Köpek mezenkimal kök hücrelerinin in-vitro nörojenik farklılaştırılması ve özelliklerinin incelenmesi
In-vitro neurogenic differentiation of canne mesenchymal stem cells and evaluation of properties
- Tez No: 489276
- Danışmanlar: PROF. DR. YAŞAR MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Biyokimya, Chemistry, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada köpek kemik iliği mezenkimal kök hücrelerin izolasyonu, kültürü, karakterizasyonu ve in-vitro ortamda nörojenik nesile farklılaştırılması incelenmiştir. Köpeğin iliak krestinden toplanan köpek kemik iliği mezenkimal kök hücreleri (Kİ-MKH) hücre kültürü ortamında çoğaltıldı. Çoğaltılan hücrelerin karakterizasyonu için koloni oluşturma potansiyelleri, empedansa dayalı hücre analiz sistemi ile hücre büyüme eğrisi, çoklu soy ve akım sitometri analizleri gerçekleştirildi. Bu aşamadan sonra köpek Kİ-MKH'leri, geliştirilen iki-aşamalı nörojenik farklılaştırma protokolüne tâbi tutuldu. Nöroküre oluşturmak amacıyla yapılan ilk indüksiyon aşamasında hücreler; epidermal büyüme faktörü (EGF) ve bazik fibroblast büyüme faktörü (bFGF) içeren nörobazal vasatta kültüre alındı. Üç gün süren ilk indüksiyon aşamasından sonra elde edilen nöroküreler ışık mikroskobunda görüntülendi. Nöroküre oluşum aşamasından sonra nörojenik farklılaşmanın ikinci basamağı olan nöron-benzeri hücre oluşum aşamasına geçildi. Dağıtılan nöroküreler, sinir büyüme faktörü (NGF), beyin-kaynaklı nörotrofik faktörü (BDNF) içeren nörobazal vasatta altı gün kültüre alındı. İkinci indüksiyon aşaması sonunda nörojenik nesile farklılaştırılmış köpek Kİ-MKH'lerinin immunhistokimya boyamaları yapıldı. İn-vitro ortamda, köpek kemik iliğinden izole edilen hücrelerin mezenkimal karakterde olduğu, nöronal ve glial işaretçileri ifade eden hücrelere farklılaşabildiği ve bu hücrelerin ise gelecekte sinir doku hasarlarının tedavisinde fonksiyonel yenilenme için kullanılabilme potansiyeline sahip olduğu gözlendi.
Özet (Çeviri)
In this study, we have investigated the mesenchymal properties and neurogenic differentiation potentials of cultured canine bone marrow stem cells. Canine mesenchymal stem cells isolated from the iliac crest of canine were proliferated under sterile conditions. The mesenchymal properties of the cultured cells were confirmed using coloniy forming unit, impedance-based cell analysis system, lineage and flow cytometry analysis. At passage 2; BM-MSCs were induced into the neurogenic lineage by a two-step differentiation protocol. Cells were placed in tissue culture flasks coated with poly(hydroxyethylmethacrylate) and cultured in the B-27 and N-2 containing neurobasal medium. At the second step, the acquired neurospheres were disaggregated and the cell suspension was plated in tissue culture flasks which were coated with poly-L-ornithine. The neurosphere-derived cell suspension was then cultured for six days in the neurobasal medium supplemented with nerve growth factor (NGF) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) for further induction into the neurogenic lineage. For determination of neurogenic differentiation of the mesenchymal stem cells, primary antibodies were used. The findings indicated that mesenchymal stem cells differentiate into cells expressing neuronal and glial markers in vitro and some mesenchymal stem cells exhibit neural potential.
Benzer Tezler
- Interaction mechanisms between small cell lung cancer cells and T lymphocytes
Küçük hücreli akciğer kanseri hücrelerinin T lenfositler ile etkileşim mekanizmaları
MUAMMER ALPER KURŞUNEL
Doktora
İngilizce
2019
Moleküler TıpHacettepe ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜNEŞ ESENDAĞLI
- The effect of Wharton's jelly extracellular matrix/tannic acid supplementation on porous gelatin foams (Effet de la supplémentation par de la matrice extracellulaire de la gelée de Wharton et de l'acide tannique sur des mousses de gélatine poreuse)
Wharton jel ekstraselüler matriksi/tanik asit ilavesinin gözenekli jelatin köpükler üzerindeki etkisi
EMİNE BERBER
Doktora
İngilizce
2021
BiyomühendislikUnıversıte de StrasbourgBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FLORENT MEYER
DR. NİHAL ENGİN VRANA
- Poli (bütilenadipat-ko-tereftalat) (PBAT)-bazlı nanotopografik fibröz doku iskelelerinin üretimi ve hücresel davranışların incelenmesi
Production of poly (Buthyleneadipate-co-terephthalate) (PBAT)-based nanotopographic fibrous tissue scaffolds and investigation of cellular behaviors
ZEYNEP İLHAN
Doktora
Türkçe
2024
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU
- Köpeklerde oluşturulan sınıf-II furkasyon defektlerinin tedavisinde mezenkimal kök hücre ve otojen kemik greftlerinin karşılaştırılması
Comparison of mesenchymal stem cells and autogenous bone grafts in the treatment of experimental class-II furcation defects in dogs
SELEN BURÇAK ŞİMŞEK
Doktora
Türkçe
2008
Diş HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiPeriodontoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GONCA ÇAYIR KELEŞ
- Deneysel siyatik sinir hasarında poli(3-hidroksibütirat-ko-3-hidroksiheksanoat) (PHBHHX) ve mezenşimal kök hücre (MSC) kullanımının aksonal rejenerasyona etkisi
The effect of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate) PHBHHX and mesenchymal stem cell (MSC) on axonal regeneration in experimental sciatic nerve damage
MUSTAFA SAKAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
NöroşirürjiHacettepe ÜniversitesiNöroşirürji Ana Bilim Dalı
DR. GÖKHAN BOZKURT