Geri Dön

Beyin hasarı biyobelirteçlerinin biyolojik numunelerden erken teşhisine yönelik analitik yöntem geliştirilmesi

Development of analytical methods for early diagnosis of brain injury biomarkers from biological samples

PDF İndir

  1. Tez No: 788060
  2. Yazar: CEM ERKMEN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. BENGİ USLU, DOÇ. DR. GÖZDE AYDOĞDU TIĞ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Kimya, Pharmacy and Pharmacology, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2022
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 144

Özet

Bu tez çalışması kapsamında, Leptin tayinine yönelik üç farklı özgün elektrokimyasal biyosensör platformunun geliştirilmesi amaçlanmıştır. Bu platformlarda, biyobileşen olarak aptamerler kullanılarak Leptin tayinine yönelik ilk kez elektrokimyasal aptasensörler ve hibrit sensör geliştirilmiştir. İlk aptasensör tasarımında, aptamerlerin yüzeye etkin bir şekilde immobilizasyonu için, perde baskılı elektrotlar titanyum dioksit nanopartiküller ve altın nanopartiküller modifiye edilmiştir. Aptasensörün performasına etki eden aptamer derişimi, immobilizasyon süresi ve Leptin ile etkileşim süresi optimize edilmiştir. Fe(CN)63-/4- redoks molekülünün impedans yanıtları takip edilerek 1,0-100,0 pg/mL ve 100,0-1000,0 pg/mL olmak üzere iki derişim aralığında doğrusallık elde edilmiştir. Bu aptasensör için, teşhis sınırı ve tayin alt sınırı değerleri sırasıyla 0,312 pg/mL ve 1,0 pg/mL olarak bulunmuştur. Leptin tayinine yönelik sandviç tip aptasensörün tasarımı için elektrotların yüzeyi çinko oksit nanopartiküller ve altın nanopartiküller modifiye edilmiştir. Tiyol fonksiyonlu aptamerin derişimi, biyotin fonksiyonlu aptamerin derişimi ve immobilizasyon süresi ve Leptin ile etkileşim süresi optimize edilmiştir. Sandviç yapıda enzim etiketi olarak kullanılan alkalen fosfataz enzimi ve substratı α-naftil fosfat arasındaki reaksiyon ürünü α-naftol'ün akım sinyalleri takip edilerek, 0,01 pg/mL ile 100,0 pg/mL derişim aralığında doğrusallık elde edilmiştir. Bu aptasensör için, teşhis sınırı ve tayin alt sınırı değerleri sırasıyla 0,0035 pg/mL ve 0,01 pg/mL olarak bulunmuştur. Son sensör tasarımında ise, aptamerlerin ve moleküler baskılı polimerlerin benzersiz özellikleri birleştirilerek hibrit sensör geliştirilmiştir. Bu sensör için çalışma elektrodunun yüzeyi platin nanoküreler ve altın nanopartiküller modifiye edildikten sonra, polimer kaplama için polimerizasyon döngü sayısı, uzaklaştırma çözeltisinin uygulama süresi ve Leptin'in yeniden bağlanma süresi optimize edilmiştir. Fe(CN)63-/4- redoks molekülünün akım cevapları takip edilerek 1,0 fg/mL-10,0 pg/mL derişim aralığında doğrusallık elde edilmiştir. Bu hibrit sensör için, teşhis sınırı ve tayin alt sınırı değerleri sırasıyla 0,31 fg/mL ve 1,0 fg/mL olarak bulunmuştur. Geliştirilen üç sensör için de gerçekleştirilen tekrarlanabilirlik, seçicilik, geri kazanım ve stabilite çalışmaları, bu sensörlerin Leptin analizi için mevcut yöntemlere kıyasla daha avantajlı ve alternatif olarak tercih edilebilecek sensörler olduğunu göstermiştir.

Özet (Çeviri)

Within the scope of this thesis, it is aimed to develop three different novel electrochemical biosensor platforms for Leptin determination. In these platforms, electrochemical aptasensors and hybrid sensor were developed for the first time for the determination of Leptin using aptamers as biocomponents. In the first aptasensor design, screen printed electrodes were modified with titanium dioxide nanoparticles and gold nanoparticles for efficient immobilization of aptamers to the surface. Aptamer concentration, immobilization time and interaction time with Leptin, which affect the performance of the aptasensor, were optimized. By following the impedance responses of the Fe(CN)63-/4-redox molecule, the linearity was obtained in two concentration ranges, 1.0-100.0 pg/mL and 100.0-1000.0 pg/mL. For this aptasensor, the limit of detection and lower limit of quantitation were found to be 0.312 pg/mL and 1.0 pg/mL, respectively. For the design of the sandwich type aptasensor for Leptin determination, the surface of the electrodes was modified with zinc oxide nanoparticles and gold nanoparticles. The concentration of thiol-functionalized aptamer, the concentration and immobilization time of biotin-functionalized aptamer, and the interaction time with Leptin were optimized. By following the current signals of α-naphthol, the reaction product between alkaline phosphatase enzyme used as enzyme label in sandwich structure and its substrate α-naphthyl phosphate, the linearity was obtained between 0.01 pg/mL and 100.0 pg/mL concentration range. For this aptasensor, the limit of detection and lower limit of quantitation values were found to be 0.0035 pg/mL and 0.01 pg/mL, respectively. In the final sensor design, a hybrid sensor was developed by combining the unique properties of aptamers and molecularly imprinted polymers. For this sensor, after the surface of the working electrode was modified with platinum nanospheres and gold nanoparticles, the number of polymerization cycles, the application time of the removal solution, and the rebinding time of Leptin were optimized for the polymer coating. By following the current responses of the Fe(CN)63-/4-redox molecule, the linearity was obtained in the concentration range of 1.0 fg/mL-10.0 pg/mL. For this hybrid sensor, the limit of detection and lower limit of quantitation values were found to be 0.31 fg/mL and 1.0 fg/mL, respectively. The reproducibility, selectivity, recovery and stability studies performed for all three sensors have shown that these sensors are more a

Benzer Tezler

  1. Tez No

    755183

    Aksolotl kol rejenerasyonu alanında mikrobiyota ve transkriptom verisinin madenciliği vasıtasıyla yeni aday biyobelirteçlerin keşfi

    Discovery of novel candidate biomarkers in the field of axolotl limb regeneration through mining of axolotl microbiota and transcriptome data

    MUHAMMED MUSTAFA ÖGDÜR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Biyoistatistikİstanbul Medipol Üniversitesi

    Sağlık Sistemleri Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ KIVANÇ KÖK

  2. Tez No

    719267

    Levamizolün model organizma Galleria mellonella'nın tüm gelişim evreleri ve antioksidan enzim aktiviteleri üzerine etkisi

    The effect of levamisole on developmental stages and antioxidant enzyme activities of model organism Galleria mellonella

    VOLKAN KELEŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    BiyokimyaZonguldak Bülent Ecevit Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ENDER BÜYÜKGÜZEL

  3. Tez No

    689145

    Geriatrik ürolojik onkolojik cerrahilerde postoperatif kognitif disfonksiyon ve beyin hasarı biyobelirteçlerinin ilişkisi

    The relationship of postoperative cognitive dysfunction and brain injury biomarkers in geriatric urologic oncologic surgery

    EMRE ŞENTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Anestezi ve Reanimasyonİstanbul Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MELTEM SAVRAN KARADENİZ

  4. Tez No

    652425

    Travmatik beyin hasarı tanısında serum biyobelirteçlerinin kullanılması

    USE of serum biomarkers in the diagnosis of traumatic brain injury

    NADIRA NABIYEVA

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıMersin Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALİ ERTUĞ ARSLANKÖYLÜ

  5. Tez No

    693159

    Deneysel serebral iskemi modelinde kan-beyin bariyeri biyobelirteçlerinin değerlendirilmesi

    Evalution of blood-brain barrier biomarkers in experimental cerebral i̇schemia model

    GÜL TAŞLI YEŞİLÇAYIR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    NörolojiAydın Adnan Menderes Üniversitesi

    Acil Tıp Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ YUNUS EMRE ÖZLÜER

Geri Dön