Activity of protein kinase C as a function of in-vivo and in-vitro ageing in human skin fibroblast and the role of antioxidants
İn-vivo ve in-vitro yaşlanmanın bir fonksiyonu olarak insan deri fibroblastlarında protein kinaz C aktivitesi ve antioksidanların rolü
- Tez No: 76444
- Danışmanlar: PROF. DR. S. HÜVEYDA BAŞAĞA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1998
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 105
Özet
VI ÖZET Protein kinaz C (PKC), serin - treonine özel kinazlann bir ailesidir. PKC ailesinin üyeleri, hücre büyümesi ve farklılaşması, gen ekspresyonu ve hormon salgılamasını da içine alan çeşitli hücresel fonksiyonlarda önemli bir rol oynamaktadır. Son zamanlardaki çalışmalar, PKC'nin hücresel yaşlanmada da önemli bir rolü olabileceğini göstermiştir. PKC aktivitesinin, 19, 37, 61 ve 71 yaşlarında olan vericilerden elde edilen insan deri fibroblastlarında, yaşın bir fonksiyonu (in vivo yaşlanma) ve 5, 7, 9, 12, 14 numaralı pasajlarda, pasaj sayısının bir fonksiyonu olarak (in vitro yaşlanma) saptanması, esas ilgi alanımızı oluşturmuştur. Elde edilen sonuçlar, PKC aktivitesinin vericinin yaşıyla paralel olarak arttığını ve 61 yaşında en yüksek değere ulaştığını göstermiştir. PKC aktivitesinin, pasaj sayısına bağlı olarak da arttığı bulunmuştur, başka bir deyişle, daha yüksek sayılara pasajlanan hücrelerde, PKC aktivitesi de artmıştır. Buna göre, in vivo ve in vitro yaşlanmayı, PKC aktivitesi bazında karşılaştırmak mümkündür. Bütün deneylerde, PKC aktivitesi forbol miristat asetat (PMA) ilave edilerek ölçülmüş ve sonuçlar pmol/dakika/106 hücre olarak gösterilmiştir. PKC aktivitesi hücre evrelerinin bir fonksiyonu olarak 24 saat boyunca araştırılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre, enzim aktivitesi yaklaşık 15 saat içinde, DNA replikasyonundan önceki periyodu göstermek üzere, en yüksek değerini bulmuştur. Bu sonuçlar [3H] timidin katılımı ile daha ileri düzeyde kontrol edilmiş ve 15 saat geçtikten sonra yükselmeye başlayan, 24 saat civarında en yüksek seviyesine ulaşan cpm (sayım / dakika) değerleri elde edilmiştir. Son olarak, antioksidan maddelerin bu sistemdeki rolünü belirlemek amacıyla, silibin dihemisaksinat (SDH) ve alfa-tokoferolün hücre bölünmesindeki rolü araştırılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre 50 uM alfa-tokoferol kullanımı, konsantrasyona bağlı olarak hücre bölünmesini yüzde 40 engellemiştir. 1 mM konsantrasyonda SDH kullanılması durumunda ise hücre bölünmesi yüzde 49.67 engellenmiştir. Elde edilen bulgular, PKC'nin hücresel işlemlerde ve yaşlanma fenomenindeki önemi yönüyle tartışılmıştır.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Protein kinase C (PKC) is a family of serine and threonine-specific kinases. Members of the PKC family play a key role in a variety of cellular functions including cell growth and differentiation, gene expression and hormone secretion. Recent reports have shown that it may also play an important role in cellular ageing. Our specific area of interest was the determination of PKC activity as a function of age in human skin fibroblasts obtained from different age donors; 19, 37, 61, 71 years old (in vivo ageing) and as a function of passage number; 5, 7, 9,12, 14 (in vitro ageing). Our results indicated that PKC activity increased with the age of the donor, reaching its maximum value at the age of 61. Passage dependent changes on PKC activity were also observed, namely cells which have undergone higher number of passages, showed an increased activity of PKC. In this respect in vivo and in vitro ageing can be correlated in terms of PKC activity. In all cases PKC activity was measured in the presence of phorbol 12-myristate 13-acetate PMA and results were expressed as cpm/min/106 cell. We have further investigated the activity of PKC as a function of cell cycle for 24 hours. We have found that the activity of the enzyme reached its maximum value in approximately 15 hours, indicating the period before DNA replication. These results were further checked by [3H] incorporation which also gave increasing counts per minute (cpm) after 15 hours with a peak around 24 hours. Finally, in order to study the role of antioxidants on this system, we have performed experiments with silibin dihemisuccinate (SDH) and a-tocopherol to investigate their role on cell proliferation. Our results showed that a-tocopherol inhibited cell proliferation by 40 percent in a concentration dependent manner when used at 50 uM. SDH, also inhibited cell proliferation by 49.67 percent at 1 mM concentration. The results are discussed in view of the importance of PKC in cellular processes and cellular ageing phenomena.
Benzer Tezler
- Regulation of cyclin D1 expression by PKC signaling in intestinal epithelial cells
Başlık çevirisi yok
AYSEN ASLI HIZLI
- Cloning, production, purification, and characterization of granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF)
Granülosit-koloni uyarıcı faktörü (G-CSF) klonlanması, üretimi, saflaştırma ve karakterizasyonu
CANSIN KIRMAÇOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2021
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
- Dasatinib ile muamele edilen k562 hücre serisinde, dasatinib'in, pp2a katalitik ve regulatuvar alt birimlerinde, enzim aktivitesine ve protein ekspresyonu üzerine etkisinin değerlendirilmesi
The evaluation of the effects of dasatinib on protein expression and the enzymatic activity of PP2A catalytic and regulatory subunits that are dasatinib-treated k652 cell line
BUKET ÖZEL
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Tıbbi BiyolojiEge ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NUR SELVİ
- Peutz-jeghers sendromlu bireylerde saptanan mutasyonların in-silico analizi
In silico analysis of mutations detected in individuals with Peutz-Jeghers syndrome
DUYGU UZUN ARDA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2023
GastroenterolojiDokuz Eylül Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MESUT AKARSU
- The ubiquitin/proteasome system related role of Bag-1L in breast cancer
Bag-1L'in ubikuitin/proteazom sisteminde rolünün meme kanserinde incelenmesi
SEVİLAY ACAR
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY