The investigation of the effects of mechanistic target of rapamycin inhibition and melatonin treatment on glioblastoma In Vitro
Rapamisinin mekanistik hedefinin inhibisyonu ve melatonin tedavisinin glioblastoma üzerindeki etkilerinin In Vitro araştırılması
- Tez No: 879728
- Danışmanlar: PROF. DR. BURCU GEMİCİ BAŞOL, DR. CİHAN SÜLEYMAN ERDOĞAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Fizyoloji, Physiology
- Anahtar Kelimeler: In vitro, Glioblastoma, Melatonin, Rapamisin, Fizyoloji, In vitro, Glioblastoma, Melatonim, Rapamycin, Physiology
- Yıl: 2024
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Yeditepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Fizyoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Rapamisinin Mekanistik Hedefinin İnhibisyonu ve Melatonin Tedavisinin Glioblastoma Üzerindeki Etkilerinin in vitro Araştırılması, Yeditepe Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Fizyoloji Anabilim Dalı, Yüksek Lisans Tezi, İstanbul. Evre IV astrositom olan glioblastoma multiforme (GBM), yüksek malignite ve kötü prognoz ile en yaygın primer beyin tümörüdür. Standart tedavi, tümörün rezeksiyonunu takiben radyoterapi veya radyoterapi ve kemoterapi kombinasyonunu içerir. Fosfatidilinositol 3-kinaz /AKT/rapamisinin mekanistik hedefi (mTOR) yolunun GBM'de sıkça deregüle olduğu belirtilmiştir. Melatonin (MTN) bir indolik hormon olup antikanser aktivitesi hem in vitro hem de in vivo olarak kapsamlı bir şekilde incelenmiştir. Ancak, MTN'nin GBM üzerindeki etkisini araştıran çalışmalar sınırlıdır. Bu nedenle bu çalışmada, MTN uygulamasının ve rapamisinin (Rapa) ile mTOR inhibisyonunun GBM canlılığı üzerindeki etkisinin in vitro olarak araştırılması amaçlanmıştır. İnsan GBM hücre hatları A172, U87 ve LN-18 %10 FBS ve %1 PSN içeren DMEM' içinde %5 CO2 nemlendirilmiş atmosferde 37°C'de muhafaza edilmiştir. Rapa ve MTN'nin sitotoksisitesi, hücrelerin Rapa ve MTN ile tek başına veya kombinasyon halinde 24 ve 48 saat süreyle muamele edilmesinin ardından WST-1 kolorimetrik proliferasyon testi ile belirlenmiştir. Hücre canlılığı daha sonra ölçülmüş ve iki yönlü ANOVA testi, tedaviler ve hücre hatları arasındaki istatistiksel farkları araştırmıştır. Rapa ve MTN, GBM hücre canlılığını hatlarda farklı şekilde azaltmıştır; 24 saatte MTN, 100 ve 400 μM dozlarında U87 hücre hattında hücre canlılığını önemli ölçüde azaltırken A172 hücre hattında aynı etki gözlenmemiştir (U87: p<0,001 Kontrole göre ve U87 vs. A172: p<0,0001). Rapa, 48 saatte 20 nM dozunda A172 hücrelerinde daha etkili olmuştur (p<0.001). Öte yandan, 100 nM Rapa+400 μM MTN tedavisi, her iki zaman noktasında da U87 hücre hattında A172'ye göre daha etkili olmuştur (p<0,001). İn vitro sonuçlarımız, MTN ve Rapa ile kombinatoryal tedavinin GBM tedavisinde bir seçenek olabileceğini önermektedir. Ancak, GBM'de genetik altyapı farklılıklarının (örneğin, tümör mutasyonları) önemine dikkat edilmelidir. Ayrıca, Rapa ve MTN'nin GBM üzerindeki etkinliğini ve etki mekanizmasını aydınlatmak için mekanistik ve in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT Elbanouni, Eman Elsaid. (2024) The investigation of the Effects of Mechanistic Target of Rapamycin Inhibition and Melatonin Treatment on Glioblastoma in vitro, Yeditepe University, Institute of Health Sciences, Department of Physiology, Master thesis, İstanbul. Glioblastoma multiforme (GBM), grade IV astrocytoma, is the most common primary brain tumor with high malignancy and poor prognosis. The standard therapy includes the resection of the tumor followed by radiotherapy or radiotherapy and chemotherapy combination. The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/AKT/mechanistic target of the rapamycin (mTOR) pathway is indicated to be frequently deregulated in GBM. Melatonin (MTN) is an indolic hormone, and its anticancer activity has been extensively studied both in vitro and in vivo. However, studies investigating the effect of MTN on GBM are limited. Therefore, in this study, the effect of MTN and mTOR inhibition with rapamycin (Rapa) on GBM viability was aimed to be investigated in vitro. The human GBM cell lines A172 (ATCC® CRL-7899™) and U87 (ATCC® HTB-14™) were maintained in DMEM containing 10 % FBS and 1% PSN at 37 °C under 5% CO2 humidified atmosphere. Cytotoxicity of Rapa and MTN were determined by WST-1 colorimetric proliferation assay (Roche, 5015944001) following treating the cells with Rapa and MTN either alone or in combination for 24 and 48 h in 96-well culture plates. The cell viability was then measured, and a Two-way ANOVA test investigated statistical differences between the treatments and the cell lines. Rapa and MTN differentially decrease GBM cell viability as at 24 h, MTN significantly reduced the cell viability at 100 and 400 μM doses in U87 but not A172 cell line (U87: p<0.001 vs. Control and U87 vs. A172: p<0.0001), while Rapa was more effective in A172 cells at 48 h at 20 nM (p<0.001). On the other hand, 100 nM Rapa + 400 μM MTN treatment was more effective in U87 than in the A172 cell line (p<0.001) at both time points. Our in vitro results suggest that combinatorial treatment with MTN and Rapa may be an option for treatment in GBM. However, one should note the importance of genetic background differences (i.e., tumor mutations) in GBM. Additionally, in vivo and mechanistic studies are needed to elucidate Rapa and MTN's effectiveness and effect mechanism on GBM.
Benzer Tezler
- Investigation of the genes and proteins in mechanistic target of rapamycin (mTOR) pathway and effects of rapamycin on lifespan of a calanoid copepod species, Acartia tonsa
Rapamisinin mekanik hedefi (mTOR) yolağındaki gen ve proteinlerin incelenmesi ve rapamisinin kalanoid kopepod türü Acartia tonsa'nın ömrü üzerine etkilerinin araştırılması
CİHAN SÜLEYMAN ERDOGAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2015
BiyolojiRoskılde UnıversıtetFen Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BENNİ WİNDİNG HANSEN
DOÇ. DR. OLE VANG
- Sıçanlarda streptozotosin nedenli diyabet modelinin ovaryum histomorfolojisi, insülin sinyal yolağı ve oksidatif stres üzerine etkilerinin araştırılması: Kersetinin terapötik değeri
Investigation of the effects of streptozotocin-induced diabetes on ovarian histomorphology, insulin signaling pathway, and oxidative stress in rats: The therapeutic potential of quercetin
ELİF NAZ YALÇIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2026
Beslenme ve DiyetetikGazi ÜniversitesiBesin Analizleri ve Beslenme Bilim Dalı
PROF. DR. MÜRŞİDE AYŞE DEMİREL
- Estrojen pozitif kanser hücrelerinde PI3K/AKT/mTOR bağımlı proliferasyonda sparstoloninin etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of sparstolonin on PI3K/AKT/mTOR-dependent proliferation in estrogen positive cancer cells
YAĞMUR DİLBER
Doktora
Türkçe
2025
Moleküler TıpAkdeniz ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUTAY ASLAN
- Parkinson hastalığı ve akciğer kanserinde dj-1 ve αlfa-sinüklein'in ortak PI3K/AKT yolağı üzerindeki etkilerinin karşılaştırılması
Comparison of the effects of the DJ-1 and alpha-synuclein in common Pİ3K/AKT pathway in parkinson's disease and lung cancer
NAZLI YALÇINKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Biyolojiİstanbul ÜniversitesiSinir Bilimi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERDEM TÜZÜN
- Investigation of RIG-I responses under hypoxic conditions in microglia
Mikroglialarda hipoksik koşullar altında RIG-I yanıtlarının araştırılması
YAĞMUR ÖZÇELEBİ
Yüksek Lisans
İngilizce
2025
Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. CEREN ÇIRACI MUĞAN