Geri Dön

AMHR2 reseptörünü hedef alan monoklonal antikorların üretilmesi

Production of monoclonal antibodies specific for AMHR2 receptor

PDF İndir

  1. Tez No: 447474
  2. Yazar: HURİYE AKSU
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. AHMET EKEN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2016
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Erciyes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 92

Özet

Over kanseri kadınlarda kanser nedenli ölümlerde beşinci sıradadır. Genel olarak over kanserli hastaların 5 yıllık hayatta kalma oranları %44'tür. Anti Mullerian Hormon Reseptör 2 (AMHR2), anti mullerian hormonun (AMH) bağlandığı hücre zarında bulunan transmembran bir reseptördür. AMHR2 insanlarda over kanserlerinin çoğunluğunda üretilen over spesifik bir antijendir. Monoklonal antikorlar (MAbs) antikor üreten B lenfositlerle myeloma hücrelerinin füzyonu sonucu elde edilmiş stabil hibridoma klonları tarafından üretilir. Monoklonal antikorların klinik ve tanı laboratuarlarında kullanımı yaygındır. Kanser hücrelerinde yüksek miktarda ve doku spesifik olarak üretilen reseptörler ile büyüme faktörlerini hedef alan monoklonal antikorlar klinik uygulamalara en fazla aktarılan ve onaylanan kanser immünoterapi uygulamasıdır. Over kanseri için klinik olarak onaylanmış VEGF'i hedef alan sadece bir monoklonal antikor bulunmaktadır. Bu çalışmada hibridoma teknolojisi kullanılarak over kanserinde üretilen AMHR2'nin ekstrasellüler kısmına spesifik CNANYSHLPPPGSPGTPGSQ ve MQGCRDSDEPGCESLHCDPS peptitleri hedef alan monoklonal antikorların üretimi amaçlanmıştır. Sonrasında elde edilen monoklonal antikorların SKOV-3 insan over kanser hücreleri tarafından üretilen AMHR2'ye bağlanabilirliklerinin test edilmesi amaçlanmıştır. Çalışmanın ilk aşamasında, iki farklı hedef antijene karşı stabil şekilde monoklonal antikor üreten beş klon (P2C9 ve P3B1, P2A6, P10B6, P10A10) elde edildi. Elde edilen klonların rekombinant AMHR2'nin doğal katlanmış formuna bağlanabilirliği ELISA ile test edildi. ELISA deneyinde, P2C9 ve P3B1, P10B6, P10A10 klonları güçlü bağlanma gösterirken, P2A6 daha zayıf bağlanma gösterdi. Ayrıca, transfekte edilmiş SKOV-3 insan over kanser hücreleri tarafından üretilen AMHR2'nin denatüre formuna antikorların bağlanması western blot ile test edildi. P3B1 ve P2C9 klonu güçlü, P10B6 ve P10A10 klonları zayıf şekilde, P2A6'nın ise bağlanmadığı görüldü. Sonuç olarak, Peptit 1'e (CNANYSHLPPPGSPGTPGSQ) spesifik antikor üreten P3B1, P2A6, P10B6, P10A10 klonları ve Peptit 2'ye (MQGCRDSDEPGCESLHCDPS) spesifik antikor üreten P2C9 klonu elde edildi. İnsan over kanser hücreleri tarafından üretilen AMHR2'nin denatüre formuna bağlanan antikorların over kanseri tanısında ve immunoterapisinde kullanım potansiyeli olduğunu düşünmekteyiz.

Özet (Çeviri)

Ovarian cancer is the fifth most lethal cancer in women. Five-year-survival rate of ovarian cancer patients is 44%. Anti Mullerian Hormone Receptor Type 2 (AMHR2) is a transmembrane receptor that islocated on the cell membrane and Anti Mullerian Hormone (AMH) binds to AMHR2. AMHR2 is an ovary specific antigen that is expressed in the most of the ovarian cancers. Monoclonal antibodies (MAbs) are produced by stable hybridoma clones which are obtained by the fusion of antibody producing B lymphocytes and myeloma cells. The use of MAbs in the clinic and diagnostic laboratories are common. MAbs targeting tissue specific overexpressed antigens or receptors or growth factors in cancer cells are the most common and clinically approved application of cancer immunotherapy. There is only one clinically approved monoclonal antibody for ovarian cancer which targets VEGF. In this study, we aimed to produce monoclonal antibodies targeting CNANYSHLPPPGSPGTPGSQ and MQGCRDSDEPGCESLHCDPS peptides which are specific to the extracellular domain of AMHR2 by using hybridoma technology Then we aimed to test the binding abilities of these MAbs to AMHR2 expressed by SKOV-3 ovarian cancer cells. In the first part of the study, 5 stable hybridoma clones (P2C9, P3B1, P2A6, P10B6, P10A10), which produce MAbs specific for two peptides, were produced. MAbs were tested for their affinity to native recombinant AMHR2 by using ELISA. P2C9, P3B1, P10B6 and P10A10 showed strong affinity in the ELISA experiment, however, P2A6 showed weak affinity. Next, MAbs were tested for their affinity to bind AMHR2 expressed by transfected SKOV-3 ovarian cancer cells by western blot. In the western blot experiment, P3B1 and P2C9 clones showed strong affinity, P10B6 and P10A10 clones showed weak affinity and P2A6 did not show affinity. In conclusion, 4 MAbs for peptide 1 (CNANYSHLPPPGSPGTPGSQ) and one MAb for peptide 2 (MQGCRDSDEPGCESLHCDPS) were produced. These Mabs with their affinity for native and denatured forms of AMHR2 have the potential use for diagnostics and immunotherapy of ovarian cancer.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    437694

    AMHR2 reseptörünün EAPPNRRTCVFFEAPGVRGS ve NLTQDRAQVEMQGCRDSDEP peptitlerini hedef alan monoklonal antikorların üretilmesi

    Production of monoclonal antibodies specific for EAPPNRRTCVFFEAPGVRGS and NLTQDRAQVEMQGCRDSDEP peptides in receptor of the AHMHR-2

    ALİ TURAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Tıbbi BiyolojiErciyes Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇAĞRI ŞAKALAR

  2. Tez No

    891524

    Benign ve malign endometrial dokuda anti-mülleryan hormon reseptör Tip 2 ekspresyonunun prospektif olarak karşılaştırılması

    Prospective comparison of anti-mullerian hormone receptor Type 2 expression in benign and malignant endometrial tissue

    MURAT YAZGAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Kadın Hastalıkları ve DoğumSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATMA NURGÜL TAŞGÖZ

  3. Tez No

    359211

    Overin yüzey epiteli malign tümörlerinde immünohistokimyasal belirteçler kullanılarak prognozun belirlenmesi

    Determining prognosis of malignant tumors of the ovary surface epithelium using immunohistochemical markers

    SİNAN NAZLIM

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    PatolojiErciyes Üniversitesi

    Patoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FİGEN ÖZTÜRK

  4. Tez No

    478907

    Rekombinant FHS'nın IVF tedavisi uygulanan polikistik over sendromu hastalarının follikül sıvılarından elde edilen granüloza hücrelerinde konneksin 43 üzerine etkisi

    Effect of recombinant follicle stimulating hormone (FSH) on connexin 43 activity of granulosa cells of patients with polycystic ovary syndrome (PCOS)

    RAMIN HASHEMIHESAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Histoloji ve EmbriyolojiHacettepe Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı

    PROF. DR. LALE KARAKOÇ SÖKMENSÜER

  5. Tez No

    660197

    Hipospadias tanılı olgularda genotip-fenotip ilişkisinin karşılaştırması

    Comparision of genotype and phenotype correlation in patients with hipospadias

    GÖKÇE SÖNMEZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Çocuk CerrahisiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Çocuk Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    UZMAN ÖKKAŞ AYTAÇ KARKINER

Geri Dön