Tortum elmasından (Malus sylvestris.) polifenol oksidaz enziminin afinite kromatografisi ile saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı kimyasalların enzim aktivitesi üzerine etkisinin incelenmesi
Purification of polyphenol oxidase enzym from tortum apple (Malus sylvestris.) by affinity chromatography, characterization and investigate the effect of some chemicals on the enzym activity
- Tez No: 483665
- Danışmanlar: PROF. DR. ÖMER İRFAN KÜFREVİOĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 85
Özet
Polifenol oksidaz enzimi bazı sebze ve meyvelerde enzimatik kararmaya neden olur. Bu çalışmada, PFO enzimi Tortum elmasından (Malus sylvestris.) Sepharose 4B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit afinite kolonu ile ilk kez saflaştırıldı. Enzimin saflığının kontrolü sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforeziyle yapıldı. Katekol ve 4-metil katekol substratları kullanılarak PFO enziminin optimum pH, optimum sıcaklık, optimum iyonik şiddet, stabil pH, KM ve Vmax değerleri belirlendi. Enzimin iki ayrı substratı için sırasıyla optimum pH'sı 5,0-5,5; optimum sıcaklığı 10°C; optimum iyonik şiddeti 0,05 M; stabil pH'sı 5,5, KM değeri 6,17-4,16 mM, Vmax değeri 3,38-7,75 µmol/dk olarak belirlendi. İnhibitör çalışmalarında askorbik asit, sodyum azit, tiyoüre, GSH ve DTT çalışıldı. Bu inhibitörler için beş farklı inhibitör konsantrasyonunda IC50 değerleri belirlendi. Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla bu inhibitörler için Ki sabitleri ve inhibisyon türleri belirlendi. Ki sabitleri ve IC50 değerlerine göre en etkili inhibitörün askorbik asit olduğu tespit edildi.
Özet (Çeviri)
Polyphenol oxidase enzyme causes the enzymatic browning in some fruits and vegetables. In this study, the PFO enzyme was purified for the first time using the Sepharose 4B-L-tyrosine-p-aminobenzoic acid affinity column from Tortum apple. The purity of the enzyme was determined by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Optimum pH, optimum temperature, optimum ionic strength, stable pH, KM and Vmax values of PPO enzyme were determined using catechol and 4-metil catechol substrates. The optimum pH and temperature of PPO were determined as 5,0-5.5, 10°C. Optimum ionic strength of this enzyme was found as 0,05 M for both substrates. KM constants and Vmax values of enzyme for the used two substrates were found as 6,17-4,16 mM and 3,38-7,75 µmol/dk, respectively. Ascorbic acid, sodium azide, thiourea, GSH and DTT were studied in inhibitor studies. IC50 values were determined in five different inhibitor concentrations for these inhibitors. Ki constant and the types of inhibition of these inhibitors were determined by using Lineweaver-Burk graphics. Ascorbic acid was appointed to be the most effective inhibitor according to the Ki constants and values of IC50.
Benzer Tezler
- Erzurum Tortum ilçesinde bulunan mimari eserler
Architectural works in Erzurum Tortum district
HALİL İBRAHİM ÜN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Sanat TarihiAtatürk ÜniversitesiSanat Tarihi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN YURTTAŞ
- Haho Manastırı mimarisi
Haho Monastery architecture
FİTNET CELEP
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
Sanat TarihiCumhuriyet ÜniversitesiTarih Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ EBRU BİLGET FATAHA
- Diatomit ve kömür cürufu katkılı pomzanın tarımsal yapılarda duvar malzemesi olarak kullanılması olanakları üzerine bir çalışma
A study on the possiblities of using diatomite and coal slag added pumice as wall materi̇als in agricultural structures
İBRAHİM DUNDAR
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Endüstri Ürünleri TasarımıAtatürk ÜniversitesiTarımsal Yapılar ve Sulama Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FATİH MEHMET KIZILOĞLU
- Determination of PAH pollution and anaerobic PAH degradation activity in Marmara sea sediment
Marmara deniz sedimanlarında PAH kirliliğinin ve anaerobik PAH yıkım aktivitelerinin tespit edilmesi
SELDA BAYIR DEMİRCİOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiÇevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ORHAN İNCE
- Ankara Kızılcahamam Kınık Tüneli'ndeki jeoteknik problemler
Investigation of the geotecnical problems the Kınık Tunnel, Kızılcahamam Ankara
RIZA MUCUKGİL
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
Jeoloji MühendisliğiAnkara ÜniversitesiJeoloji Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ERGUN GÖKTEN