Hipoksik koşullar altında skov-3 insan over kanseri hücrelerinden hıf-1α ve pdk1 ekspresyonu üzerine fenforminin etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of phenformin on hif-1α and pdk1 expression from skov-3 human ovarian cancer cells under hypoxic conditions
- Tez No: 784275
- Danışmanlar: DOÇ. DR. HÜLYA ELBE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 93
Özet
Over kanseri, günümüzde en sık görülen jinekolojik kanser tiplerinden biridir, tedavisinde cerrahi-kemoterapi kombinasyonu kullanılmaktadır. Yeni ve etkili kemoterapötiklerin keşfi büyük önem taşımaktadır. Bu çalışmada; kimyasal hipoksi oluşturulan SKOV-3 insan over kanseri hücre hattı üzerine, artan dozlarda fenforminin etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada sırasıyla; kontrol grubu (normoksik), kobalt klorür (CoCl2) uygulanmış hipoksik grup, CoCl2 üzerine artan dozlarda (0.5, 1, 2, 5 mM) fenformin uygulanan hipoksik gruplar olacak şekilde toplam 6 grup oluşturulmuş, 24 saat sonra analizler yapılmıştır. Hücre canlılığı water soluble tetrazolium (WST-1) analiziyle, hipoksi ile indüklenebilir faktör-1α (HIF-1α) ve piruvat dehidrogenaz kinaz-1 (PDK1) ekspresyonu düzeyleri immunositokimya (ICC) boyama yöntemi ve H-Skoru hesaplanmasıyla, apoptotik hücre sayısı Annexin-V analiziyle ve hücre göçü migrasyon analiziyle belirlenmiştir. Analiz sonuçları istatistiksel olarak değerlendirilmiştir. Analizler sonucunda; kimyasal hipoksi oluşturulan SKOV-3 insan over kanseri hücrelerine uygulanan fenforminin hücre proliferasyonunda doza bağlı olarak azalma meydana getirdiği, apoptotik SKOV-3 insan over kanseri hücrelerinin sayısını doza bağlı bir şekilde aktive ettiği tespit edilmiştir. Bu çalışmada, CoCl2 uygulamasıyla HIF-1α ekspresyonunda artış gerçekleştiği belirlenmiştir. Oluşan hipoksik ortamda uygulanan fenformin, hipoksik biyobelirteçlerin ekspresyonunu azaltmıştır. HIF-lα ekspresyonu, hücre canlılığı ve apoptoz analizleriyle korelasyon göstermiştir. Ayrıca fenforminin SKOV-3 insan over kanseri hücrelerinde PDK1 ekspresyonunu inhibe ettiği tespit edilmiştir. Fenformin ile over kanseri hücrelerinin göç etme yeteneği, doza bağımlı şekilde önemli ölçüde azalmıştır. Bu veriler, fenformin tedavisinin hipoksik koşullar altında over kanseri hücrelerinde proliferasyonu engelleyebileceğini ve apoptozu indükleyebileceğini göstermektedir. Bu bulguların over kanseri tanı ve tedavisi için yeni hedeflerin belirlenmesine katkı sağlayacağı, yapılacak olan in vivo araştırmalarda fenforminin kullanımına dikkat çekeceği ve yol göstereceği düşünülmektedir.
Özet (Çeviri)
Ovarian cancer is one of the most common gynecological cancer types today, and a combination of surgery and chemotherapy is used in its treatment. The discovery of new and effective chemotherapeutics is of great importance. The purpose of this study was to look into the effects of increasing phenformin doses in the SKOV-3 human ovarian cancer cell line with chemical hypoxia. In the study, respectively, a total of 6 groups were formed as a control group (normoxic), a hypoxic group treated with cobalt chloride (CoCl2), and a hypoxic group treated with phenformin at increasing doses (0.5, 1, and 2.5 mM) and analyses were made after 24 hours. Cell viability was analyzed by water-soluble tetrazolium (WST-1) analysis, hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) and pyruvate dehydrogenase kinase-1 (PDK1) expression levels were determined by immunocytochemistry (ICC) staining and H-Score calculation, and the number of apoptotic cells was determined by Annexin- V analysis and cell migration was determined by migration analysis. The analysis results were evaluated statistically. As a result of the analysis, it was determined that phenformin administered to SKOV-3 human ovarian cancer cells with chemical hypoxia caused a dose-dependent decrease in cell proliferation and activated the number of apoptotic SKOV-3 human ovarian cancer cells in a dose-dependent manner. In this study, it was determined that there was an increase in HIF-1α expression with CoCl2 application. Phenformin administered in the resulting hypoxic environment decreased the expression of hypoxic biomarkers. HIF-1α expression correlated with cell viability and apoptosis assays. In addition, it was determined that phenformin inhibited PDK1 expression in SKOV-3 human ovarian cancer cells. With phenformin, the ability of ovarian cancer cells to migrate was significantly reduced in a dose-dependent manner. These data suggest that phenformin treatment can inhibit proliferation and induce apoptosis in ovarian cancer cells under hypoxic conditions. It is thought that these findings will contribute to the determination of new targets for the diagnosis and treatment of ovarian cancer and will draw attention to and guide the use of phenformin in future in vivo studies.
Benzer Tezler
- Ovaryum kanserinde mirna'ların otofaji üzerine etkisi
The effect of mirnas on autophagy in ovarian cancer
STEPHEN DAMOLA ARIYELOYE
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyokimyaAnadolu ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZERRİN SELLER
- Analysis of neuroprotection-related gene expression changes by Elk-1 activity under hypoxic conditions
Hipoksik koşullar altında Elk-1 aktivitesine bağlı nörokorunmaya yönelik gen ifadesi değişimlerinin analizi
ERAY ŞAHİN
Yüksek Lisans
İngilizce
2016
BiyomühendislikYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BAYRAM YILMAZ
PROF. DR. IŞIL KURNAZ
- Mide kanserinde hipoksi koşullar altında TNF-α'ya bağlı olarak NRF3 geninin incelenmesi
Investigation of NRF3 gene to TNF-α dependent under hypoxia conditions in stomach cancer
DENİZ KILIÇASLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
GenetikHaliç ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MELİHA BURCU IRMAK YAZICIOĞLU
- HIF1α ve HIF1ß''nın hipoksik koşulda akciğer kanserinde kolektif invazyona etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of HIF1α and HIF1ß' on collective invasion in lung cancer in hypoxic condition
MEHMET YAĞIZ ÇAPANOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiÇukurova ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YASEMİN SAYGIDEĞER
- Pichia pastoris GAP promotoru altında hücre dışı üretilen rekombinant proteinler için yarı-kesikli proses geliştirilmesi
Development of a fed-batch process for the production of recombinant proteins in Pichia pastoris under GAP promoter
SEMİRAMİS YILMAZ
Doktora
Türkçe
2018
BiyomühendislikAkdeniz ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET İNAN