Kriyoprezervasyonun yardımcı üreme teknikleri ile elde edilen büyükbaş hayvan embriyoları üzerine etkilerinin histolojik yöntemlerle incelenmesi
Research of cryopreservation effect on cattle embryos produced by assisted reproductive technics via histological methods
- Tez No: 365961
- Danışmanlar: DOÇ. DR. UTKU ATEŞ
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Temel Tıp Bilimleri Bölümü
- Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 151
Özet
Amaç: Bu çalışmada yardımcı üreme teknikleri ile elde edilen büyükbaş hayvan embriyolarına uygulanan kriyoprezervasyon yöntemlerinin embriyolar üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.Yöntem: Mezbahaya kesime getirilen Holstein Cinsi 4-8 yaş aralığındaki sağlıklı ineklerden toplanan overlerden laboratuar ortamında folikül aspirasyon yöntemi ile elde edilen oositlerden; 3 tabakalı granüloza hücrelerine sahip olanlarına in vitro maturasyon işlemini takiben; ticari olarak satın alınan dondurulmuş boğa spermleri ile in IVF işlemi uygulandı. Slow freezing ve Vitrifikasyon gruplarındaki embriyolar dondurma işlemini takiben, -196 °C'deki sıvı azot içinde 1 gün süreyle saklandı. Kriyoprezervasyonun olası etkilerini histolojik yöntemlerle incelemek amacıyla 1gün sonra çözdürülen embriyolar; histoojik takip prosedürlerinden sonra ışık mikroskop, transmisyon elektron mikroskop, konfokal mikroskop ve floresan mikroskop ile incelendi.Bulgular: Slow freezing ve vitrifikasyon grubundaki embriyolarda çözdürme sonrası ZP'da incelme ve kırılma, hücre iskeleti hasarları ve blastomerler içerisinde yer alan organellerde meydana gelen dejenerasyonlara bağlı olduğu düşünülen hücre ölümleri gözlemlenmiştir. Mikroskobik incelemeler sonucunda hücre ölümlerinin nekroza bağlı geliştiği saptanmış, apoptotik bir sürece bağlı olacağını düşündüren bulgulara rastlanmamıştır. Kriyoprezervasyon ZP kalınlığında azalmaya neden olmaktadır. Blastosist gelişim oranları açısından kontrol grubu ile karşılaştırıldığında slow freezing ve vitrifikasyon yöntemiyle dondurulan embriyolarda çözdürme sonrası blastosist gelişiminin daha düşük olduğu, her iki grup arasında ise anlamlı bir fark bulunmadığı belirlenmiştir.Sonuç: Embriyo kriyoprezervasyonunun başlıca hedefi dondurma işleminden sonra çözdürülen embriyolarda yüksek canlılık oranlarının sağlanmasıdır. Dondurma-çözündürme sonrası canlılık oranları, uygulanan yönteme, embriyoların büyüklükleri ve gelişim evrelerine, hücrelerin geçirgenlik özelliklerine, kullanılan kriyoprotektanların toksisiteleri ve ozmotik özelliklerine bağlı olarak değişiklik göstermektedir. Büyükbaş hayvanlarda in vitro şartlarda elde edilmiş, 4 hücreli aşamadaki erken evre embriyolarda slow freezing ve vitrifikasyon uygulamaları sonrası sağkalım oranlarının düşük olduğu görülmüştür. Elde edilen bulgulara göre 4 hücreli inek embriyolarında kriyoprezervasyon sonrası görülen hücre ölümlerinin nekroza bağlı geliştiği düşünülmüştür. Uygulanan yönteme ve döneme özgü özelliklere bağlı kriyoprezervasyonun zararlı etkilerin anlaşılması ve azaltılması amacıyla daha geniş kapsamlı araştırmaların yapılması gerekmektedir.
Özet (Çeviri)
Purpose: Searching the effects of cryopreservation method that apply to the embryos derived with helping reproduction techniques, is aimed in this study.Method: The over taking out 4-8 aged healty Holstein bovine brought from butchery and the oosits derived with folicule aspiration method at labrotory from this over that have the 3 layers granulosa cells following IVF maturation with the frozen bull sperm bought commercially are implemented IVF. The embryos belong to slow freezing and vitrification groups, following the frozen process, saved 1 day in the fluid nitrogen at -196°C. The embryos melted after 1 day, aimed determing cryopreservation effects with histologic methods, examined light microscopy, transmission electron microscopy, confocal microscopy and flourasan microscopy after histologic following procedure.Findings: The cell death connected with dejeneration in organels, been in blastomers, cell skeleton damages, slimming and breaking in ZP in embryos of vitrification and slow freezing, after melting, observed. As result of microskobic examines, the cell death development connected with necrosis, not determined anything about apoptotic process. Criyopreservation cause decreasing at thickness of ZP. When comparasion the control group with the embryos frozen with slow freezing and vitrification methods as blastosist development rates, observed less blastosist development in frozen embryos with slow freezing and vitrification group and determined no meaning differencess between two groups.Result: The aim of embryo cryopreservation is providing high viabilite rates melted embryos after frozen process. The viabilite rates after freezing-melting show changes up to size of embryos and development phase, permeability species of cells, toxicities of used cryoprotectans and osmotic species. In the embryos in 4 cell stage early phase, derived from bovines in vitro conditions, survival rates are seemed low after slow freezing and vitrification applications. According to findings, the cell death seen in the 4 cell bovine embryos after cryopreservation, thought developt up to necrosis. Aiming of understanding and decreasing the damaged effects of cryopreservation up to applying method and species special to term, more wide searchs should be entailed.
Benzer Tezler
- Yardımlı üreme teknikleri ile elde edilen bos taurus embriyoları üzerine, yavaş dondurma ve melatoninin etkilerinin histolojik yöntemler ile incelenmesi
Histological investigation of the slow freezing and melatonin effect on bos taurus embryos obtained through assisted reproductive techniques
YASEMİN ADALI
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Histoloji ve EmbriyolojiEge ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YİĞİT UYANIKGİL
- The effect of FSH-priming on oocyte recovery, oocyte quality and in vitro embryo production in water buffaloes
Mandalarda FSH ile uyarmanın oosit kazanımı, kalitesi ve in vitro embriyo üretimi üzerine etkisi
GEORGIOS PETROVAS
Doktora
İngilizce
2022
Veteriner Hekimliğiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaDölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SERHAT ALKAN
PROF. DR. GİUSEPPE CAMPANILLE
- Analysis of sperm cytoplasmic mRNA content with special reference to the storage temperature and its possible impact on early embryonic development
Farklı saklama sıcaklığına bağlı olarak spermatozoonlarda sitoplazmik mRNA içeriğindeki değişimlerin erken embriyonik gelişim üzerine muhtemel etkileri
MAİA ÖZDEMİR
Yüksek Lisans
İngilizce
2021
Histoloji ve EmbriyolojiAydın Adnan Menderes ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALPASLAN GÖKÇİMEN
- Normospermik erkeklerde sperm kriyoprezervasyonu öncesi ve sonrasında spermatozoada dna fragmantasyonunun halosperm tekniği ile değerlendirilmesi
The evaluation of spermatozoon dna fragmentation in pre and post sperm cryopreservation about normospermic males with halo sperm technique
ŞENAY CANKUT
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyolojiMaltepe ÜniversitesiKlinik Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET CINCIK
- Kurkuminin dondurma-çözme işlemi sonrası sperm parametrelerine etkisi
Effect of curcumin on sperm parameters after the freezing-thawing process
FATMA NUR KARAKUŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2019
Histoloji ve Embriyolojiİstanbul ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEYHUN SOLAKOĞLU