Köpek mezenkimal kök hücrelerinin in-vitro nörojenik farklılaştırılması ve özelliklerinin incelenmesi
In-vitro neurogenic differentiation of canne mesenchymal stem cells and evaluation of properties
- Tez No: 489276
- Danışmanlar: PROF. DR. YAŞAR MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 94
Özet
Bu çalışmada köpek kemik iliği mezenkimal kök hücrelerin izolasyonu, kültürü, karakterizasyonu ve in-vitro ortamda nörojenik nesile farklılaştırılması incelenmiştir. Köpeğin iliak krestinden toplanan köpek kemik iliği mezenkimal kök hücreleri (Kİ-MKH) hücre kültürü ortamında çoğaltıldı. Çoğaltılan hücrelerin karakterizasyonu için koloni oluşturma potansiyelleri, empedansa dayalı hücre analiz sistemi ile hücre büyüme eğrisi, çoklu soy ve akım sitometri analizleri gerçekleştirildi. Bu aşamadan sonra köpek Kİ-MKH'leri, geliştirilen iki-aşamalı nörojenik farklılaştırma protokolüne tâbi tutuldu. Nöroküre oluşturmak amacıyla yapılan ilk indüksiyon aşamasında hücreler; epidermal büyüme faktörü (EGF) ve bazik fibroblast büyüme faktörü (bFGF) içeren nörobazal vasatta kültüre alındı. Üç gün süren ilk indüksiyon aşamasından sonra elde edilen nöroküreler ışık mikroskobunda görüntülendi. Nöroküre oluşum aşamasından sonra nörojenik farklılaşmanın ikinci basamağı olan nöron-benzeri hücre oluşum aşamasına geçildi. Dağıtılan nöroküreler, sinir büyüme faktörü (NGF), beyin-kaynaklı nörotrofik faktörü (BDNF) içeren nörobazal vasatta altı gün kültüre alındı. İkinci indüksiyon aşaması sonunda nörojenik nesile farklılaştırılmış köpek Kİ-MKH'lerinin immunhistokimya boyamaları yapıldı. İn-vitro ortamda, köpek kemik iliğinden izole edilen hücrelerin mezenkimal karakterde olduğu, nöronal ve glial işaretçileri ifade eden hücrelere farklılaşabildiği ve bu hücrelerin ise gelecekte sinir doku hasarlarının tedavisinde fonksiyonel yenilenme için kullanılabilme potansiyeline sahip olduğu gözlendi.
Özet (Çeviri)
In this study, we have investigated the mesenchymal properties and neurogenic differentiation potentials of cultured canine bone marrow stem cells. Canine mesenchymal stem cells isolated from the iliac crest of canine were proliferated under sterile conditions. The mesenchymal properties of the cultured cells were confirmed using coloniy forming unit, impedance-based cell analysis system, lineage and flow cytometry analysis. At passage 2; BM-MSCs were induced into the neurogenic lineage by a two-step differentiation protocol. Cells were placed in tissue culture flasks coated with poly(hydroxyethylmethacrylate) and cultured in the B-27 and N-2 containing neurobasal medium. At the second step, the acquired neurospheres were disaggregated and the cell suspension was plated in tissue culture flasks which were coated with poly-L-ornithine. The neurosphere-derived cell suspension was then cultured for six days in the neurobasal medium supplemented with nerve growth factor (NGF) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) for further induction into the neurogenic lineage. For determination of neurogenic differentiation of the mesenchymal stem cells, primary antibodies were used. The findings indicated that mesenchymal stem cells differentiate into cells expressing neuronal and glial markers in vitro and some mesenchymal stem cells exhibit neural potential.
Benzer Tezler
- Köpeklerde oluşturulan sınıf-II furkasyon defektlerinin tedavisinde mezenkimal kök hücre ve otojen kemik greftlerinin karşılaştırılması
Comparison of mesenchymal stem cells and autogenous bone grafts in the treatment of experimental class-II furcation defects in dogs
SELEN BURÇAK ŞİMŞEK
Doktora
Türkçe
2008
Diş HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiPeriodontoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GONCA ÇAYIR KELEŞ
- Ön çapraz bağ yırtıklarında Epidermal Büyüme Faktörünün (EGF) bağın iyileşmesi üzerine etkilerinin incelenmesi
Analysis of effects of Epidermal Growth Factor (EGF) on ligament healing in anterior cruciate ligament tears
CENK İLGAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
Ortopedi ve TravmatolojiHacettepe ÜniversitesiOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MAHMUT NEDİM DORAL
- Köpek yumuşak doku tümörlerinde calprotectin+ lökosit infiltrasyonlarının araştırılması
Investigation of calprotectin+ leukocyte infiltrations in canine soft tissue tumors
ONUR SAVAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
PatolojiBurdur Mehmet Akif Ersoy ÜniversitesiVeterinerlik Patolojisi Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ VOLKAN İPEK
- Kliniğimize getirilen kedi ve köpeklerde karşılaşılan tümör olguları ve sağaltım olanakları
The treatment facilities of tumor cases in cats and dogs brought to our clinic
SILA SARI
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Veteriner HekimliğiAdnan Menderes ÜniversitesiCerrahi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ BELGE
- Kedi ve köpek böbrek lezyonlarının patomorfolojik ve immunohistokimyasal yöntemlerle karşılaştırmalı olarak incelenmesi
Comparative investigation of kidney lesions of cat and dog with pathomorphological and immunohistochemical methods
TUNCER KUTLU
Doktora
Türkçe
2017
Veteriner HekimliğiAnkara ÜniversitesiPatoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜNAY ALÇIĞIR