Geri Dön

Çeşitli stres koşullarının Escherichia coli O157:H7'de glutatyon içeriği üzerine etkisi

The effect of various stress conditions on glutathione content in Escherichia coli O157:H7

PDF İndir

  1. Tez No: 348659
  2. Yazar: NİHAL KANAT
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. SERAP COŞANSU AKDEMİR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Gıda Mühendisliği, Mikrobiyoloji, Food Engineering, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2013
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sakarya Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 62

Özet

Asit adaptasyonu, düşük pH (3,0), yüksek gelişme sıcaklığı (45?C), NaCl (%5, %10), H2O2 (%1, %2,5) ve sodyum hipoklorit (%0,05, %0,5) streslerinin E. coli O157:H7?de hücre içi glutatyon (GSH) ve sistein (CYS) miktarı üzerine etkisi invitro koşullarda araştırılmıştır. Hücre içi GSH ve CYS miktarları HPLC ile analiz edilmiştir. Aside adapte edilen grupta canlı hücre sayısı kontrol grubuna yakın bulunurken hücre içi GSH ve CYS miktarı kontrole göre azalmıştır. GSH/GSSG oranı ise 4,37?den 0,91?e düşmüştür. pH 3,0 ortamına aşılanan hücrelerde GSH belirlenemezken, CYS miktarının kontrol grubuna göre yaklaşık 15 kat daha yüksek olduğu belirlenmiştir. Yüzde beş NaCl içeren ortamda geliştirilen hücrelerde GSH ve CYS miktarları sırasıyla 20,83 ve 2,64 nmol/107 kob olarak belirlenmiştir. Diğer yandan %10 NaCl içeren ortamda geliştirilen hücrelerde GSH belirlenemezken CYS miktarı %5 NaCl ortamındaki hücrelerden yaklaşık 2 kat daha fazla bulunmuştur. GSH/GSSG oranı %5 NaCl bulunan ortamdaki hücrelerde kontrolden daha düşük olup 0,15 olarak hesaplanmış, ancak %10 NaCl bulunan ortamdaki hücrelerde GSH belirlenemediğinden bu oranı hesaplamak mümkün olmamıştır. Yüksek sıcaklıkta (45oC) 6 saat inkübe edilen hücrelerde GSH miktarı (1,72 nmol/107 kob) 37oC?de geliştirilen hücrelerdekinden (0,27 nmol/107 kob) daha yüksek bulunmuştur. Buna karşın kontrol grubunda 2,11 olan GSH/GSSG oranı 45oC?de inkübe edilen hücrelerde 0,14?e düşmüştür. Hidrojen peroksit (%1, % 2,5) ile 60 dakikalık muamele sonucunda canlı hücre sayısı tespit edilebilir düzeyin altına düşmüştür. Bu nedenle GSH ve CYS tespit edilememiştir. Sodyum hipoklorit (%0,05, %0,5) ile 60 dakika muamele edilen hücrelerde GSH, CYS ve GSH/GSSG oranı kontrol grubundan daha yüksek bulunmuştur. GSH/GSSG oranının sodyum hipoklorit stresinde diğer streslere göre oldukça yüksek olduğu gözlenmiştir. Bu çalışmada uygulanan sıcaklık, NaCl ve sodyum hipoklorit stresleri hücre içi GSH ve CYS miktarlarının artışına neden olurken, pH stresi (3,0) CYS miktarında artışa neden olmuştur. Sıcaklık ve NaCl streslerinde GSH/GSSG oranı azalırken sodyum hipoklorit stresi ile bu oran yükselmiştir. Sonuç olarak, bu çalışmada elde edilen verilere göre glutatyonun farklı stres koşullarında E. coli O157:H7 hücrelerinin korunmasında rol oynadığı ancak sözkonusu savunma mekanizmasının strese göre farklılık gösterebileceği düşünülmektedir.

Özet (Çeviri)

The effect of acid adaptation, low pH (3,0), high growth temperature (45?C), NaCl (5%, 10%), H2O2 (1%, 2,5%) and sodium hypochlorite (0,05%, 0,5%) stresses on intracellular glutathione (GSH) and cysteine (CYS) contents in E. coli O157:H7 were investigated in vitro conditions. Intracellular GSH and CYS contents were analyzed by HPLC. While the number of viable cells in acid adapted group was close to the control group, the contents of intracellular GSH and CYS decreased as compared to the control. GSH/GSSG ratio decreased from 4.37 to 0.91. While GSH in the cells inoculated into pH 3.0 medium was not detected, the content of CYS detected to be approximately 15 fold higher as compared to the control. The GSH and CYS contents of the cells grown in medium containing 5% NaCl were 20.83 and 2.64 nmol/107 cfu, respectively. On the other hand, while GSH was not detected in growing cells in the medium containing 10% NaCl, content of CYS was approximately 2 fold higher than the cells grown in the medium containing 5% NaCl. GSH/GSSG ratio of cells in medium containing 5% NaCl is lower than control cells was calculated as 0.15, but it was not be able to calculate this ratio because of GSH could not be detected in the cells grown in 10% NaCl added medium. The content of GSH (1.72 nmol/107 cfu) in cells incubated for 6 hours at 45oC was higher than the cells grown at 37oC (0.27 nmol/107 cfu). After all, 2.11 of GSH/GSSG ratio in control group decreased to 0.14 in incubated cells at 45oC. After treatment with hydrogen peroxide (1%, 2.5%) for 60 minutes, the viable cell count decreased to below the detectable level. Therefore, GSH and CYS can not be detected in hydrogen peroxide treated groups. GSH, CYS and GSH/GSSG ratio in cells treated with sodium hypochlorite (0.05%, 0.5%) for 60 minutes were higher the control group. The ratio of GSH/GSSG was higher in sodium hypochlorite stress than the other stresses. While the temperature, NaCl and sodium hypochlorite stress conditions applied in this study lead to increase in contents of intracellular GSH and CYS, pH stress (pH 3.0) induced to increase in amount of CYS. The GSH/GSSG ratio decreases in temperature and NaCl stresses, but it increased with sodium hypochlorite stress. Finaly, according to data obtained in this study, it was concluded that glutathione plays role for protection of E. coli O157:H7 cells from different stresses, but the protection mechanism may differ according to the stress.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    151286

    Effects of heavy metal inhibition on the metabolism of various activated sludge bacteria

    Ağır metallerin yaratmış olduğu stres koşullarının çeşitli aktif çamur bakterilerinin metabolizmalarına olan etkileri

    GAMZE ÇELİKYILMAZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2004

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. CANDAN TAMERLER BEHAR

    PROF. DR. DERİN ORHON

  2. Tez No

    430918

    Contribution of DegP protease to the protein quality control in Escherichia coli

    DegP proteazinin Escherichia coli'de protein kalite kontrolüne olan katkisi

    YAPRAK ÖZAKMAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SİBEL SÜMER

  3. Tez No

    641378

    Synthetic genetic circuits to monitor nanomaterial triggered toxicity

    Nanomalzeme kaynaklı toksisitenin gözlemlenmesi için tasarlanan sentetik gen devreleri

    BEHİDE SALTEPE

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Biyomühendislikİhsan Doğramacı Bilkent Üniversitesi

    Malzeme Bilimi ve Nanoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ URARTU ÖZGÜR ŞAFAK ŞEKER

  4. Tez No

    720151

    Recombinant production and characterization of aquaporin protein isolated from geobacillus thermoleovorans ARTR1 and virgibacillus sp. agtr strains

    Vırgıbacıllus sp. agtr, geobacıllus thermoleovorans ARTR1 suşlarından izole edilen akuaporin proteininin rekombinant üretimi ve karakterizasyonu

    ŞEVVAL UYSALCAN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER

    DR. ÖĞR. ÜYESİ NACİYE ESRA ATEŞ GENCELİ

  5. Tez No

    546167

    Protein engineering applications on novel hAGEst enzyme for changing substrate specificity

    Özgün hAGEst enziminin substrat özgüllüğünün değiştirilmesine yönelik protein mühendisliği uygulamaları

    EREN BÜYÜKYAVUZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2019

    Biyomühendislikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER

Geri Dön