Klotho geni transfekte edilmiş kolon kanser hücrelerinde canlılık ve proliferasyonun belirlenmesi
Determination of viability and proliferation in klotho gene transfected colon cancer cells
- Tez No: 661794
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL GÜNEŞ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Moleküler Tıp, Onkoloji, Genetik, Molecular Medicine, Oncology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Antineoplastik ajanlar, Biyobelirteçler-tümör, Genler, Genler-tümör baskılayıcı, Klotho, Kolon hastalıkları, Kolon neoplazmları, Kök hücreler, Neoplazmlar, Antineoplastic agents, Biomarkers-tumor, Genes, Genes-suppressor-tumor, Klotho, Colonic diseases, Colonic neoplasms, Stem cells, Neoplasms
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Klotho geni birçok biyolojik süreçte yer alan anti-aging, anti-inflamatuvar ve anti-tümör özellikleri olan humoral bir faktördür. Klotho geninin ifadesindeki azalma, kolon kanseri de dahil olmak üzere çoğu kanser tipinde malign oluşumlara neden olur. İnsan tümörlerinin %60 gibi önemli bir oranı tümör nekroz faktörüne bağlı apoptozu indükleyen liganda (TRAIL) karşı direnç gösterir. TRAIL, ölüm reseptörleri olan DR4 ve DR5 ile etkileşime girerek apoptotik etki gösterir. Bu çalışmadaki amaç, TRAIL dirençli insan adenokarsinom kolon kanser hücrelerinde (Caco-2), klotho geninin ekspresyonunu değiştirerek (gen aktivasyonu ve knock-out yaparak), bu ekspresyon değişimlerinin kanser hücrelerindeki TRAIL aracılı apoptotik duyarlılığa etkisinin olup olmadığını araştırmaktı. Böylece klotho geninin önemli fonksiyonlarından biri olan apoptotik sürecin, ilk kez TRAIL ölüm reseptörleri (DR4, DR5, DcR1veDcR2) üzerinden analiz edilmesi sağlandı. Bu amaçla öncelikle klotho geni CRISPR/Cas9 tekniği ile Caco-2 hücrelerinde aktifleştirildi ve knock-out edildi. Klotho geninde yapılan bu ekspresyon değişikliklerinin kanser hücrelerindeki etkisi; annexinV/PI flow sitometri, WST-8, qRT-PCR, invazyon, koloni oluşturma potansiyeli ve immunohistokimyasal analizler ile de değerlendirildi. Sonuçlarımızda Caco-2 hücrelerinde klotho gen ekspresyon artışının hücrelerin proliferasyon, invazyon ve koloni oluşturma potansiyelini baskıladığı ve kaspaz aktivitesini artırdığı görüldü. Bu etkinin gen aktivasyonuna bağlı olup olmadığı ise genin knock-out edilmesiyle test edildi. Bulgularımız klotho gen aktivasyonunun apoptoza dirençli kanser hücresinde antitümör etkiye sahip olduğunu gösterdi.
Özet (Çeviri)
The klotho gene is a humoral factor with anti-aging, anti-inflammatory and antitumor properties, which is involved in many biological processes. Decreased expression of the klotho gene causes malignant formations in most types of cancer, including colon cancer. A significant 60% of human tumors show resistance to tumor necrosis factor-induced apoptosis inducing ligand (TRAIL). TRAIL interacts with the death receptors DR4andDR5 and demonstrate an apoptotic effect. The aim of this study was to investigate whether these expression changes have an effect on TRAIL-mediated apoptotic sensitivity in cancer cells by altering the expression of the klotho gene,in TRAIL-resistant human adenocarcinoma colon cancer cells (Caco-2). Thus, the apoptotic process, one of the important functions of the klotho gene, was analysed for the first time on TRAIL-death receptors (DR4,DR5,DcR1andDcR2). For that purpose, the klotho gene was firstly activation and knock-out on Caco-2cells using the CRISPR/Cas9 technique. The effect of these expression changes in the klotho gene on cancer cells; annexinV/PIflow cytometry, WST-8, qRT-PCR, invasion, colony-forming potential and immunohistochemical analysis. In our results, it was seen that the increase in klotho gene expression in Caco-2 cells inhibited the proliferation, invasion and colony forming potential of the cells and increased the caspase activity. Whether this effect is due to gene activation was tested by knock-out the gene. It was determined that the decrease in klotho gene expression had no effect on the viability of Caco-2cells. These results show that klotho gene activation has an antitumor effect in resistant cancer cells to apoptosis.
Benzer Tezler
- D3 vitamini tedavisi alan kişilerde Klotho geni protein aktivitesinin (fibroblast büyüme faktörü 23, kalsiyum ve fosfat düzeyleri ile) miRNA 22 üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of Klotho gene protein activity (with fibroblast growth factor 23, calcium and phosphate levels) on miRNA 22 in vitamin D3 treatment persons
ABDULRAHMAN TATTAN
Doktora
Türkçe
2025
BiyokimyaNecmettin Erbakan ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET GÜRBİLEK
- Kronik böbrek hastalığında KLOTHO ve VDR geni polimorfizmlerinin araştırılması
Investigation of KLOTHO and VDR gene polymorphisms in chronic kidney disease
KUYAŞ HEKİMLER ÖZTÜRK
Doktora
Türkçe
2012
GenetikAfyon Kocatepe ÜniversitesiTıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. S. HANDAN YILDIZ
- Büyüme hormonu tedavisi alan çocuklarda klotho geni aktivitesi ile vitamin D ve serbest radikal ürünleri üzerine ilişkinin araştırılması
Investigation of the relationship of klotho gene activity and on vitamin D and free radical products in children with growth hormone treatment
YASEMİN MIHÇI
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyokimyaNecmettin Erbakan ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET GÜRBİLEK
- DNA metil transferaz enzimlerinin yaşlanma ile ilgili insan klotho geni anlatımı üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of effects of DNA methyltransferase enzymes on aging-related human klotho gene expression
ELİF ÇAĞLAYAN
- Klotho proteininin deri kanseri (melanoma hücreleri) üzerinde antitümör etkilerininin araştırılması
Investigation of the antitumor effects of klotho protein in melanoma cells
TUĞBA ÇIĞŞAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Moleküler TıpKaradeniz Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. UĞUR UZUNER