Geri Dön

Trakeal stenozda D-valin etkisi; invitro ve invivo deneysel çalışma

D-valine effect in tracheal stenosis; invitro and invivo experimental study

PDF İndir

  1. Tez No: 730357
  2. Yazar: MEHMET AKİF EKİCİ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. AHMET ULUŞAN
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisi, Thoracic and Cardiovascular Surgery
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gaziantep Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Deneysel Cerrahi Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 87

Özet

Amaç: Bu çalışmada hücre kültüründe fibroblastları seçici olarak uzaklaştırmak için kullanılan bir molekül olan D-valinin fibroblastların çoğalmasını inhibe ederek trakeal stenoz tedavisindeki yerini göstermek amaçlandı. Yöntem: İnvitro deneysel çalışma: Çeşitli nedenlerle lobektomi veya pnömonektomi yapılan 10 hastanın ameliyat eksplantlarından, tanı için patoloji tarafından kullanılan materyalden arta kalan doku kullanıldı. Aynı hastadan hem bronş epitel hücre kültürü hem fibroblast kültürü elde edildi. İlk 4 hastanın kültürleri standardizasyon için kullanıldı ve beş D-valin konsantrasyonu (10,12.5,15,17.5,20 mM) belirlendi. Sonraki 6 hastanın örnekleri her birinden bronş epitel ve bağ doku ayrı ayrı ekildi ve beş farklı Dvalin konsantrasyonu ve serum fizyolojik uygulanan altı grup oluşturuldu. Her hastanın epitel ve bağ dokusu kültüre edildi. Ancak teknik sebepler ve dokuların farklı üreme hızları nedeniyle eş zamanlı kültür edilip çalışılamadı. Bu yüzden her doku kültür edildi, ama %70 yayılım gösteren hücreler deneye alındı. Hücre kültürleri 96 kuyucuklu (ml/2000hücre) platelerde %70-80 oranında yüzeyi kaplar hale geldiklerinde, D-valinin farklı konsantrasyonları (10,12.5,15,17.5,20 mM) ile 24 saat süre ile inkübe edildi. Hücrelerin canlılığı MTT (3- [4,5- dimethylthiazol- 2- yl]- 2,5- diphenyltetrazoliumbromide) yöntemi ile değerlendirildi. Kısaca, kültür vasatı 1 mg/ml MTT (Sigma) içeren SF vasatı ile değiştirilerek 37 C de 30 dk süre ile inkübe edildi. Daha sonra MTT solüsyonu dökülüp, hücrelerin üzerine DMSO (Sigma) konuldu. Renkteki değişim kolorometrik bir okuyucu ile (spektrofotometre) 550 nm'de okundu. D-valin in en uygun inhibe edici dozları tespit edildi. İnvivo Deneysel Çalışma: 20 (yirmi) adet yetişkin Yeni Zellanda beyaz tavşanı (2 ila 3,4 kg) randomize 4 gruba ayrıldı. Birinci grup kontrol grubu, ikinci grup serum fizyolojik (SF) uygulanan grup, üçüncü grup lokal steroid (Deksametazon 2 mg) uygulanan grup, dördüncü grup D-Valin uygulanan grup olmak üzere, her grupta 5 tavşan yer aldı. Tüm hayvanlara standart cerrahi prosedür uygulanarak trakeal stenoz indüklendi. 15. günde kontrol grubunda bulunan hayvanlar aşırı doz pentobarbital ile sakrifiye edildi, trakeal stenoz oluştuğu histopatolojik olarak gösterildi. Takip eden günlerde diğer gruplarda da aynı cerrahi yöntem uygulanarak cerrahi sırasında ikinci gruba serum fizyolojik, üçüncü gruba deksametazon(2 mg/0,5 ml), dördüncü gruba Dvalin (20 mM/0,5 ml) tek seferde uygulandı. 15. günün sonunda tüm hayvanlar sakrifiye edilerek trakeaları histopatolojik olarak incelendi. Bulgular: V İnvitro Deneysel Çalışma: Epitel ve bağ doku kültürlerinde SF ve 5 farklı Dvalin konsantrasyonu arasında anlamlı fark bulunmadı. 20 mM konsantrasyonda epitel ve bağ doku kültürleri arasında pozitif yönde anlamlı korelasyon bulundu. İnvivo Deneysel Çalışma: Kontrol grubu tavşanlarda submukozal kalınlık literatürün aksine diğer gruplardan daha az görüldü ve istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p=0,004, p=0,006, p=0,022). SF, deksametazon ve D-valin grupları arasında anlamlı fark bulunmadı. Fibrozis oranlarına bakıldığında kontrol grubu ile SF uygulanan grup arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulundu; ancak kontrol grubunda fibrozis oranı daha düşüktü (p=0,001). Kontrol grubu ile diğer iki grup arasında ve SF, deksametazon ve D-valin gruplarının kendi aralarında karşılaştırılmasında ise anlamlı bir fark bulunmadı. Sonuçlar: Literatür incelendiğinde trakeal stenozda D-valin etkisi üzerine bir çalışmaya rastlanmadı. Dolayısıyla çalışmamız bu konuda ilk olma özelliği taşımaktadır. Ayrıca trakeal stenoz üzerine hem invitro hem invivo çalışılması nedeniyle de önem arz etmektedir. D-valin in fibrozis üzerine baskılayıcı etkisi bilinmektedir. Ancak invitro koşullarda fibroblastları baskıladığı konsantrasyonlarda epitel dokuyu da etkilediği görüldü. İnvivo koşullarda ise göreceli olarak fibrozisi etkilediği izlendi, ancak istatistiksel olarak anlamlı sonuç elde edilemedi. İnvitro koşullarda daha fazla konsantrasyon denenmesi, invivo koşullarda ise daha fazla hayvan sayısı ve çeşitli hayvanlarla deneyin tekrarlanması yol gösterici olacaktır.

Özet (Çeviri)

Objective: In this study, it was aimed to show the place of D-valine, a molecule used to selectively remove fibroblasts in cell culture, in the treatment of tracheal stenosis by inhibiting the proliferation of fibroblasts. Methods: In vitro experimental study; The remaining tissue from the material used by the pathology for diagnosis surgical explants of 10 patients who underwent lobectomy or pneumonectomy for various reasons was used. Both bronchial epithelial cell culture and fibroblast culture were obtained from the same patient. The cultures of the first 4 patients were used for standardization and five D-valine concentrations (10,12.5,15,17.5,20 mM) were determined. The bronchial epithelium and connective tissue samples from each of the next 6 patients were seeded separately, and six groups were formed that were treated with five different D-valine concentrations and saline. Epithelial and connective tissue of each patient were cultured. However, due to technical reasons and different growth rates of the tissues, they could not be cultured and studied simultaneously. Therefore, each tissue was cultured, but cells with 70% dispersal were included in the experiment. When cell cultures became 70-80% surface coverage in 96-well (ml/2000 cells) plates, they were incubated with different concentrations of D-valine (10,12.5,15,17.5,20 mM) for 24 hours. Cell viability was evaluated by the MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl- tetrazoliumbromide) method. The culture medium was replaced with SF medium containing 1 mg/ml MTT (Sigma) and incubated at 37°C for 30 min. Then, MTT solution was poured and DMSO (Sigma) was placed on the cells. The change in color was read at 550 nm with a colorometric reader (spectrophotometer). The most appropriate inhibitory doses of Dvaline were determined. In vivo Experimental Study: 20 (twenty) adult New Zealand white rabbits (2 to 3.4 kg) were randomly divided into 4 groups. There were 5 rabbits in each group, as the first group was the control group, the second group was administered saline (SF), the third group was administered local steroid (Dexamethasone 2 mg) and the fourth group was the group administered D-Valine. Tracheal stenosis was induced in all animals by performing a standard surgical procedure. On the 15th day, the animals in the control group were sacrificed with an overdose of pentobarbital, and tracheal stenosis was demonstrated histopathologically. In the following days, the same surgical method was applied in the other groups, and saline was administered to the second group, dexamethasone (2 mg/0.5 ml) to the third group, and D-valine (20 mM/0.5 ml) to the fourth group at one time during surgery. At the end of the 15th day, all animals were sacrificed and their tracheas were examined histopathologically. VII Results: Invitro Experimental Study: No significant difference was found between SF and 5 different D-valine concentrations in epithelial and connective tissue cultures. A significant positive correlation was found between epithelial and connective tissue cultures at 20 mM concentration. In vivo Experimental Study: Contrary to the literature, submucosal thickness was observed less in the control group rabbits than in the other groups and it was found to be statistically significant (p=0.004, p=0.006, p=0.022). There was no significant difference between SF, dexamethasone and D-valine groups. When the fibrosis rates were examined, a statistically significant difference was found between the control group and the SF applied group; however, the fibrosis rate was lower in the control group (p=0.001). No significant difference was found between the control group and the other two groups, and when the SF, dexamethasone and D-valine groups were compared among themselves. Conclusions: When the literature was examined, no study was found on the effect of D-valine in tracheal stenosis. Therefore, our study is the first in this regard. It is also important because it is studied both in vitro and in vivo on tracheal stenosis. The suppressive effect of D-valine on fibrosis is known. However, it was observed that it also affected epithelial tissue at concentrations that suppressed fibroblasts under in vitro conditions. In vivo conditions were observed to affect fibrosis relatively, but statistically significant results could not be obtained. Trying more concentrations in in vitro conditions, and repeating the experiment with a larger number of animals and various animals in in vivo conditions will be guiding.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    452783

    Trakea cerrahisinde lokal olarak uygulanan tgf beta3'ün yara iyileşmesi ve stenoz gelişimi üzerine etkisi

    The effect of local tgf beta3 on wound healing and stenosis formation in tracheal surgery

    AYKUT ELİÇORA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiKocaeli Üniversitesi

    Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ŞERİFE TUBA LİMAN

  2. Tez No

    247953

    Ratlarda trakeal hasar sonrasında mitomisin-C, 5 florourasil triamnisolon asetonid, karnitin ve deksametazonun trakeal stenozu önlemedeki rolü.

    Tracheal stenosis constitutes one of the most challenginig problems in ENT practice that a physician may face with, after accelerating tracheotomy and intubations of late years

    FATİH TURAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Kulak Burun ve BoğazGaziosmanpaşa Üniversitesi

    Kulak Burun Boğaz ve Baş-Boyun Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AHMET EYİBİLEN

  3. Tez No

    243452

    Trakea rekonstrüksiyonunda primer sütür ve homolog greft uygulanımı (Deneysel çalışma)

    Application of homologous grafting and primary suture in the reconstruction of trachea (Experimental study)

    MUHARREM ÇAKMAK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiFırat Üniversitesi

    Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AKIN ERASLAN BALCI

  4. Tez No

    70166

    Trakeal allotransplantasyon

    Tracheal allotransplantation

    ERKAN DİKMEN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiAnkara Üniversitesi

    Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ADEM GÜNGÖR

  5. Tez No

    659683

    Trakeal darlığı olan hastalarda stent uygulaması ve cerrahi sonuçlarının değerlendirilmesi

    Evaluation of stent application and surgery results in patients with tracheal stenosis

    ÖZGÜR GÜZEY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Göğüs Cerrahisi Ana Bilim Dalı

    UZMAN MURAT YAŞAROĞLU

Geri Dön