Isı şok protein 10 (HSP10)'un mezenkimal kök hücrelerin immün modülasyonundaki rolünün araştırılması
Assessment of the role of heat shock protein 10 (HSP10) in immune modulation by mesenchymal stem cells
- Tez No: 507818
- Danışmanlar: PROF. DR. ELVAN ŞAHİN, DR. ÖĞR. ÜYESİ FATİMA SUSANNA FAUSTİNA AERTS KAYA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Histoloji ve Embriyoloji, Medical Biology, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Hematopoetik kök hücreler, Kök hücreler, Plasenta, Sıcaklık şoku proteinleri, İmmünite, İmmünomodülasyon, Hematopoietic stem cells, Stem cells, Placenta, Heat shock proteins, Immunity, Immunomodulation
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sakarya Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tez çalışması kapsamında, Isı şok protein 10 (Hsp10)'un Mezenkimal kök hücrelerin (MKH) immünomodülasyonundaki rolü araştırıldı. Hücrelerin karakterizasyonu için stromal belirteçlerin ifadelerine ve farklılaşmalarına bakıldı. Kİ-MKH'nın ve PL-MKH'nın aktive edilmiş T hücre proliferasyonu üzerindeki immünomodülatör etkilerini araştırmak için CD3 + T hücreleri izole edildi. L-PHA ile uyarılmış ve CFSE etiketli T hücreleri BM-MSC'ler veya PL-MSC'ler ile birlikte kültürlendi. IFNγ, LPS ve ısı şokuna maruz bırakılan BM-MSC'lerin süpernatanlarında Hsp10 seviyeleri, ELISA ile değerlendirildi; EGF / Hsp10'un hücre içi ifadesi Western-Blot ve immünohistokimyasal boyamalar kullanılarak değerlendirildi. CD105, CD73, CD90, CD44, CD29, MSC'lerin immünofenotiplenmesi için stromal belirteçler olarak kullanılmış ve akış sitometrisi (FACS) kullanılarak ölçülmüştür.Yüzey belirteçlerinin ve immünomodülatör moleküllerin ekspresyonunda Kİ-MKH ve PL-MKH arasında anlamlı bir farklılık gözlenmedi. Genel olarak, Kİ-MKH'lar PL-MKH'lardan daha yüksek bir farklılaşma kapasitesine sahip olduğu gösterildi. PL-MKH'lar, T-hücresi genişlemesini Kİ-MKH'lara göre daha az baskılayabildiği gözlemlendi. Çeşitli uyaranların uygulanmasından sonra hücre kültürü süpernatantına PL-MKH ve Kİ-MKH'lardan Hsp10 salgılanması, algılama seviyelerinin altında kaldı. Bu veriler, PL-MKH'lerin hem diferansiyasyon hem de immün baskılayıcı kapasitelerinin göreli safsızlık nedeniyle engellendiği fikrini desteklemektedir. Sonuç olarak, FACS, Western Blot, ELISA ve immünohistokimyasal yöntemler kullanılarak, hem Kİ-MKH hem de PL-MKH'lerde, Hsp10'un protein katlama ve transportunda hücre içi olarak önemli rol ile tutarlı olarak yüksek Hsp10 seviyelerinin saptanmış olduğu gösteridi, ancak bu protein, uygulanan uyaranların herhangi birine yanıt olarak salgılanmadığından, Hsp10'un Kİ-MKH'larda ve PL-MKH'larda önemli bir immünorülasyon işlevine sahip olma ihtimalinin olmadığını göstermektedir.
Özet (Çeviri)
In this thesis, the role of heat shock protein 10 (Hsp10) in the immunomodulation of mesenchymal stem cells (MSC) was investigated. Cells were characterized and assessed for expression of stromal markers and differentiation. CD3+ T-cells were isolated in order to investigate the immunomodulatory effects of BM-MSC and PL-MSC on activated T-cell proliferation. L-PHA-stimulated and CFSE-labeled T-cells were co-cultured with BM-MSCs or PL-MSCs. Hsp10 levels in supernatants of BM-MSCs exposed to IFNγ, LPS and heat shock were assessed by ELISA; intracellular expression of EGF/Hsp10 was assessed using Western-Blot and immunohistochemical stainings. CD105, CD73, CD90, CD44, CD29 were used as stromal markers for immunophenotyping of MSCs and measured using flow cytometry (FACS). No significant differences between BM-MSC and PL-MSC were observed in the expression of surface markers and immunomodulatory molecules. Overall, BM-MSCs showed a higher differentiation capacity than PL-MSCs. PL-MSCs were less able to suppress T-cell expansion than BM-MSCs. Secretion of Hsp10 from PL-MSC and BM-MSCs into the cell culture supernatant after application of various stimuli remained below detection levels. These data support the idea that both differentiation and immune suppressive capacities of PL-MSCs were hampered because of the relative impurity. In conclusion, using FACS, Western Blot, ELISA and immunohistochemical methods, we showed that although high levels of Hsp10 were detected intracellularly in both BM-MSC and PL-MSCs, which is consistent with the important role for Hsp10 intracellularly in protein folding and transport, but since this protein was not secreted in response to any of the stimuli applied, indicating that it is unlikely that Hsp10 has an important immunoregulatory function in BM and PL-MSCs.
Benzer Tezler
- Structural modelling and functional analysis of the engineered small heat-shock protein,TPV-HSP14.3 from Thermoplasma volcanium
Thermoplasma volcanıum'un modifiye edilmiş küçük ısı şoku proteini TPV-HSP14.3 yapı modellemesi ve işlevsel analizi
ILIR SHERAJ
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
BiyolojiOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEMRA KOCABIYIK
- Biber bitkisinde düşük sıcaklık stresi koşullarında prolin uygulamalarının lsı şoku proteinleri üzerineetkisi
The effect of proline applicotions on heat shock proteins in pepper plant under low temperatureconditions
TUĞÇE NUR DEMİR
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
ZiraatEskişehir Osmangazi ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SERGÜL ERGİN
- Expressional protein profiling of MCF-7 breast cancer epithelial cells upon BAG-1 overexpression
BAG-1 proteininin fazla ifade edildiği MCF-7 epitel kanser hücrelerinin proteomik analizi
PINAR ÖZTEPE
Yüksek Lisans
İngilizce
2015
Onkolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
- Targeting and activation of antigen specific CD8+ T cells with peptide-major histocompatibility complex I tetramers
Peptit-majör histokompatibilite kompleks I tetramerleri ile antijen spesifik CD8+ T hücrelerin hedeflenmesi ve aktivasyonu
ŞAFAK CEREN USLU ŞIVGIN
Doktora
İngilizce
2025
BiyoteknolojiHacettepe ÜniversitesiTemel Onkoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HANDE CANPINAR
- Anaplasmosisli sığırlarda ısı şok protein, Nitrik Oksit (NO) ve interlökin (IL-6, IL-10) düzeylerinin araştırılması
The investigation of heat shock protein (Hsp 27), Nitric oxide (NO) and interleukin (IL-6, IL-10) levels in cattles Anaplasmosis
SEMA ERGÖNÜL
Yüksek Lisans
Türkçe
2008
BiyokimyaMustafa Kemal ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. TÜNAY KONTAŞ AŞKAR