Geri Dön

Farklı büyüme faktörleri içeren hedeflenmiş nanopartiküllerin nöral kök hücre farklılaşması üzerine etkilerinin incelenmesi

Investigation of the effects of targeted nanoparticles containing different growth factors on neural stem cell differentiation

PDF İndir

  1. Tez No: 803250
  2. Yazar: AYŞEGÜL AÇIKSARI
  3. Danışmanlar: PROF. DR. YUSUFHAN YAZIR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biyomühendislik, Biology, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Nöral kök hücreler, nanopartiküller, kan-beyin bariyeri, Parkinson hastalığı, Neural stem cells, nanoparticles, blood-brain barrier, Parkinson's disease
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Kocaeli Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Kök Hücre ve Doku Yenilenmesi Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 136

Özet

Amaç: Sunulan bu tez çalışmasında büyüme faktörü taşıyan nanopartiküller (Np) aracılığıyla dopaminerjik nöron kaybı sonucu ortaya çıkan Parkinson hastalığının tedavisi için sıçan beyninden elde edilen nöral kök hücrelerin (NKH) dopaminerjik nöronlara farklılaştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: Çalışmada öncelikle BDNF, GDNF ve TGF-ß3 yüklü, salım yaparak hücrelere ve mikroçevresine içeriğini aktaran, hücrelerin farklılaşmaya yönlenmesini sağlayan polimerik PLGA Np'ler çift emülsiyon yöntemi ile üretilmiştir. Farklı büyüme faktörü taşıyan Np'ler çeşitli kombinasyonlar halinde kullanılmış, bu partiküllerin in vitro ortamda NKH'lerin dopaminerjik nörona farklılaşması üzerine etkileri karşılaştırmalı olarak incelenmiştir. Farklılaşan hücrelerin gen düzeyinde analizleri gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) ile nöral belirteçlerin ekspresyonları incelenerek yapılmıştır. Hücrelerin protein düzeyindeki değişimleri immünfloresan ve ELISA çalışmaları ile belirlenmiştir. Elde edilen Np'lerin, transferrin (TRF) antikoru ile konjuge edildiğinde hedeflenebilir olduğu in vitro kan beyin bariyeri (KBB) modelinde gösterilmiştir. Bulgular: Sonuç olarak büyüme faktörü yüklü Np'lerin kullanıldığı in vitro farklılaştırma sonrasında nöron benzeri morfolojiye sahip hücreler elde edilmiştir. Bu hücrelerde NKH belirteci olan Nestin geninin ekspresyonu değişmezken tirozin hidroksilaz (Th) geni ekspresyonunun yaklaşık 300 kat artış gösterdiği belirlenmiştir. Aynı zamanda bu hücrelerin dopaminerjik nöron belirteci olarak kabul edilen mikrotübül bağlantılı proteini (Map2) ürettiği floresan mikroskopta gösterilmiştir. Oluşturulan in vitro KBB modelinde TRF antikoru ile konjuge edilen Np'lerin hedefe spesifik olarak yönlendiği ve NKH içlerine alındığı coumarin-6 boyası aracılığı ile gösterilmiştir. Sonuç: Sonuç olarak büyüme faktörü yüklü Np'ler ile yapılan in vitro farklılaştırma sonrası gruplarda belirgin farklar olduğu ve üç büyüme faktörünü de içeren Np'lerin kullanıldığı grupta daha etkin farklılaşma gerçekleştiği gözlenmiştir. Ayrıca antikor konjuge edilen Np'lerin NKH'lere daha hızlı ulaşabildiği gösterilmiştir. Bu çalışma sonucunda elde edilen veriler ile Np'ler ve NKH'lerin Parkinson hastalığı tedavisinde ortak kullanımları ile ilgili yeni bir yaklaşım olabileceği ortaya konmuştur.

Özet (Çeviri)

Objective: In this thesis, it is aimed to differentiate rat brain derived neural stem cells (NSC) into dopaminergic neurons for the treatment of Parkinson's disease caused by loss of dopaminergic neurons by means of growth factor loaded nanoparticles (Np). Method: In this study, BDNF, GDNF and TGF-ß3 loaded polymeric PLGA Np's which transfer their contents to the cells and their microenvironment via releases have been produced by double emulsion method. Np's carrying different growth factors were used in various combinations, and the effects of these particles on the differentiation of NSC's into dopaminergic neuron in in vitro environment were examined comparatively. Gene-level analyzes of differentiated cells were performed by examining the expressions of neural markers by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). Changes in the protein level of the cells were determined by immunofluorescence and ELISA studies. It has been shown that the Np's can be targeted when conjugated with transferrin (TRF) antibody in the in vitro blood brain barrier model (BBB). Results: It was determined that cells with neuron-like morphology were obtained after in vitro differentiation with growth factor loaded Np's. It was determined that the Nestin gene, which is a NSC marker, did not increase in these cells, but the expression of the tyrosine hydroxylase (Th) gene increased approximately 300 times. At the same time, it was demonstrated under fluorescence microscope that these cells produce microtubule-associated protein (Map2), which is considered a dopaminergic neuron marker. In the in vitro BBB model, it has been shown by the coumarin-6 dye that Np's conjugated with TRF antibody is directed specifically to the target and taken into the NSC. Conclusion: As a result, it was observed that there were significant differences in the groups after in vitro differentiation with growth factor-loaded Np's, and more effective differentiation was observed in the group in which Np's containing all three growth factors was used. In addition, it has been shown that antibody conjugated Np's can reach NSC's faster. As a result of this study, a new approach has been developed for a possible use of Np's and NSC's in the treatment of Parkinson's disease.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    847488

    Sağlıklı ve kanserli meme hücre hatlarında biyotinilasyon yardımıyla karşılaştırmalı sekretom analizi

    Comparative secretome analysis with the aid of biotinylation in healthy and cancerous breast cell lines

    ELİF AKINCI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Tıbbi BiyolojiKocaeli Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. GÜRLER AKPINAR

  2. Tez No

    895472

    Detecting binding activity of a therapeutic monoclonal antibody targeting vascular endothelial growth factor using surface plasmon resonance

    Vasküler endotelyal büyüme faktörünü hedeleyenterapötik monoklonal antikorun bağlanma aktivitesinin yüzey plazmon rezonans ile belirlenmesi

    SERİM ERDEM

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ABDULHALİM KILIÇ

  3. Tez No

    810798

    Damar endotel hücrelerinin büyümesi, çoğalması ve canlılığını koruyabilmesi için gerekli faktörlerin belirlenmesi ve bu faktörlerin fonksiyonlarının damar oluşumu üzerinden incelenmesi

    Determining of the factors necessary for the growth, proliferation and survival of vascular endothelial cells and the functions of these factors

    EBRU ÖNER USTA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyoteknolojiMersin Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FURKAN AYAZ

  4. Tez No

    599793

    Büyüme faktörleri içeren fibrin ağının sinüs ogmentasyonundaki etkinliğinin klinik, histolojik ve histomorfometrik analizi

    Başlık çevirisi yok

    İHSAN ÇAĞLAR ÇİNAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Diş Hekimliğiİstanbul Üniversitesi

    Oral İmplantoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SERDAR YALÇIN

  5. Tez No

    515539

    Konsantre büyüme faktörü uygulanmış titanyum yüzeylerinde osteoblast cevabı

    Osteoblast response on titanium surfaces treated with concentrated growth factor

    İSMAİL ONUR ŞAHİN

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Diş HekimliğiOrdu Üniversitesi

    Periodontoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. CEREN GÖKMENOĞLU

Geri Dön