Geri Dön

Koyun karaciğerinden aldoz redüktaz ve sorbitol dehidrogenaz enzimlerinin saflaştırılması ve bazı fenolik asitlerin enzimlerin aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

Purification of aldose reductase and sorbitol dehydrogenase enzymes from sheep liver and investigation of some phenolic acids effects on enzymes activity

  1. Tez No: 392135
  2. Yazar: HATİCE ESRA ASLAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Atatürk Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 165

Özet

Aldoz redüktaz [E.C 1.1.1.21] ve sorbitol dehidrogenaz [EC 1.1.1.14] enzimleri koyun karaciğerinden saflaştırıldı. AR enzimi homojenat hazırlanması, amonyum sülfat çöktürmesi, DE-52 Selüloz iyon değişim, Sephadex G-100 jel filtrasyon ve 2',5'-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi yöntemleri kullanılarak %2,11 verimle yaklaşık 161,9 kat saflaştırıldı. AR enzimi için optimum pH, optimum iyonik şiddet, optimum sıcaklık, aktivasyon enerjisi, aktivasyon entalpisi, Q10 ve stabil pH belirlendi. SDH enzimi ise koyun karaciğerinden homojenat hazırlanması, amonyum sülfat çöktürmesi, DE-52 Selüloz iyon değişim, CM-Selüloz C-52 iyon değişim ve Sephadex G-100 jel filtrasyon kromatografisi yöntemleri ile %0,53 verimle yaklaşık 9,07 kat saflaştırıldı. Enzimlerin saflığını kontrol etmek ve alt birim molekül kütlelerini tespit etmek amacıyla SDS-PAGE yapıldı ve enzimlerin alt birim molekül kütlesi koyun karaciğeri AR enzimi için 38,82 kDa ve SDH enzimi için 37,74 kDa olarak belirlendi. Ayrıca aldoz redüktaz enziminin substratı için KM ve Vmax değerleri hesaplandı. Daha sonra koyun karaciğeri AR ve SDH enzimi aktivitesi üzerine bazı fenolik asitlerin etkileri araştırıldı. İnhibisyon etkisi gösteren fenolik asitler için Linewear-Burk grafikleri ile Ki sabitleri ve inhibisyon tipleri tespit edildi.

Özet (Çeviri)

Aldose reductase [E.C 1.1.1.21] and sorbitol dehydrogenase [EC 1.1.1.14] were purified from sheep liver. AR was purified with a yield 2.11%and approximately 161.9 fold by preparation of homogenates, ammonium sulphate precipitation, DE-52 Selulose ion-exchange, Sephadex G-100 gel filtration and 2'.5'-ADP Sepharose 4B affinity chromatography techniques. Optimal pH, optimal ionic strenght, optimal temperature, activation energy, activation enthalpy, Q10 and stable pH were determined for AR enzyme. SDH was purified with a yield 0.53% and approximately 9.07 purification fold by preparation of homogenates, ammonium sulphate precipitation, DE-52 cellulose ion-exchange, CM-Selüloz C-52 ion-exchange and Sephadex G-100 gel filtration chromatography techniques. To check the purity and determine subunit molecular weights of enzymes, SDS-PAGE was performed which showed a single band and MW of approximately 38.82 kDa for sheep liver AR and 37.74 kDa for sheep liver SDH. In addition, KM and Vmax values for substrate of AR enzyme were calculated. Then effects of phenolic acids on sheep liver AR and SDH enzymes activities were investigated. For phenolic acids that exhibit inhibitory effect Ki constants were calculated and inhibition types were determined by the help Linewear-Burk curves

Benzer Tezler

  1. Koyun karaciğerinden glükoz-6-fosfat dehidrogenaz enziminin (EC 1.1.1.49) afinite kromatografisi ile saflaştırılması ve karakterizasyonu

    The Purification and characterization of glucose-6-phosphate dehydrogenase (EC 1.1.1.49) enzyme with affinity chromatography from ship liver

    SİNAN ALDEMİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    KimyaYüzüncü Yıl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. VEDAT TÜRKOĞLU

  2. Koyun karaciğerinden sorbitol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması ve enzim aktivitesi üzerine bazı ilaçların etkilerinin incelenmesi

    Purification of sorbitol dehydrogenase from sheep liver, investigation effects of some drugs on the enzyme

    ZUHAL ALIM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR

  3. Examination of the effect of some vitamins on glucose-6-phosphate dehydrogenase enzyme purified from sheep liver

    Koyun karaciğerinden saflaştırılan glukoz-6-fosfat dehidrogenaz enzimi üzerine bazı vitaminlerin etkisinin incelenmesi

    WARVIN H. M. SALIM MOHAMED SALIM

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyokimyaVan Yüzüncü Yıl Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ZEHRA BAŞ

  4. Koyun karaciğerinden glütatyon redüktaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of glutathione reductase enzyme from sheep liver

    GÖKTUĞ ULUSU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET ÇİFTÇİ

  5. Purification and characterization of cytochrome b5 from sheep liver microsomes

    Sitokrom b5'in koyun karaciğerinden saflaştırılması ve karakterizasyonu

    DENİZ YALÇIN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1998

    BiyokimyaOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EMEL ARINÇ