Geri Dön

Safra asitlerinin biyolojik örneklerden tayini için Sk-kS/KS yönteminin geliştirilmesi ve validasyonu

Development and validation of LC-MS/MS method for the determination of bile acids from biological samples

  1. Tez No: 822543
  2. Yazar: KADRİ GÜLEÇ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. EROL ŞENER
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Kimya, Pharmacy and Pharmacology, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2023
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Anadolu Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 79

Özet

Safra asidi atipik steroid molekül olup karaciğer enzimleri ve bağırsak bakterileri tarafından kolesterolden sentezlenir. Birincil ve ikincil safra asidi olarak ikiye ayrılır. Safra asitleri sentez basamaklarında konjuge hale gelerek farklı safra asitlerini oluşturur. Günümüzde başta analitik kimya olmak üzere çok çeşitli alanda farklı birçok analizde kullanılmakta olan sıvı kromatografisi/kütle spektrometresi (SK-KS/KS), biyolojik numune analizlerinde de yüksek hassasiyete sahip olması sebebiyle sıklıkla kullanılmaktadır. Yirmi üç farklı safra asidi ve bir tane iç standart kullanılarak, biyolojik örneklerde safra asidi tayini için SK-KS/KS parametreleri ve farklı sabit fazların optimizasyonu yapılmıştır. Optimizasyon için parçalama voltajları, parçalama enerjileri, iyon kaynağı, iyonlaştırıcı ajan, iyon modu gibi MS parametreleri her bir safra asidi için optimize edilmiş, hareketli faz, sıcaklık, akış hızı gibi parametreler ile sabit fazlar denenmiştir. Elde edilen optimizasyon parametrelerine göre negatif iyonlaştırma modunda, elektrosprey iyon kaynağı ile 100 x 3,00 mm, 1,8 µm, 95 Å, C18 sabit fazı kullanılarak 60 °C sıcaklıkta, %0,5 formik içeren su ve %20 asetonitril içeren metanol hareketli fazı ile analiz yapılmıştır ve optimum çalışma şartlarında ICH M10 biyoanalitik validasyon kılavuzuna göre validasyonu yapılmıştır. Kan, idrar ve gaita örnekleri kantitatif analiz için hazırlama prosedürü uygulanarak analiz edilmiştir. Analiz sonuçları ICH M10 biyoanalitik validasyon kılavuzunda belirtilen limitler çerçevesinde değerlendirilmiştir.

Özet (Çeviri)

Bile acid is an atypical steroid molecule synthesised from cholesterol by liver enzymes and intestinal bacteria. It is divided into primary and secondary bile acids. Bile acids become conjugated in the synthesis steps and form different bile acids. Today, liquid chromatography/mass spectrometry (LC-MS/MS), which is used in many different analyses in many different fields, especially in analytical chemistry, is frequently used in biological sample analysis due to its high sensitivity. LC-MS/MS parameters and different stationary phases were optimised for bile acid determination in biological samples using twenty-three different bile acids and one internal standard. For optimisation, MS parameters such as fragmentation voltages, fragmentation energies, ion source, ionising agent, and ion mode were optimised for each bile acid, and parameters such as mobile phase, temperature, flow rate, and stationary phases were tested. According to the obtained optimisation parameters, the analysis was performed in negative ionisation mode with an electrospray ion source, 100 x 3.00 mm, 1.8 µm, 95 Å, using C18 stationary phase at a temperature of 60 °C, with water containing 0.5% formic acid and methanol mobile phase containing 20% acetonitrile, and validated according to the ICH M10 bioanalytical validation guideline under optimum operating conditions. Blood, urine, and stool samples were analysed by applying the preparation procedure for quantitative analysis. The analysis results were evaluated within the limits specified in the ICH M10 bioanalytical validation guideline.

Benzer Tezler

  1. Safra kesesi operasyonu olan insanlarda mide mukozasında hTERT expresyonu ve c-MYC aktivasyonu

    hTERT expression and c-MYC activation in the gastric mucosa in humans with gallbladder operations

    ELMAS KASAP

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    BiyolojiManisa Celal Bayar Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET KORKMAZ

    DOÇ. DR. SEDA SABAH ÖZCAN

  2. Deneysel koledok kanal tıkanıklığı sonrası oluşan bakteriyel translokasyon üzerine taurodeoksikolik asit ve moksifloksasinin etkisi

    Effect of tauroursodeoxycholic acid and moxifloxacin on bacterial translocation after experimental bile duct obstruction

    HÜSEYİN AKSOY

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Genel CerrahiTrakya Üniversitesi

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SERHAT OĞUZ

  3. Assessment of the effects of melatonin on the funtional deficits induced by cellular stress in obese donor derived mesenchymal STEM cells

    Melatonin'in obez donor mezenkimal kök hücrelerinde hücresel strese bağlı olarak oluşan fonksiyon bozuklukları üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi

    ECE GİZEM POLAT

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATİMA SUSANNA FAUSTINA AERTS KAYA

  4. İnvaziv meme kanserinde primer tümör ve metastatik lenf nodlarında amacr ekspresyonunun immunhistokimyasal olarak boyanma derecesinin prognostik önemi ve sağkalıma etkisi

    Prognostic significance of immunohistochemical staining degree of amacr expression in primary tumor and metastatic LYMPH nodes in invasive breast cancer and its effect on survival

    MEHMET MERT AKGÜN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    OnkolojiÇanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ LOKMAN KORAL

  5. Molecular cloning, expression and characterization of bile salt hydrolase enzymes from Lactobacillus rhamnosus KPB7 and E9

    Lactobacillus rhamnosus KPB7 ve E9 suşlarından safra tuzu hidrolaz enzimlerinin moleküler klonlanması, ekspresyonu ve karakterizasyonu

    YEŞİM KAYA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    BiyoteknolojiAbant İzzet Baysal Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET ÖZTÜRK