2. Biochemical and immunological characterization of beef liver NADPH-cytochrome P450 reductase

    Sığır karaciğer NADPH-sitokrom P450 redüktaz enziminin biyokimyasal ve immünolojik karakterizasyonu

    HAYDAR ÇELİK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2002

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMEL ARINÇ

  3. Purification and characterization of cytochrome P4501A1 and cytochrome P450 reductase from feral leaping mullet (Liza salines) liver microsoms

    Sitokrom P4501A1 ve P450 redüktazın doğal kefal balığı karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    ALAATTİN ŞEN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    1997

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMEL ARINÇ

  4. 21 hidroksilaz eksikliğine bağlı konjenital adrenal hiperplazide (KAH) koenzim NADPH eksikliğinin araştırılması

    21 investigation of coenzyme NADPH deficiency in congenital adrenal hyperplasia (KAH) due to hydroxylase deficiency

    SENA SAYIN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyokimyaGaziantep Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ELİF İŞBİLEN

  5. CYP1A1'in doğal polifenoller tarafından inhibisyonunun in vitro ve moleküler modelleme çalışmaları ile incelenmesi

    Assessment of CYP1A1 Inhibition by Natural Polyphenols Applying in vitro and Molecular Docking Studies

    DOĞUKAN MUTLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaPamukkale Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ŞEVKİ ARSLAN

    PROF. DR. ALAATTİN ŞEN