Geri Dön

Proprotein konvertaz subtilisin/keksin Tip 9 (PCSK9) proteininin damar düz kas hücrelerindeki reseptörlere, gen ve protein ekspresyonuna olan etkilerinin gösterilmesi

Demonstration of the effects of proprotein convertase subtilisin/kexin Type 9 (PCSK9) protein on receptors, gene, and protein expression in vascular smooth muscle cells.

PDF İndir

  1. Tez No: 812110
  2. Yazar: ECE YURTSEVEN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. OĞUZ ÖZTÜRK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Kardiyoloji, Moleküler Tıp, Cardiology, Molecular Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Moleküler Tıp Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 112

Özet

Proprotein Konvertaz Subtilisin/Keksin Tip 9 (PCSK9), hiperlipidemiye neden olan, ancak damar duvarı hücrelerine yaptığı etkiler son zamanlarda dikkat çeken bir moleküldür. PCSK9'un damar düz kas hücrelerine (DDKH) inflamatuar ve proliferatif etkilerini hangi reseptör ve mekanizmayla yaptığı belirsizdir. Çalışmamızda susturucu RNA (siRNA) ile PCSK9'un DDKH'deki olası reseptörleri LDL ilişkili reseptör1 (LRP1) ve çok düşük molekül ağırlıklı reseptör (VLDLR)'leri susturarak inflamasyonda önemli rolü olan bir transkripsiyon faktörü, nükleer faktör kappa b'nin (NF-kB) nükleer translokasyonunu, immunoflorasan yöntemle değerlendirdik. PCSK9'un siRNA uygulanmamış, kontrol siRNA ve LRP1 siRNA uygulanmış insan aortik düz kas hücrelerinde (iADKH) NF-kB translokasyonuna neden olduğunu, VLDLR siRNA ile NF-kB translokasyonunun engellendiğini, ancak VLDLR siRNA LRP1 siRNA ile beraber uygulandığında PCSK9 ile yeniden NF-kB nükleer translokasyonu olduğunu gözlemledik. İkinci aşamada iADKH'de PCSK9 ve NF-kB protein ekspresyonuna, aterojenik maddeler uygulanan insan umblikal ven hücreleri (HUVEC)'lerinin etkisini değerlendirdik. HUVEC'ler 300 μM H2O2, 40μg/ml okside LDL (Ox-LDL) ve %5 sigara duman ekstraktı (SDE) ile 24 saat inkübe edilerek süpernatantları alındı, iADKH bu süpernatantlarla 48 saat inkübe edildi. Takiben iADKH'den protein ekstraksiyonu ve Western Blot analizi yapıldı. SDE, H202 ve Ox-LDL uygulanmış HUVEC süpernatantı ile inkübe edilen iADKH'de PCSK9 (p= 0.034, p=0.0137, p=0.037) ve NFkB ekpresyonunun arttığı (p=0.024, p=0.043) ancak Ox-LDL ile NF-kB artışının anlamlı düzeye ulaşmadığı (p=0.089) saptandı. Sonuç olarak PCSK9'un iADKH'inde inflamasyonu tetiklediğini, bu etkinin VLDLR'ünün inhibisyonu ile engellenebileceğini, HUVEC'lerin aterojenik uyaranlara maruz kaldıklarında iADKH'deki PCSK9 ve NF-kB protein ekspresyonunu arttırdığını gösterdik. Bu bulgular aterokleroz mekanizmasında PCSK9 ve DDKH'nin ilişkisinin rolünü anlamaya katkıda bulunacaktır.

Özet (Çeviri)

Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9's (PCSK9) direct atherosclerotic effects have been recently recognised; however, its receptors on vascular smooth muscle cells (VSMCs) remain unclear. We silenced the potential receptors of PCSK9, LDL receptor-related protein1 (LRP1) and very low-density lipoprotein receptor (VLDLR) with siRNA, treated human aortic smooth muscle cells (HASMCs) with PCSK9, and evaluated the nuclear translocation of nuclear factor kappa B (NF-kB). We observed NF-kB translocation with PCSK9 in HASMCs without siRNA, with control siRNA and with LRP1 siRNA. NF-kB translocation was inhibited in VLDLR siRNA applied HASMCs, but when VLDLR siRNA and LRP1 siRNA were co-applied, nuclear translocation was observed again. We evaluated the effect of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) on PCSK9 and NF-kB protein expression in HASMCs. HUVECs were incubated with 300 μM H2O2, 40 μg/ml oxidised LDL (Ox-LDL), and 5% cigarette smoke extract (CSE) for 24 hours, and the supernatants were collected. Then, the HASMCs were incubated with supernatants for 48 hours. Western Blot analysis were performed to analyse the protein expressions in HASMC. Increased PCSK9 (p=0.034, p=0.0137, p=0.037) and NF-kB expression (p=0.024, p=0.043) was recognised; however, the increase in NF-kB with Ox-LDL did not reach a significant level (p=0.089). In conclusion, we demonstrated that PCSK9 triggers inflammation in HASMCs which can be inhibited by VLDLR inhibition. We also showed that exposure of HUVECs to atherogenic stimuli, increased PCSK9 and NF-kB protein expression in HASMCs. These findings will contribute to our understanding the relationship of PCSK9 and VSMC in the mechanism of atherosclerosis.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    910676

    Otizm spektrum bozukluğu olan çocuklarda proprotein konvertaz subtilisin/keksin tip 9 (PCSK9) düzeyinin serum lipid düzeyleri ve otizm belirtileri ile ilişkisi

    The relationship of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) levels with serum lipid levels and autism symptoms in children with autism spectrum disorder

    ÇİĞDEM YILMAZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    PsikiyatriSelçuk Üniversitesi

    Çocuk ve Ergen Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ HASAN ALİ GÜLER

  2. Tez No

    247518

    PCSK9 ve HMG KoA redüktaz gen polimorfizmlerinin koroner kalp hastalarında serum lipid profiline etkilerinin incelenmesi

    Effects of PCSK9 and HMG CoA Reductase gene polymorphisms on serum lipid profile in patients with coronary heart disease

    AYŞEGÜL BAŞAK AKADAM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    Genetikİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HÜLYA YILMAZ

  3. Tez No

    684898

    Ağır obstrüktif uyku apne sendromu tanısı alan erkek olgularda serum adropin ve PCSK9 düzeylerinin araştırılması

    Investigation of serum adropin and PCSK9 levels in male patients diagnosed with severe obstructive sleep apnea syndrome

    LEVENT DENİZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyokimyaSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HALE ARAL

  4. Tez No

    586432

    Göz tutulumu olan ve olmayan behçet hastalarında serum sortilin düzeylerinin lipid metabolizması ile ilişkisi

    The relationship between serum sortilin levels and lipidmetabolism in behcet's patients with and without ocular involvement

    ŞEYDANUR TURGUT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Biyokimyaİstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEYNEP GÜLNUR ANDİCAN

  5. Tez No

    456030

    Missed abortus ve istemli evokuasyon olgularının endometriyumlarında proprotein konvertaz dağılımı

    Distribution of proprotein convertases in endometrium of missed abortion and voluntary first trimester evacuation cases

    BURCU KAHRAMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Histoloji ve EmbriyolojiCelal Bayar Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KEMAL ÖZBİLGİN

Geri Dön