-Galaktozidaz enziminin immobilizasyonu, karakterizasyonu ve endüstriyel proseslerde kullanım potansiyelinin araştırılması
Immobilization, characterization and determination of the potential usage of -galactosidase in industrial processes
- Tez No: 332171
- Danışmanlar: PROF. DR. SEÇİL ÖNAL
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Karpuz (Citrullus vulgaris), galaktozidaz, soya sütü, immobilizasyon, Sepabead EC-EP, Sepabead EC-EA, Sepabead EC-HA, rafinoz hidrolizi, Watermelon (Citrullus vulgaris), galactosidase, immobilization, Sepabead EC-EP, Sepabead EC-EA, Sepabead EC-HA, soy milk, hydrolysis of raffinose
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 245
Özet
-Galaktozidazlar (Melibiaz, EC 3.2.1.22), basit ve kompleks oligo- ve polisakkaritlerin (rafinoz, stakiyöz, melibiöz, galaktomannan) ?-1,6-bağlı D-galaktozil artıklarını hidrolizleyen ekzoglikozidazlardır. Çok çeşitli tekniklerle bitkilerden, hayvanlardan ve çeşitli mikrobiyal organizmalardan saflaştırılmışlardır. Özellikle şeker endüstrisinde önemli bir yere sahip olan ?-galaktozidazlar, medikal alanda (Fabry hastalığının tedavisi, doku nakli ve kan grubu dönüşümlerinde), kompleks karbohidratların biyolojik fonksiyonlarının belirlenmesinde, organik sentezlerde ve yapı analizlerinde çeşitli uygulamalara sahiptirler. Bu enzim ile yapılan çok sayıda saflaştırma ve karakterizasyon çalışması olmasına rağmen immobilizasyon çalışmaları oldukça azdır.İmmobilize enzimler, geleneksel kimyasal yöntemlere alternatif olarak yenilikçi biyoteknolojik proseslerin kalpleridirler. ?-Galaktozidazın endüstriyel uygulamalarıserbest enzime kıyasla yüksek aktivite ve kararlılıkta biyokatalist immobilize enzim elde etmek için etkili yöntemlere gereksinim duyar.Bu çalışmada, ?-galaktozidaz enzimi önce karpuzdan (Citrullus vulgaris) izole edilerek kısmi olarak saflaştırıldı ve ardından Sepabead EC- serisi (Sepabead EC-EP, EC-EA ve EC-HA) taşıyıcılarda kovalent bağlama, adsorpsiyon ve çapraz bağlama teknikleri kullanılarak immobilize edildi. Her bir immobilizasyon protokolünün optimizasyonu için immobilizasyona çeşitli parametrelerin etkisi (tampon türü, konsantrasyonu ve pH' ı, protein miktarı, glutaraldehid konsantrasyonu, aktivasyon süresi gibi) incelendi. Hazırlanan immobilize ve serbest enzimlerin fiziksel ve kimyasal karakterizasyonu gerçekleştirildi. Enzim aktivitesine etki eden bazı parametreler (pH, sıcaklık, substrat konsantrasyonu, efektör konsantrasyonları) incelenerek kararlılık testleri (pH, termal, operasyonel ve depo kararlılığı) yapıldı. Bunların yanı sıra immobilize enzimlerin tekrar kullanılabilirliği de test edildi. Serbest ve immobilize ?-galaktozidaz enzimlerinin soya sütündeki rafinoz ve rafinoz tip oligosakkaritlerin hidrolizinde kullanılabilirliği ile ilgili çalışmalar yapıldı.
Özet (Çeviri)
-Galactosidases (Mellibiase, EC 3.2.1.22) are the exoglycosides that catalyses the hydrolysis of ?-1,6- bounded D-galactosyl residues of basic and complex oligo- and polysaccharides (raffinose, stachyose, mellibiose, galactomannans). They have been purifed with different techniques from plants, animals and various microorganisms. They have great importence in especially sugar industry, elucidation of the biological functions of complex carbohydrates, structural analaysis, organic synthesis and medical purpose (cure of Fabry disesase, xenotransplantation). Because of these, there has been many purification and characterization studies with ?-galactosidases but in contrast to this, there are only few immobilization studies.Immobilized enzymes are the hearth of innovative biotechnological processes as alternatives to traditional chemical Technologies. Industrial applications of ?-galactosidase requires efficient methods to immobilize enzyme, yielding a biocatalyst with high activity, stability compared to free enzyme.In this study ?-galactosidase was isolated and partially purified from watermelon (Citrullus vulgaris) and then immobilized on Sepabead EC- carriers (Sepabead EC-EP, EC-EA ve EC-HA) by covalent coupling, adsorption and crosslinking. For optimization of immobilization protocols, effects of some parameters (buffer type, concentration and pH of buffer, protein amount, concentration of glutaraldehyde, activation time, etc?) to immobilization were tested. Physical and chemical characterization of free and immobilized enzymes were made. Some parameters effecting to the enzyme activity (pH, temperature, substrate concentration and effector concentration) were searched and stability tests (thermal, pH, storage and operational stability) were also done. Beside of these, useability of the immobilized enzymes were tested. Finally the usage of free and immobilized enzymes in the hydrolysis of raffinose and raffinose type oligosaccharides present in soymilk were determined.
Benzer Tezler
- Tripsin enziminin immobilizasyonu ve protein fragmantasyonunda kullanım potansiyelinin araştırılması
Immobilization of trypsin and investigation of potential use for protein fragmentation
CENK DAĞLIOĞLU
- Beyin antioksidan enzimlerinin tip1 diyabet ile değişimi: resveratrol'ün etkileri
Changes in brain antioxidant enzymes with type 1 diabetes: effects of resveratrol
DİLAN KONAT
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
BiyolojiKaramanoğlu Mehmetbey ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. GÖKHAN SADİ
- 4T1 VE 4THMpc fare meme kanser hücre hatlarında antianjiogenik antitümoral ilaç olan talidomit'in tek başına ve radyoterapi ile kombine olarak anjiogenik faktörlerden p maddesi ile p maddesini parçalayan neprilizin ve adam-10 enzimleri üzerine etkilerinin araştırılması
The investigation of the effects of thalidomide an antiangiogenic and antitumoral drug, alone and in combination with radiotherapy on substance p level as well as substance p degrading enzymes; adam-10 and neprilysin in 4T1 VE 4THMpc mouse breast cancer cell lines
ECE ŞİMŞEK
- Hint yağından azelaik asid sentezi ve bu asid'in dioktil- ve dinonil- esterlerinin lipaz ile invitro otrtamda etkileşimi
Synthesis of azelaic acid from castor oil and in vitro interaction of dioctyl and dinonyl esthers of this acid with lipase
GÜLEN TÜRKER
- Tarihsel süreçte Kuran'ın farklı anlaşılma nedenleri
Reasons of different understanding of the Qur'an in historical process
MUHAMMED BAHAEDDİN YÜKSEL
Doktora
Türkçe
2015
DinErciyes ÜniversitesiTemel İslam Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDOĞAN PAZARBAŞI
- Fentanil kullanılan kişilerde CYP3A4*2, *3, *10,*17 alellerinin tek nükleotit polimorfizmi
Single nucleotide polymorphisms of CYP3A4*2, *3, *10,*17 alleles in fentanyl users
AYŞE TORUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Adli Tıpİstanbul ÜniversitesiFen Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MÜNEVVER AÇIKKOL