Plazma proteinleri arasındaki ilişkinin kimyasal çapraz bağlama yöntemiyle değerlendirilmesi
The Definition of relation between the plasma proteins by the chemical cross-linking method
- Tez No: 80892
- Danışmanlar: PROF. DR. İNCİ ÖZER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: protein konjugasyonu, çapraz bağlayıcılar, dimetil süberimidat. iv, protein conjugation, cross-linking agents, dimethyl suberimidate
- Yıl: 1999
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 51
Özet
ÖZET Sığır serum albumini (BSA) ve insan aı-proteinaz inhibitörü (aıPI) ile kimyasal bir çapraz bağlayıcı olan dimetil süberimidat (SI) arasmdaki kenetlenme tepkimeleri kinetik ve ürün dağılımı açısından incelendi. 0.2 M N- tris (hidroksimetil) metil 4-amino bütan sülfonik asit (TAPS) (pH 8.5) tamponunda, 25°C'de yapılan çalışmada çapraz bağlanma kinetiği, protein yapı probu olarak kullanılan 8-anilino-l-naftalin sülfonik asidin (ANS) fluoresansmda meydana gelen değişiklik üzerinden izlendi. Ürün dağılımı, Sephadex G-200 jel kromatografisi ve sodyum dodesüsülfat-poliakrilamid jel elektroforezi ile belirlendi. Sığır serum albumini ile, 0.25-1.0 mg protein/ml ve 2.5-10 mM dimetil süberimidat kullanılarak yapılan deneylerde, çapraz bağlanmaya bağlı 8- anilino-1-naftalin sülfonik asidin fmoresans (protein konformasyon) değişikUğinin kinetik açıdan protein ve dimetil süberimidat derişirninden bağrmsız olduğu ve bir iç-dönüşümü yansıttığı bulundu. Deney koşullarında çapraz bağlanma ile ilgili hız sabiti (kBsA), 4.8+0.8 x 10“2 dk”1 bulundu. Benzer koşullarda aı-proteinaz inhibitörü için bulunan hız sabiti 1.4x10“ dk”idi. Ürün analizlerinde, yalnızca albumin çözeltilerinde, bu proteinin doğal dimerleşme eğilimi paralelinde, intermoleküler çapraz bağlanma (kalıcı dimerleşme) gözlendi, aı-proteinaz inhibitörü, moleküller arası kenetlenme göstermedi. Dimetil süberimidatm normalde kompleks veya agregat olarak bir arada bulunmayan proteinleri çapraz bağlanma özelliği bulunmadığı sonucuna varıldı.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT The cross-linking reactions of bovine serum albumine (BSA) and ai- proteinase inhibitor (aiPI) with dimethyl suberimidat (SI) were studied with respect to kinetics and product distribution. The reactions were carried out in 0.2 M N-tris (hydroxymethyl) methyl 4-amino butan sulfonic acid (TAPS) buffer (pH 8.5) at 25°C, using 8-anilino-l- naphthalene sulfonic acid (ANS) as a fluorescent probe for monitoring changes in protein structure. Product distribution was determined by Sephadex G-200 gel permeation chromatography and by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Experiments at [BSA]=0.25-1.0 mg/ml and [SI]=2.5-10 mM showed the change in 8-anilino-l-naphthalene sulfonic acid (ANS) fluorescence (i.e.protein conformation) was Itinetically independent of protein and reagent concentrations; the change in protein conformation reflected an intramolecular process. The rate constant for the cross-linking reaction (kBsA) was 4.8±0.8xl0*2 min“1. The corresponding value in the cross-linking of ar proteinase inhibitor was found to be 1.4xl0”2 min"1. Products analysis showed that intermolecular cross-linking was achieved only in solutions of bovine seum albumine, which has a natural tendency to dimerize. Cross-linking oligomers of cti-proteinase inhibitor were not observed. It was concluded that dimethyl suberimidate is ineffective in cross- linking protein species which do not normally form complexes or aggregates.
Benzer Tezler
- The role of oxidative stress factors in the pathophysiology of Ocular Rosacea, analysis of tears and other materials
Oküler Rosacea patofizyolojisinde oksidatif stres faktörlerinin rolü, gözyaşı ve diğer materyallerin analizi
NİLÜFER YEŞİLIRMAK
Doktora
İngilizce
2023
BiyokimyaGazi ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NESLİHAN BUKAN
PROF. DR. JEAN-LOUIS BOURGES
- Piridazinon-üre türevi yeni bileşiklerin sentezi ve biyolojik aktiviteleri üzerine çalışmalar
Studies on synthesis and biological activity of novel pyridazinon-urea derivatives
AROOJ BAKHT
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Eczacılık ve FarmakolojiGazi ÜniversitesiFarmasötik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDEN BANOĞLU
- WNT--reseptör kompleksinin hücre membranı alanlarındaki aktivasyonunun moleküler mekanizmalarının anlaşılması
Understanding the molecular mechanisms of the WNT-receptor complex activation on cell membrane region
AYŞE YAĞMUR AZBAZDAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Tıbbi BiyolojiDokuz Eylül ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HATİCE GÜNEŞ ÖZHAN
- Preeklampside anjiyogenez faktörleri ile plazma proteomu arasındaki ilişkinin değerlendirilmesi
Assessment of the relation between angiogenesis factors and plasm proteome in preeclampsia
VİLDAN YAMAN
Doktora
Türkçe
2021
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİNE ŞEKÜRE NAZLI ARDA
PROF. DR. ALİ BENİAN