Butirilkolinesterazın insan serumundan saflaştırılması ve metal iyonları ile inhibisyonunun kinetik incelenmesi
Purification of human serum butyrylcholinesterase and inhibition kinetics by some metal ions
- Tez No: 48098
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. A. NEŞE ÇOKUĞRAŞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: İnsan serumu, butirilkolinesteraz inhibisyo- nu, Al3+, Zn2+, Cd2+, Li+, Human serum, butyrylcholinesterase inhibition, A13+, Zn2+, Cd2+, Li+
- Yıl: 1996
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 48
Özet
Butirilkolinesteraz (BKE; açilkolin açilhidrolaz E.C. 3.1.1.8) insan serumundan 6600 kez saflaştırıldı. Saflaştırma işleminde sırasıyla, pH 4.5'de asitte çöktürme basamağı da içeren % 55 - % 70 arası amonyum sülfat kesitlemesi ve Prokainamid - Sepharose 4B afinite kromatografisi kullanıldı. Substrat olarak butiriltiyokolin iyodür (BTK) kullanılarak, saflaş- tınlan enzimin Al3+, Zn2+, Cd2+ ve Li+ tarafından inhibisyon kinetikleri çalışıldı. Katyon içermeyen (kontrol doğrusu) ve farklı derişimlerde katyon içeren deney ortamlarında çalışılarak hızlar ölçüldü ve 1/v'ye karşı 1/[BTK] değerleri grafiklendiğinde, doğruların l/[BTK]-ekseninin üze rinde kesiştiği saptandı. Bu sonuçlar inhibisyonlann karışık tipte olduğunu gösterir. Fakat, 4 mM BTK derişiminde katyonların derişimleri arttırıldıkça hızın azalması ve katyonların yüksek derişimlerinde sabit bir değere ulaşması, inhibisyonların hiperbolik karışık tipte olduğuna işaret eder. Lineweaver - Burk doğrularının 1/v-eksenini kestiği noktalarla katyonların derişimleri arasında çizilecek ikincil grafikler birer hiperbol olduğu için, katyonlara ait a, P ve Ki değerleri l/A Kesim Noktalarına karşı 1/ [Katyon] değerlerinin grafiklenmesiyle elde edilen doğrulardan hesaplandı. Zn2+ veya Cd2+ ile inhibe edilen enzimin bu formu, Ca2+ ve Mg2+ ile reaktive edilebildi.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT human serum. The procedure included ammonium sulfate fractionation (55% - 70%) with acid step at pH 4.5 and Procainamide - Sepharose 4B affinity chromatography. Inhibition kinetics of the purified enzyme by Al3+, Zn2+, Cd2+ and Li+ were studied using butyrylthio choline iodide (BTCh) as substrate. The 1 /v vs 1 /[BTCh] plots in the absence (control plot) and in the presence of different concentrations of cations, intersected above the l/[BTCh] - axis. These results demostrate that, the inhibitions are mixed-type. But, when the concentrations of the cations were increased at 4 mM BTCh, velocities decreased and gave limiting finite values at high concentrations of cations, indicating that inhibitions are hyperbolic mixed-type. Since, the secondary plot, 1/v-axis intercept vs concentration of cation was a hyperbola, a, P and Ki values were determined from the plots of 1/A Intercept vs 1/ [Cation]. When the enzyme was inhibited by Zn2+ or Cd2+, Ca2+ and Mg2+ reactivated the inhibited form of BChE.
Benzer Tezler
- İnsan serum bütirilkolinesterazı ve eritrosit asetilkolinesterazının statin türevleri ile etkileşiminin incelenmesi
Effects of statins on human serum butyrylcholinesterase and erythrocyte acetylcholinesterase
MELTEM ATAY
- Fetal sığır serum asetilkolinesterazının tetramerik yapısını organize eden poliprolin peptidlerin kütle spektrometre ile analizi
Determination of polyproline tetramer organizing peptides in fetal bovine serum acetylcholinesterase by mass spectrometry
KEVSER BİBEROĞLU
Doktora
Türkçe
2014
BiyokimyaHacettepe ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZDEN TACAL
PROF. DR. Oksana Lockridge
- İnsan serum butirilkolinesteraz aktivitesi üzerine Benactyzine ve Drofenine'nin etkileri
Inhibition effects of benactyzine and drofenine on human serum butyrylcholinesterase
EBRU BODUR
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
BiyokimyaHacettepe ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. AYŞE NEŞE ÇOKUĞRAŞ
- Kolinesterazlarda yapı-katalitik etki ilişkisinin triarilmetan ve fenoksazin yapılı ligandlar aracılığıyla araştırılması
The study of structure-effect relations in cholinesterases by use of triarylmethane and phenoxazine dyes
ZEKİYE TUBA TÜYLÜ KÜÇÜKKILINÇ
- Yeni sentezlenen bazı sülfonamid türevlerinin karbonik anhidraz ve kolinesteraz enzim inhibisyon potansiyellerinin belirlenmesi
Determination of the carbonic anhydrase and cholinesterase enzyme inhibition potentials of some new synthesis sulphonami̇de derivatives
MUHAMMET GÜRKAN KURBAN
Doktora
Türkçe
2023
BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MURAT ŞENTÜRK