Investigation of long non-coding RNA and chromatin interactions in HeLa cells
HeLa hücrelerinde uzun kodlanmayan RNA ve kromatin etkileşimlerinin araştırılması
- Tez No: 761693
- Danışmanlar: PROF. DR. BÜNYAMİN AKGÜL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Kodlamayan RNA, Kromatin, Uterin servikal neoplazmlar, Non-coding RNA, Chromatin, Uterine cervical neoplasms
- Yıl: 2022
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İzmir Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
DNA hücre içerisinde histon proteinlerinin etrafına sarılı halde bulunur ve bu yapılar katlanarak nükleozomları oluşturur. Ardından tekrar katlanma gerçekleşerek kromatin yapısı oluşturulur. Bu yapının regülasyonu genlerin okunması için çok önemlidir. Hücrenin durumuna göre katlanmalarda değişiklikler gerçekleşir. Kromatin regülasyonunda uzun kodlamayan RNA'lar (ukmRNA) görev alır. ukmRNA'lar protein kodlama potansiyeli olmayan 200 nükleotitten daha uzun transkriptlerdir. Bu moleküller polyA kuyrukları ve 5' başlarını içerir. Böylece, çekirdekte yer alırlar. ukRNA'lar kromatinle dolaylı ya da direkt yoldan etkileşir. Bu direkt etkileşimler sırasında R-loop ya da triplex yapıları oluşur. Önceki çalışmalarda HEK hücrelerinde ukmRNA'ların kromatin katlanmasında görev alan DNA'lar ile etkileştiği görülmüştür. Kanser hücrelerinde de bu etkileşimler görülebilir. Bu bağlamda iMARGI metodu kullanarak adenokarsinom HeLa hücrelerinde bütün kromatinle etkileşen tüm ukmRNA'ların belirlenmesi hedeflenmiştir. Bu metot kapsamında birbiriyle etkileşim halinde olan DNA ve RNA'lar biyotin içeren bir linker molekülü tarafından birleştirildi. Yeni oluşturulan kompleks streptavidin – biotin etkileşimi ile elde edilmiştir. Sonuç örneği PCR ile çoğaltılarak HeLa hücrelerinde kromatinle etkileşen RNA'ların kütüphanesi oluşturulabilecektir. Gelecekte apoptoz indüklenmiş hücrelerden kütüphaneler oluşturabilir. Bu kütüphanelerden bulunan ukmRNA'lar tedavi amaçlı kullanılma potansiyeline sahiptir.
Özet (Çeviri)
The DNA in the cells is surrounding histone proteins to form nucleosomes. The structure is packed further into chromatin. The chromatin structure is dynamic and flexible. It is regulated by many factors including long non-coding RNAs (lncRNAs). LncRNAs are a class of non-coding RNAs, transcripts that do not encode protein. They are longer than 200 nucleotides and might contain a polyA tail and a 5' cap. Thus, they are localized in the nucleus. lncRNAs interact with chromatin in two ways, indirect and direct. Direct interaction occurs via two mechanisms: R-loop and triplex formation. These interactions affect the folding of chromatin inducing gene expression under various cellular conditions. LncRNAs interacting with chromatin regulating genes are found in HEK cells. Thus, it is hypothesized that lncRNA – chromatin interactions may differ in cancerous cells as well. In this study, the iMARGI method is optimized to be used in adenocarcinoma HeLa cells. The chromatin digestion and incubation conditions are adjusted to give optimal results for HeLa cells. iMARGI is a recently developed method employed to investigate such interactions in a genome-wide manner. iMARGI allows the isolation of all lncRNAs interacting with the whole genome. The interacting RNA – DNA molecules are pulled down with streptavidin conjugated beads after linker ligation. The chimeric molecules are amplified with PCR forming lncRNA – chromatin libraries of HeLa cells. In the future, new libraries can be formed after inducing apoptosis in HeLa cells. Identification of lncRNAs involved in chromatin remodeling in apoptotic conditions can facilitate new therapeutic methods for fighting tumor initiation and development.
Benzer Tezler
- İzmir'de bazı yolların kapatılarak yaya bölgeleri oluşturma da kent peyzajını geliştirme açısından yeniden planlanması üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
BAHAR TÜRKYILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
Şehircilik ve Bölge PlanlamaEge ÜniversitesiŞehir ve Bölge Planlama Ana Bilim Dalı
- Kuyruk modelleri ve analizi üzerine bir uygulama
Başlık çevirisi yok
DİDEM ÖZPULAT
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
İstatistikEge ÜniversitesiBilgisayar Bilimleri ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FİKRET İKİZ
- Samsun ve çevresinde tarla sarmaşığı (conuolvulus arvensis L.)'na karşı biyolojik savaşa esas olacak fauna tespiti
Investigations on the insect fauna of the field binweed (Conuolvulus arvensis L.) related to its biological control in Samsun Province
YASEMİN UFUK GERMAN
- Gebelik ve doğum olgularında prolaktin düzeylerinin değerlendirilmesi
The Evaluation of prolactin values during pregnancy labour and in deliveries
TÜLİN AKAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1987
Kadın Hastalıkları ve DoğumGazi ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. MÜLAZIM YILDIRIM
- Bromtimol mavisi, bromkresol moru ve klorfenol kırmızısı indikatörleri katılmış özel besiyerlerinin sütlerde antibiyotik belirtilmesine uygunluğu üzerine araştırmalar
Başlık çevirisi yok
ESENGÜL TUNCER
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiSüt Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HASAN YAYGIN