Geri Dön

Yeni geliştirilen terapötik monoklonal antikorların fizikokimyasal özelliklerinin ve stres koşullarındaki değişikliklerinin değerlendirilmesi ve validasyonu

Investigation of physicochemical behavior of newly developed therapeutic monoclonal antibodies under stress conditions and validation of results

PDF İndir

  1. Tez No: 751387
  2. Yazar: YİĞİT ERDEMGİL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MUHİTTİN ABDULKADİR SERDAR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Antikorlar-monoklonal, Biyobenzer ilaçlar, Fizikokimyasal özellikler, Kapiler elektroforez, Stres, Yüksek basınç sıvı kromatografisi, İlaç formülleri, İlaç üretimi, Antibodies-monoclonal, Biosimilar drugs, Physicochemical properties, Capillary electrophoresis, Stress, Formularies, Drug production
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya ve Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Biyobenzerler ve orijinatörlere stres uygulanarak, klinik çalışmalardan önce önemli bilgiler elde edilebilmektedir. Bu çalışmada, dondurma/çözme döngüsü, termal, oksidasyon, ve asidik/bazik pH stresi uygulanan biyobenzer ve orijinatör tümor nekroz faktörü (TNF-α) örneklerinde degradasyon ürünlerinin değişimi, CE-SDS, SE-UPLC, icIEF ve UPLC-ESI-QToF-MS yöntemleri ile araştırılmıştır. Stres uygulanan örnekler, ANOVA ve Dunnett'ın çoklu karşılaştırma testi kullanılarak, stres uygulanmamış kontrol örnekleriyle karşılaştırılmıştır. Ayrıca, degradasyon oranını karşılaştırmak için, stres boyunca değişen mAb miktarı kullanılarak oluşturulan lineer eğrilerin eğimleri istatistiki olarak karşılaştırılmıştır. Termal stres 50°C'de uygulandığında %monomer değişimleri, biyobenzer ve orijinatör arasında anlamlı farklılık (P=0,32) göstermemiştir. Termal stres ile asidik varyantlar, biyobenzer (%23,1) ve orijinator (%23,0) ürünlerinde anlamlı artış göstermişlerdir. Asidik varyant değişimlerinin Asn deamidasyonu ve N-terminal pE oluşumu ile ilişkili olduğu belirlenmiştir. Kimyasal oksidasyon stresi uygulaması sonrasında ürünlerin parçalanma eğiliminde olduğu gözlenmiştir. Stres sonunda bütün IgG, biyobenzer ve orijinatör için, sırasıyla, %34 ve %41 oranında azalmıştır. IgG'lerin Fc bölgesindeki Met256 ve Met432 yüksek oranda (<%98) okside olurken, CDR bölgesinde bulunan Met34'te, iki üründe de, <%83 oranında oksidasyon görülmüştür. Asidik pH 3,0 koşulunda iki ürün de degrade olurken, Bazik pH 9,0 koşulunda iki üründe de yüksek oranda anlamlı asidik yük artışı (<%31) görülmüştür (P=0,27). Asidik yük artışının Asn deamidasyonuna bağlı olduğu ve çok etkilenen bölgenin HC:T35 olduğu belirlenmiştir. Bu çalışma sonucunda, biyobenzer ürünün geliştirilmesinde kullanılabilecek, orijinatör ve biyobenzer ürünlerin degradasyon mekanizmaları hakkında değerli bilgiler elde edilmiştir.

Özet (Çeviri)

Prior to clinical trials, stress treatment to biosimilars and originators might yield valuable information. In this study, the degradation product changes in freeze/thaw cycle, thermal, oxidation, and acidic/basic pH stress applied to biosimilar and originator tumor necrosis factor (TNF-α) samples were investigated by CE-SDS, SE-UPLC, icIEF, and UPLC-ESI-QToF-MS. Stressed treated samples were compared with unstressed control samples using ANOVA and Dunnett's Multiple Comparison test. Also, to compare the degradation rate, the slopes of the linear curves generated using the changing amount of mAb during the stress were compared statistically. The percent monomer changes between the biosimilar and the original were similar at 50°C (P=0.32). Thermal stress raised acidic variant levels in biosimilar (23.1%) and originator (23.1%) products. Acidic variant alterations were associated to Asn deamidation and N-terminal pE. After oxidation stress, intact IgG levels decreased by 34% and 41% for the biosimilar and the original, respectively. While Met256 and Met432 in the Fc region of IgGs were extensively oxidized (<98 %), Met34 in the CDR region of both products was oxidized at an <83 %. Both products were degraded excessively at acidic pH 3.0 conditions. Both products significantly increased the acidic content (<31%) in the basic pH 9.0 condition (P=0.27). The elevated acidic variants was determined to be caused by Asn deamidation, with HC:T35 being the most affected location. As a result of this study, valuable information has been obtained about the originator and degradation mechanisms of biosimilar products, which can be used in the development of biosimilar products.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    760994

    Multipl myelom hastalığında bcma CAR, CD16, IL12 eksprese eden NK92 hücrelerinin (BCMA car haşhaşin) preklinik etkinlik çalışması

    Preclinical effectiveness study of NK92 cells expressing BCMA CAR, CD16, IL12 (BCMA car hashasin) in multiple myelom disease

    İLHAM GAFARLI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    İç HastalıklarıAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE NURDAN TÖZÜN

    PROF. DR. SİRET RATİP

    PROF. DR. ERCÜMENT OVALI

  2. Tez No

    318563

    Novel monoclonal antıbodıes targetıng conformatıonal ERBB2 epıtopes

    Konformasyonal ERBB2 epitoplarini hedef alan özgün monoklonal antikorlar

    CEYHAN CERAN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2012

    Biyoteknolojiİhsan Doğramacı Bilkent Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÖZTÜRK

  3. Tez No

    752917

    Targeting bag-1S/C-raf interaction for therapeutic intervention in cancer

    Bag-1S/C-raf etkileşiminin kanserde terapötik bir yaklaşım olarak kullanılmak üzere hedeflenmesi

    ÖZGE TATLI

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)

    PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY

  4. Tez No

    921612

    Development of a therapeutic monoclonal antibody that targets secreted fatty acid-binding protein aP2 to treat type 2 diabetes

    Tip 2 diyabet tedavisi için salgılanan yağ asidi bağlayıcı protein aP2'yi hedefleyen terapötik bir monoklonal antikorun geliştirilmesi

    MEHMET FURKAN BURAK

    Tıpta Uzmanlık

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    İç HastalıklarıHarvard Unıversıty

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÖKHAN HOTAMIŞLIGİL

  5. Tez No

    412045

    İnvaziv meme karsinom olgularında her2 ekpresyonunun sısh (gümüş insitu hibridizasyon)yöntemiyle tespit edilerek sonuçların immünohistokimyasal ve fısh (floresan insitu hibridizasyon) yöntemleriyle karşılaştırılması

    Determination of her2 status in invasive ductal breast carcinoma using sish and correlation between fish and ihc

    BETÜL ÜNAL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    PatolojiAkdeniz Üniversitesi

    Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FATMA ŞEYDA KARAVELİ

Geri Dön