FSH'nın fare granüloza hücrelerine etkisinin hippo sinyal yolağı proteinleri (YAP, TEAD ve p73) ve mikroRNA'ları (miR129-5p ve miR145-5p) ile değerlendirilmesi
Evaluation of the high-dose fsh effect on mice granulosa cells with hippo signal pathway proteins (YAP, TEAD and p73) and microRNAs (miR129-5p and miR145-5p)
- Tez No: 689399
- Danışmanlar: PROF. DR. MAHMUT KEMAL ÖZBİLGİN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Manisa Celal Bayar Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 114
Özet
Rekombinant gonadotropinler aynı anda birden fazla folikülün gelişiminin uyarılması için yardımlı üreme tekniklerinde yaygın olarak kullanılmaktadırlar. Ancak FSH'nın (folikül stimülan hormon) aşırı kullanımının folikül gelişimini bozduğuna dair çalışmalar mevcuttur. Hormonlar, büyüme faktörleri ve miRNA'lar overdeki hücre proliferasyonunu ve homeostazisi Hippo yolağı aracılığıyla düzenlemektedirler. Bu yolağın üyelerinden YAP/TEAD hücrelerin hayatta kalması ve proliferasyonu yönünde etki ederken; YAP/p73 apoptoza gidişi kontrol eder. Bu çalışmada YAP1/TEAD3 immunreaktivitesi ve bununla ilişkili miR-129-5p ve p73 immunreaktivitesi ve bununla ilişkili miR-145-5p düzeyleri incelenmiştir. Doğrulama amacıyla kaspaz-3 ve bax immunreaktiviteleri değerlendirilmiştir. Yüksek doz FSH uygulamasının granüloza hücreleri üzerindeki etkisinin Hippo sinyal yolağı üzerinden değerlendirilmesi ve bahsi geçen miRNA'lar ile ilişkisinin açıklanması amaçlanmıştır. Balb/c cinsi, 18 adet, 6-8 haftalık dişi fareler kontrol, sham ve deney grubu olarak üçe ayrılmıştır. Deney grubuna her 12 saatte bir sırasıyla 10-10-5-5 IU/ml olmak üzere toplam 4 doz FSH intraperitoneal olarak uygulanmıştır. Sham grubuna deney grubuna verilen FSH hacmine eşit miktarda eş zamanlı olarak %0.09 SF yapılmıştır. Fareler son enjeksiyondan 12 sa. sonra sakrifiye edilmiştir. Over dokuları ve kan örnekleri alınarak RT-PCR ve immunohistokimya teknikleriyle analiz edilmiştir. Over doku kesitlerinin immunohistokimya ile analizinde, granüloza hücrelerinde YAP1 ve TEAD3 immunreaaktivitesi artarken p73 ve kaspaz-3 immunreaktivitelerinde değişiklik gözlenmedi. Gruplar arasında Bax immunreaktivitesinde anlamlı farklılık yoktu. MiR-129-5p ve miR-145-5p, FSH uygulaması sonrası downregüle oldu. P73, Kaspaz3 ve Bax'ın granüloza hücrelerinde değişmeyen immunreaktivitesi yüksek doz FSH sonrası atreziye gidiş olmadığını göstermektedir. YAP1 ve TEAD3 immunreaktivitesinde artış ile miR-129-5p ve miR-145-5p düzeylerinde görülen azalma overde proliferatif sürecin baskın olduğunu ve yüksek doz FSH'ın bu etkiyi Hippo sinyal yolağı üzerinden açığa çıkarttığını göstermektedir.
Özet (Çeviri)
Recombinant gonadotropins are widely used in assisted reproductive techniques for the development of many follicles. However, in cases requiring excessive FSH (follicle-stimulating hormone) use, follicle development is also impaired. Hormones, growth factors, or miRNAs in ovaries control cell proliferation and homeostasis by regulating the Hippo pathway. While TEAD/YAP genes in the pathway allow cells to survive; YAP/p73 controls progression to apoptosis. In this study, TEAD3/YAP1 expressions which also associated miR-129-5p and p73 expression which also associated miR-145-5p levels were investigated. The expressions of the casp3 and bax apoptosis markers were also evaluated for confirmation. It was aimed to reveal the effect of the Hippo pathway on granulosa cells after high-dose FSH administration and link with miRNA reflections. Eighteen, 6-8 w Balb/c female mice were divided into three groups including control, sham, and FSH groups. FSH group were injected by 10-10-5-5 IU/ml FSH respectively, every 12 hours, 4 doses total. The same amount of saline was applied to sham group. The animals were sacrificed 12 hr after the last injection. Ovary tissues and blood were taken for analysis by RT-PCR and immunohistochemistry technics. YAP1 and TEAD3 expressions were increased, while p73, caspase-3 expressions weren't changed in granulosa cells in ovary. There was no difference in the bax expression among the groups. MiR-129-5p and miR-145-5p were downregulated in FSH-treated group. The unchanged expression of p73, caspase-3 and bax in granulosa cells indicates no progression to atresia following administration of high-dose FSH. The increase in YAP1 and TEAD3 expressions and the decrease in miR-129-5p and miR-145-5p revealed that the proliferative process is dominant in the ovary and high-dose FSH exerts this effect through the Hippo pathway.
Benzer Tezler
- Over foliküler atrezide FSH uygulamasının granüloza hücreleri mitokondrionları üzerinden etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of FSH application on granulosa cells mitochondria in ovarian follicular atresia
MELTEM ÜÇÖZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Histoloji ve EmbriyolojiManisa Celal Bayar ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MAHMUT KEMAL ÖZBİLGİN
- Acetamipridin testis toksisitesine karşı melatonin ve vitamin E'nin koruyucu etkilerinin araştırılması
Investigation of the protective effects of melatonin and vitamin E against acetamiprid testicular toxicity
EMRAH ZAYMAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2019
Histoloji ve Embriyolojiİnönü ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ELİF TAŞLIDERE
- 4-Vinilsikloheksen Diepoksid uygulanan sıçanlarda Dehidroepiandrosteron'un ovaryumlarda uzun dönem etkileri
Long term ovarian effects of Dehidroepiandrosterone on 4 Vinylcyclohexene Diepoxide applied rats
MEHMET CANER ÖZER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Histoloji ve EmbriyolojiEskişehir Osmangazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERİNÇ ARAL
- Application of CRISPR /DCAS9 systems for increasing theexpression of FSH receptor in human granulosa cells
Insan granüloza hücrelerinde FSH reseptörünün ekspresyonunu arttırmak için CRISPR /DCAS-9 sistemlerinin uygulanmasi
AYLİN SEREN GÜLLER
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
BiyolojiKoç ÜniversitesiÜreme Biyolojisi Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SERÇİN KARAHÜSEYİNOĞLU
- Kontrollü overyan hiperstimülasyon uygulandığında iyi cevap veren (Good responder) ve zayıf cevap veren (Poor responder) infertil hastalardaki fsh reseptör polimorfizmlerinin, fertil kadınlardaki fsh reseptör polimorfizmleri ile karşılaştırılması
Comparison of fsh reseptor polymorphismis between infertile women (Poor responders and good responders after controlled ovarian hyperstimulation) and fertile women
BARIŞ SEVER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
Kadın Hastalıkları ve DoğumAkdeniz ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MEHMET ŞİMŞEK