UV mutajenez yöntemini kullanarak s.cerevisiae mayasında beta karoten ve likopen miktarının artırılması
Increasing amount of beta carotene and lycopene in s.cerevisiae by UV mutagenesis
- Tez No: 496890
- Danışmanlar: PROF. DR. EMİNE SEVDA MENEVŞE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Medical Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 142
Özet
Karotenler bazı bakteriler, algler ve bitkilerin yapısında bulunan, pigment olarak adlandırılan organik yapılı maddelerdir. Karotenlerin bitkiler için fotosentezde rol almasının yanı sıra diğer canlılarda da görme, kemik gelişimi, deride renk oluşumu gibi görevleri bulunmaktadır. Son yıllarda yapılan bazı araştırmalar ise karotenlerin antioksidan, antitümör ve antienflamatuar etkilerinin de bulunduğunu ortaya koymuştur. Canlılar için bu kadar öneme sahip karotenler günümüzde yalnızca bazı kimyasal yollarla veya ana organizmadan masraflı ve zor metodlarla elde edilebilmektedir. Günümüzde metabolik mühendislik çalışmalarıyla canlılar için önemli olan birçok madde model organizmalar tarafından üretilebilmektedir. S.cerevisiae mayasında beta karoten ve likopen üretimi de son yılların gözde metabolik mühendislik çalışmalarından biridir. Bu konuyla ilgili yapılan önceki çalışmalarda normal koşullarda beta karoten ve likopen üretimi yapamayan S.cerevisiae mayasına bitkilerde karoten üretimini sağlayan genler aktarılarak bu genlerin ekmek mayasında ifadesi sağlanmış ve az miktarlarda beta karoten ve likopen üretimi yapılabilmiştir. Bu araştırmada S.cerevisiae mayasında kolay ve ekonomik yollarla üretilen beta karoten ve likopen üretiminin UV mutajenez yöntemiyle artırılması amaçlandı. Bu yöntem AB tarafından kabul edilmiş bir yöntemdir ve GDO kapsamına girmemektedir. Farklı sürelerde UV'ye maruz bırakılan maya hücreleri farklı renklerde çok sayıda koloniler üretti. Fenotipik tarama sonucunda elde ettiğimiz bu koloniler içerisinden koyu renkli ve sağlıklı olanlar seçildi. Bu seçilen koloniler sıvı besi yerinde büyütülerek 3 gün boyunca OD ölçümü yapıldı ve büyüme eğrileri oluşturuldu. Bu suşlardan karoten ekstraksiyonu yapılarak total karoten miktarları, HPLC yöntemiyle suştaki spesifik karoten miktarları tayin edildi. 100 µj/2 sn 6-6 suşunda 725,6764 mg/ml beta karoten, yine aynı suşta 68 mg/ml likopen ve 100 µj/2 sn 6-5 suşunda 7 µg/g total karoten üretimi gözlenmiştir. Ancak tüm suşlar deney ve kontrol grubu olarak Wilcoxon testiyle analiz edilmiş ve deney grubunda anlamlı bir fark gözlenmemiştir.
Özet (Çeviri)
Carotenoids are organic matters named pigments inside some bacteria, algae and plants. Carotenoids play a great role in photosynthes for plants besides participate in seeing, developing bone, colouring in skin for other organisms. Recent studies reveal antitumor, antiinflamatuar, antioxidane effects of carotenoids. Important for all organisms carotenoids can get only by some chemical ways or hard and expensive extraction from host organisms. Nowadays many matters have importance for organisms can produced by model organisms with metabolic engineering applications. Producing beta carotene and lycopene in S.cerevisiae is one of the most popular metabolic engineering study in recent years. In previous studies related this subject transfering genes produced carotenoids from plants to S.cerevisiae can not produce carotenoids naturally and expressed this genes in yeast and produced in small quantities beta carotene and lycopene. Purpose of this study is increasing amount of beta carotene and lycopene produced with easy and economic ways in S.cerevisiae by UV mutagenesis. This method is approved by AB and is not GDO. Yeast cells are exposed to UV with different times constitue lots of colonies with different colours. Dark orange and healthy colonies are choosen among other colonies by fenotipic screening. These colonies are incubated liquid media also OD measuring are made during three days and made OD curves. Total carotenoids amount is calculated by made extraction of carotenoids from these yeast cells and specific carotenoid amount is designated in these strains by HPLC method. 725,6764 mg/ml beta carotene and 68 mg/ml licopene are produced by 100 µj/2 sn 6-6 and 7 µg/g total carotenoid is produced by 100 µj/2 sn 6-5. However all strains are analyzed by Wilcoxon test as control and treatment group and is not observed remarkable difference between them.
Benzer Tezler
- Expression of genes encoding fundamental copper homeostasis proteins in copper resistant Escherichia coli mutants
Bakıra dirençli Escherichia coli mutantlarında önemli homeostaz proteinlerini kodlayan genlerin ekspresyonu
TUĞÇE UYANIK
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞE GÜL GÖZEN
DOÇ. DR. ÇAĞDAŞ DEVRİM SON
- Theılerıa annulata'nın laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan genin analizi
Analysis of gene from theileria annulata coding lactate dehydrogenase enzyme
BELMA NURAL
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK BALIK
- Expression of the genes encoding important transport system proteins in silver resistant Escherichia coli mutants
Gümüşe dirençli Escherichia coli mutantlarında önemli transport proteinlerini kodlayan genlerin ekspresyonu
GÖKÇE UYANIK
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞE GÜL GÖZEN
DOÇ. DR. ÇAĞDAŞ DEVRİM SON
- Development and characterization of ceramic nanofiber membranes for dye removal from textile wastewater
Tekstil atıksularından boya giderimi için seramik nanofiber membranların geliştirilmesi ve karakterizasyonu
NURAY YERLİ SOYLU
Doktora
İngilizce
2024
Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MELEK MÜMİNE EROL TAYGUN
- Optimization of cultivation conditions and engineering by random mutagenesis for high lipid production in Schizochytrium sp. S31
Schizochytrium sp. S31'in üretim koşullarının iyileştirilmesi ve rastlantısal mutasyon ile geliştirilmesiyle yüksek oranda lipid eldesi
NURCAN VARDAR
Doktora
İngilizce
2016
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER
PROF. MELEK TÜTER