Sisplatinle indüklenen testis hasarında melatoninin otofaji yönlendirici etkisinin araştırılması
Investigation of the directing effect of melatonin on autophagy in testicular damage cisplatin-induced
- Tez No: 669329
- Danışmanlar: PROF. DR. BİRKAN YAKAN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Sisplatin, Melatonin, Testis, Sıçan, Cisplatin, Melatonin, Testis, Rat
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erciyes Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 79
Özet
Sisplatin (Cis) kanser tedavisinde kullanılan kemoterapötik bir ilaçtır. Cis, testislerde spermatojenik seride, Sertoli ve Leydig hücrelerinde apopitozu tetikleyerek hasar meydana getirir. Bu çalışmada, Cis'in testis dokusunda oluşturduğu hasarın ortadan kaldırılmasında güçlü antioksidan özelliğiyle bilinen Melatonin (Mel)' in testis dokusunda apopitozu azaltarak otofajiye yönlendirici etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır. 40 adet Wistar albino cinsi sıçan rastgele dört gruba (n=10) ayrıldı. Grup 1 (Kontrol) 7 gün boyunca izotonik salin (SF) (1ml/kg/gün) solüsyonu intraperitoneal (i.p.) uygulandı. Grup 2 (Cis) deneyin 5. günü tek doz Cis (7 mg/kg) i.p. olarak verildi. Grup 3 (Mel) deneyin başlangıcından itibaren 7 gün boyunca günlük Mel (10 mg/kg/gün) i.p. olarak verildi. Grup 4 (Mel+Cis) deneyin başlangıcından itibaren 7 gün boyunca günlük Mel (10 mg/kg/gün) i.p. olarak verildi, 5. günde Cis (7 mg/kg) tek doz i.p. olarak verildi. Deneyin 8. gününde sıçanlar xylazin ve ketamin anestezisi altında dekapite edilerek testisleri alındı. Testislerden alınan kesitler hematoksilen-eozin ile boyanarak histolojik hasar belirlendi. Tübüllerdeki hasarlanmanın derecesinin değerlendirilmesinde Johnsen Testiküler Biyopsi Skoru (JTBS) kullanıldı. Apopitoz ve otofaji markırları olan Kaspaz-3, LC-3 ve SIRT-1 immünohistokimyasal boyama yöntemiyle boyanarak Image-j programıyla ölçümleri yapıldı. Sıçanların kan serumunda Testosteron, LH, FSH parametrelerine ELISA yöntemiyle bakıldı. Apopitotik hücre görüntüleme ve sayımı için TUNEL yöntemi kullanıldı. Comet Assay tekniğiyle de testis dokusunda ve duktus epididimiste sperm hücre düzeyinde DNA hasarı saptandı ve miktarı belirlendi. Makler kamerasıyla sperm sayımı yapıldı. Kontrol ve Mel grubu birbirine benzerdi. JTBS skoruna göre Cis grubunda diğer gruplara kıyasla istatistiksel olarak azalma gözlendi. İmmunohistokimya boyama sonuçlarına göre Cis grubunda Kaspaz-3 arttı, LC-3 ve SIRT-1 azaldı. Cis grubunda tüm hormon seviyelerinde azalma gözlendi. Ayrıca apopitotik hücre sayısı arttı. Comet Assay tekniğine göre tail-DNA hasar oranı da Cis grubunda arttı. Cis grubunda sperm sayısı azaldı. Mel+Cis grubunda hem Johnsen Testiküler Biyopsi Skoru (JTBS) hem de immunohistokimya boyamalarında düzelme gözlendi. Kaspaz-3 azaldı, LC-3 ve SIRT-1 arttı. Hormon seviyeleri, TUNEL, Comet Assay ve sperm sayısı parametreleri de Cis grubuna kıyasla düzelmişti. Sonuç olarak tek doz Cis uygulaması testis dokusunda hasara yol açmış ve hücreleri apopitoza yönlendirdiği görülmüştür. Sıçan testis dokusunda oluşan bu hasarın Mel ile düzeltilebileceği, hücresel düzeyde de apopitozu azaltarak otofajiye yönlendirebileceği gözlemlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Cisplatin (Cis) is a chemotherapeutic drug used in cancer treatment. Cis causes damage by triggering apoptosis in the spermatogenic series in the testicles, in the Sertoli and Leydig cells. This study, it was aimed to evaluate the directing effect of Melatonin (Mel), known for its powerful antioxidant properties, on autophagy by reducing apoptosis in testicular tissue in eliminating the damage caused by Cis in testicular tissue. Forty Wistar albino rats were randomly divided into four groups (n=10). Group 1 (Control) isotonic saline (SF) (1ml / kg / day) solution was administered intraperitoneally (i.p.) for 7 days. Group 2 (Cis) was given a single dose of Cis (7 mg/kg) ip on the 5th day of the experiment. Group 3 (Mel) was given daily Mel (10 mg/kg/day) ip for 7 days from the start of the experiment. Group 4 (Mel + Cis) was given as daily Mel (10 mg/kg/day) ip for 7 days from the beginning of the experiment, Cis (7 mg/kg) was given as a single dose ip on day 5. On the 8th day of the experiment, the testes were removed by decapitating the rats under xylazine and ketamine anesthesia. Histological damage was determined by staining the sections taken from the testicles with hematoxylin-eosin. The Johnsen Testicular Biopsy Score (JTBS) was used to evaluate the degree of tubular damage. The markers of apoptosis and autophagy, Caspase-3, LC-3 and SIRT-1 were stained by immunohistochemical staining method and measured with Image-j program. Testosterone, LH, FSH parameters were measured by ELISA method in the blood serum of rats. TUNEL method was used for apoptotic cell imaging and counting. In the Comet Assay technique, DNA damage was detected at the sperm cell level in the testicular tissue and ductus epididymis and its amount was determined. Sperm count was done with spermiogram. Control and Mel group were similar. According to the JTBS score, a statistically significant decrease was observed in the Cis group compared to the other groups. According to the results of immunohistochemistry staining, Caspase-3 increased, LC-3 and SIRT-1 decreased in the Cis group. A decrease was observed in all hormone levels in the Cis group. In addition, the number of apoptotic cells increased. According to the Comet Assay technique, the tail-DNA damage rate also increased in the Cis group. Sperm count decreased in Cis group. An improvement was observed in both JTBS and immunohistochemistry staining in the Mel + Cis group. Caspase-3 decreased, LC-3 and SIRT-1 increased. Hormone levels, TUNEL, Comet Assay, and sperm counts were also improved compared to the Cis group. As a result, it was observed that a single dose of Cis application caused damage to the testicular tissue and directed the cells to apoptosis. It has been observed that this damage to the rat testis tissue can be corrected with Mel, and it can be directed to autophagy by reducing apoptosis at the cellular level.
Benzer Tezler
- Ratlarda Sisplatin ile oluşturulan testis hasarında, kafeik asit fenetil ester'in (KAFE) antioksidan ve antiapoptotik etkilerinin biyokimyasal ve histolojik olarak incelenmesi
Histological and biochemical investigation of antioxidan and antiapoptotic effects of caffeic acid phenethyl ester on Ci̇splati̇n-i̇nduced testi̇cular toxi̇ci̇ty in rats
HANDE CARVER
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Histoloji ve EmbriyolojiBolu Abant İzzet Baysal ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ TÜLİN FIRAT
- Sisplatinle indüklenen in vitro böbrek hücre hasarına hesperidinin koruyucu etkisinin araştırılması
Investigation of the protective effect of hesperidin on cisplatin-induced renal cell injury in vitro
ALTAN ERSÖZ
Doktora
Türkçe
2018
Veteriner HekimliğiOndokuz Mayıs ÜniversitesiBiyokimya (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜL FATMA YARIM
- Sisplatin ile indüklenen sıçanlarda testiküler toksisiteye karşı astaksantinin koruyucu etkileri
Protective effects of astaxanthin against testicular toxicity in rats induced with cisplatin
NURAY TEPE
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Histoloji ve Embriyolojiİnönü ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AZİBE YILDIZ
- Sisplatin ile indüklenen toksisitede likopenin etkisi
Effect of lycopene on Cisplatin-induced toxicity
FATMA ZEHRA ERASLAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Eczacılık ve FarmakolojiYeditepe ÜniversitesiFitoterapi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDEM YEŞİLADA
- The use of CRISPR/dCas9 engineered mscs and exosomes to prevent cisplatin-induced ovarian failure in mice
Farede sisplatin ile indüklenen ovaryen yetmezliği önlemek için CRISPR/dCas9 ile tasarlanmış mezenkimal kök hücrelerin ve eksozomlarının kullanımı
ARİANA SİVASLIOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyolojiKoç ÜniversitesiÜreme Biyolojisi Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. SERÇİN KARAHÜSEYİNOĞLU