Protein G saflaştırılması için biyokromatografi materyali geliştirilmesi
Development of biochromatography material for protein G purification
- Tez No: 405982
- Danışmanlar: PROF. DR. ARZU ERSÖZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Anadolu Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 63
Özet
Bu çalışmada Streptekokal Protein G saflaştırılmasına yönelik IgG bağlı makro gözenekli kriyojel kolon dolgu materyali geliştirilmiş ve bu kolon dolgu materyalinin Protein G saflaştırılmasındaki etkinliği araştırılmıştır. Bu amaçla; çalışmanın ilk aşamasında fotosensitif rutenyum tabanlı aminoasit monomeri, bis(2,2'-bipiridil)MATrp-MATrp-rutenyum(II) kullanılarak ANADOLUCA metoduna göre poli(HEMA-ko-IgG) makro gözenekli kriyojel sentezlenmiştir. Sentezlenen kolon dolgu materyali, şişme testi, SEM ve FT-IR analizleri ile karakterize edilmiştir. Poli(HEMA-ko-IgG)'nin bağlama kapasitesi çalışmaları rekombinat Protein G kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Çalışmanın ikinci aşamasında; gerçek numune ile kolonun etkinliği incelenmiştir. Bu amaçla Streptococcus equi bakterisi kültüre edilmiş, hücre duvarı parçalanmış ve uygun ön deriştirme işlemlerinden sonra poli(HEMA-ko-IgG) kriyojeli kullanılarak Protein G saflaştırılmıştır. Çalışmanın son aşamasında ise saflaştırılmış Protein G'nin SDS-PAGE yöntemi kullanılarak molekül ağırlığı ve saflığı kontrol edilmiştir.
Özet (Çeviri)
In this study, IgG-bound macroporous cryogel column packing material has been developed and the effectiveness of this column packing material has been evaluated for Protein G purification from Streptococcus. For this purpose, in the first phase of the study, macroporous poly(HEMA-co-IgG) cryogel have been synthesized by using photosensitive ruthenium-based amino acid monomer, bis(2,2'-bipyridil)MATrp-MATrp-ruthenium(II), according to ANADOLUCA method. Characterization of the prepared cryogel columns has been carried out by swelling tests, SEM and FT-IR analyses. The binding capacity studies for poly(HEMA-co-IgG) have been performed using recombinant Protein G. In the second step of the study, the efficacy of colon has been investigated for real samples. For this purpose, Streptococcus equi bacteria has been cultured, the cell wall has been broken and then, Protein G has been purified using poly(HEMA-co-IgG) cryogel after the appropriate pre-concentration process. In the final step of the study, the molecular weight and purity of purified Protein G have been determined using SDS-PAGE method.
Benzer Tezler
- İmmunoglobulin G saflaştırılması için L-lizin baskılanmış seçici kriyojellerin hazırlanması
Preparation of L-lysine imprinted specific cryogels for immunoglobulin G purification
SENEM ÇULHA
- Magnetic affinity sorbents for antibody purification
Antibadi saflaştırılması için magnetik afinite sorbentleri
SİNAN AKGÖL
- İmmobı̇lı̇ze metal affı̇nı̇te kromatografı̇sı̇ ı̇le fosfoproteı̇n ı̇zolasyonu ı̇çı̇n sı̇lı̇ka bazlı sabı̇t fazların sentezı̇ ve karakterı̇zasyonu
Synthesis and characterization of silica-based stationary phases for phosphoprotein isolation via immobilized metal affinity chromatography
DUYGU YILDIRIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN ALİ TUNCEL
DR. ÖĞR. ÜYESİ FATOŞ ÇİĞDEM KİP
- Protein A baskılanmış süpermakrogözenekli poli (hidroksietil-metakrilat) kriyojeller
Protein a imprinted supermacroporous poly(hydroxyethyl-metacrylate) based cryogels
SEVGİ ASLIYÜCE ÇOBAN
- Protein C saflaştırılması için moleküler baskılanmış adsorbentler
Molecular imprinted adsorbents for protein C purification
BİNNAZ DEMİRCİ
