Tenascin-C-CRISPR/CAS9 plasmidi taşıyan oksitosinle hedeflendirilmiş pegli kitozan nanoplekslerinin meme tümör modelinde tümör büyümesi ve yayılmasına etkisi
The effect of nanoplexes carrying the tenascin-c CRİSPR/CAS9 plasmid by pegylated chitosan that is actively targeted via oxytocin on the tumor growth and spread in A breast cancer tumor model
- Tez No: 736697
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SUNA ÖZBAŞ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Eczacılık ve Farmakoloji, Biotechnology, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 207
Özet
Amaç: Üçlü negatif meme kanseri en agresif meme kanseri alt tipidir. Tenascin-C bu kanserde çoğalma, metastaz ve anjiyogenezi destekleyen tümöre özgül bir matriks proteinidir. Bu çalışmada, Tenascin-C ekspresyonu CRISPR/Cas9 genom düzenleme sistemi ile üçlü negatif meme kanserinde azaltılmasını etkilerinin in vitro ve in vivo araştırılması ve güvenli ve etkin in vivo uygulama için oksitosinle hedeflendirilmiş yeni bir kitozan taşıyıcı sistemi formüle edilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: İnsan meme kanseri hücre hattı MDA-MB-231 hücreleri, Tenascin-C'yi hedefleyen CRISPR/Cas9 plazmidleri ile transfekte edildikten sonra ekspresyonundaki düşüş incelenmiştir. Azalan ekspresyonunun hücrelerdeki apoptoz, proliferasyon, göç ve invazyon üzerine etkileri in vitro analiz edilmiştir. PEG bağlayıcı kullanılarak, oksitosin kitozana bağlanmıştır ve CRISPR/Cas9 plazmidleri ile hazırlanan nanoplekslerin karakterizasyonu yapılmış ve transfeksiyon etkinliği araştırılmıştır. Daha sonra ksenograft meme kanseri fare modelinde biyodağılım ve nanopleksle tedavinin tümöre etkisi analiz edilmiştir. Bulgular: CRISPR/Cas9 plazmidleri Tenascin-C mRNA ekspresyonunun in vitro çalışmada %60 oranında azaltmış ve hücrelerde apoptoz artarken, proliferasyon, göç ve invazyon kapasitesi düşmüştür. Formüle edilen nanopleksler hücreleri başarıyla transfekte etmiştir fakat oksitosinin damar içi uygulamada tümörü hedeflendirmek için yeterli olmadığı görülmüştür. Nanopleksler intratümöral uygulandığında ise, tümör boyutu kontrol gruplarına göre anlamlı derecede küçülmüştür. Sonuç: Özgün bir kitozan bazlı taşıyıcı sistem formüle edilmiştir ve CRISPR/Cas9 ile Tenascin-C düzenlemesinin ileri çalışmalarda test edilmesi için temel oluşturulmuştur.
Özet (Çeviri)
Objective: Triple negative breast cancer is the most aggressive breast cancer subtype. Tenascin-C is a tumor-specific matrix protein that promotes proliferation, metastasis, and angiogenesis in this cancer. In this study, the aims were to investigate the in vitro and in vivo effects of reducing Tenascin-C expression in triple negative breast cancer by the CRISPR/Cas9 genome editing system, and to formulate a new oxytocin-targeted chitosan delivery system for safe and effective in vivo application. Materials and Methods: The decrease in Tenascin-C expression was investigated after human breast cancer cell line, MDA-MB-231 cells were transfected with CRISPR/Cas 9 plasmids targeting Tenascin-C. The effects of decreased expression on apoptosis, proliferation, migration and invasion in cells were analyzed in vitro. Using a PEG linker, oxytocin was conjugated to chitosan and the nanoplexes prepared with CRISPR/Cas9 plasmids were characterized and transfection efficiency was investigated. Then, biodistribution and the effect of nanoplex treatment on tumor were analyzed in a xenograft breast cancer mouse model. Results: CRISPR/Cas9 plasmids decreased Tenascin-C mRNA expression by 60% and increased apoptosis in cells, while decreasing proliferation, migration and invasion capacity in vitro. Nanoplexes successfully transfected cells, but oxytocin was not sufficient for active tumor targeting in intravenous administration. When nanoplexes were applied intratumorally, tumor sizes were significantly reduced compared to the control groups. Conclusion: A new chitosan-based carrier system has been formulated and foundations have been laid for testing Tenascin-C editing by CRISPR/Cas9 in the future studies
Benzer Tezler
- Gestasyonel hipertansiyon ve preeklamptik gebelerde tenascin-C ve oksidatif stres parametrelerinin hipertansiyon üzerine etkileri
Tenascin-C and oxidative stress parameters effect of hypertension in pregnant women with gestational hypertension and preeclampsia
ÇAĞDAŞ EMRE AYAS
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
KardiyolojiHarran ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ZEKERİYA KAYA
- Tenascin C'nin sıçan karaciğerinde iskemi reperfüzyon hasarındaki etkisi
Effect of Tenascin-C on ischemia-reperfusion damage in rat liver
YÜCEL DOĞRUTÜRK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
Genel CerrahiSağlık Bilimleri ÜniversitesiGenel Cerrahi Ana Bilim Dalı
DR. METİN YALÇIN
- Bilinen koroner arter hastalığı olmayan hastalarda koroner arter kalsiyum skorlaması ile tenaskin-c düzeyi arasındaki ilişki
The relationship between coronary artery calcium scoring and level of tenascin-c in patients with no documented coronary artery disease
PINAR ÖZMEN YILDIZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2012
KardiyolojiMersin ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OBEN DÖVEN
- Kalp yetmezliğinde aritmi sıklığı ile tenaskin-c ve nt-probnp arasındaki ilişki
The association between tenascin-c and nt-probnp levels and arrhythmia prevalence in heart failure
ÇAĞLAR ÖZMEN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
KardiyolojiÇukurova ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET KANADAŞI
- Dilate kardiyomiyopatide kantitatif miyokardiyal fibrozisin potansiyel bir prediktif belirteci olarak serum tenascin-C düzeyi
Serum tenascin-C level as a potential predictive marker of quantitative myocardial fibrosis in dilated cardiomyopathy
MUSTAFA KURŞUN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
KardiyolojiEge ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİLİZ ÖZERKAN ÇAKAN