PA, EF ve LF antijenlerinin immünolojik karakterizasyonları
Immunological characterizations of PA, EF and LF antigens
- Tez No: 633034
- Danışmanlar: PROF. DR. UYGAR HALİS TAZEBAY, DR. AHSEN MORVA YILMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mikrobiyoloji, Allerji ve İmmünoloji, Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji, Microbiology, Allergy and Immunology, Infectious Diseases and Clinical Microbiology
- Anahtar Kelimeler: Akım sitometrisi, Alerji ve immünoloji, Antikor yapıcı hücreler, Bakteri toksinleri, ELISA, Floresan antikor tekniği, Reseptörler-immünolojik, Flow cytometry, Allergy and immunology, Antibody producing cells, Bacterial toxins, Fluorescent antibody technic, Receptors-immunologic
- Yıl: 2020
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gebze Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Konak savunma mekanizmasında adaptif bağışıklık sağlayan önemli hücre gruplarından biri aşı geliştirme çalışmalarında kullanılan B lenfositleridir. Bu çalışmamızda, şarbon toksinlerinin adaptif bağışıklık yanıtı üzerindeki etkilerini belirlemek için, BALB/c fareden B lenfositleri FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) teknolojisi ile elde edilmiştir. İn vitro/in vivo şarbon virülans faktörlerine maruz bırakılan B lenfositlerinin kültürü sırasında stimülatörler aracılığıyla CD (Cluster of Differentiation)40, BCR (B Cell Receptor-B Hücre Reseptörü-) ve TLR (Toll Like Receptor-Toll Benzeri Reseptör-) ligasyonu ile sinerjik aktivasyonu sağlanmıştır. Toksin virülans faktörleri içerdiği bilinen bakteri üst sıvısı (TVFBÜS) ile yapılan in vitro deneylerde mutlak canlı hücre sayısında önemli azalışlar izlenmiştir. B lenfositlerinin hücre yüzeyinde bulunan CD80 ve CD86 aktivasyon markörlerinin değerlerinde değişiklik yaratmıştır. Aynı zamanda CD19, Ig (İmmünoglobulin)D, CD40 ve CD138 yüzey markörlerinin değişimi de incelenmiştir TVFBÜS ile yapılan in vivo deneylerde de mutlak canlı hücre sayısı ve yüzey markörlerinin değişimleri izlenmiştir. Bunun yanı sıra, in vivo ve in vitro ortamda TVFBÜS ile muamele edilen farelerin dalağından izole edilen B lenfositlerinin total IgM üretme kapasitesi incelenmiş ve düşüşler görülmüştür. Böylece şarbon patojeninin koruyucu bağışıklık yanıta karşı potansiyel bir tepki oluşturduğu ortaya çıkmıştır. Bu çalışmaların ardından, TVFBÜS kullanılarak yapılan aşılama ile farelerin serumunda bulunan IgG miktar takibi yapılmıştır. İn vivo aşılama sonrası elde edilen fare serumlarında virülans faktörlerden PA (Protective Antigen -Koruyucu Antijen-) spesifik IgG yanıtları ölçülmüş ve immünize farelerde yüksek IgG yanıtı bulunmuştur. Bakteri üst sıvısının B lenfositleri üzerindeki olumsuz etkilerine rağmen, B lenfositlerinin bunu tolere edebilecek faktörlere sahip olduğu ve antikor salgılanmasının aktif olduğu görülmüştür. Sonuç olarak, karakterize edilmiş saf aşıların geliştirilmesi doğrultusunda yapılan bu çalışmalar, immün etkinliğin belirlenmesinde önemli bir yer tutacaktır.
Özet (Çeviri)
One of the important cell groups that provide adaptive immunity in the host defense mechanism is the B lymphocytes used in vaccine development studies. In this study, B lymphocytes from BALB/c mice were obtained by FACS (Fluorescence- activated cell sorting) technology to determine the effects of anthrax toxins on the adaptive immune response. B lymphocytes are exposed to in vitro/in vivo anthrax virulence factors and stimulated via CD (Cluster of Differentiation)40, BCR (B cell receptor) and TLR (Toll like receptor) pathways. In vitro experiments with bacterial supernatant known to contain toxin virulence factors (BScTVF), significantly decreased absolute live B cell count. In vitro applications with BScTVF created changes in surface expression of CD80 and CD86 which are activation markers of B lymphocytes. Also, the change of CD19, Ig (Immunoglobulin)D, CD40 and CD138 surface markers was investigated. In addition, due to in vivo experiments with BScTVF, the change of absolute live cell count and surface markers was monitored. Moreover, the capacity to produce total IgM was investigated in splenic B lymphocytestreated with BScTVF in in vivo/in vitro conditions. BScTVF treated groups of B lymphocytes showed total IgM production decreases. Thus, it has been revealed that anthrax pathogen creates a potential response to the protective immune response. Following these studies, the amount of IgG in the serum of the mice vaccinated with BScTVF was monitored. PA (Protective Antigen) specific IgG response was measured in mouse sera, obtained after in vivo vaccination and a high IgG response was detected in immunized mice. Briefly, despite the negative effects of bacterial supernatant on B lymphocytes, B lymphocytes seems to have factors that can tolerate it and that antibody secretion is active. Thus, these studies for the development of characterized pure vaccines have an important role in determining immune activity.
Benzer Tezler
- Targeting and activation of antigen specific CD8+ T cells with peptide-major histocompatibility complex I tetramers
Peptit-majör histokompatibilite kompleks I tetramerleri ile antijen spesifik CD8+ T hücrelerin hedeflenmesi ve aktivasyonu
ŞAFAK CEREN USLU ŞIVGIN
- Serological investigation of peste des petits ruminants in lambs in Iraq-Kirkuk region
Irak–Kerkük bölgesinde kuzularda küçük ruminant vebası (pestedes petits ruminants ppr)'ın seroprevalansı
SARWAT KHORSHED RAHEEM
- PA, EF ve LF antijenlerinin farklı kombinasyonları ile biyoetkinlik çalışmaları yapılması
Bioefficiency studies with different combination of PA, EF and LF antigens
ELİF ULUTAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Gebze Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Yükleniyor...
- PA, EF ve LF antijenlerinin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of PA, EF and LF
OZAN TEKİN
- Konvansiyonel/rekombinant metotlar ile üretilen PA, EF ve LF antijenlerinin aktivitesinin in vitro sistemde incelenmesi ve karşılaştırılması
Investigation and comparison of the activity of PA, EF and LF antigens produced by conventional/recombinant methods in vitro system
AYŞEN GÜNGÖR
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Gebze Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Yükleniyor...
