Geri Dön

Rekombinant DNA teknolojisi ile floresan protein üretimi

Fluorescent protein production with recombinant DNA technology

  1. Tez No: 909620
  2. Yazar: EBRU KABOĞLU
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GAYE ÖNGEN ÖZGEN, PROF. DR. SERAP EVRAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Otoindüksiyon, yeşil floresan protein, E.coli, optimizasyon, Autoinduction, green fluorescent protein, E.coli, optimization
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyomühendislik Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 52

Özet

Otoindüklenebilir kültür ortamları kullanılarak gerçekleştirilen biyoproses uygulamalarında bir operatör gereksinimi duyulmaması ayrıca sentetik indükleyici uygulamaları ile karşılaştırıldığında da üretim ortamı maliyetinin düşük olması ve sisteme müdahale ihtiyacını azaltması açısından değerlendirildiğinde büyük ölçekli üretim proseslerinde E. coli gibi protein ekspresyonunu lac operonu kontrolünde gerçekleştiren hücreler için sıklıkla tercih edilen kültür ortam koşulunu sağlamaktadır. Bu çalışmada, E. coli'de rekombinant yeşil floresan protein üretimi bir model olarak seçilerek üretimde farklı kültür koşulları değerlendirilmiştir ve en uygun koşul üzerinden maliyeti azaltmaya yönelik bir optimizasyon çalışması yapılmıştır. Sonuçta optimize edilen yeni ortamda 1,18 mg/ml konsantrasyonunda geleneksel IPTG indüklemesi yapılan LB ortamında ise 0,6 mg/ml konsantrasyonunda protein elde edilmiştir. Yapılan optimizasyon çalışması ile birlikte kültür ortamındaki tripton konsantrasyonu % 33,6 oranında azaltılmıştır ve daha düşük maliyetli bir üretim ortam kompozisyonu elde edilmiştir. Optimize edilen yeni üretim ortamı ve kontrol olarak IPTG indüklemesi yapılan LB üretim ortamında 2L karıştırmalı tank biyorektörde gerçekleşen üretimlerde protein konsantrasyonunda LB ortamında %130 optimize edilen yeni ortamda %45,2 artış hesaplanmıştır. Bu bulgular, verimli ve uygun maliyetli büyük ölçekli rekombinant protein üretimi için optimize edilmiş ortamın potansiyelini vurgulamaktadır.

Özet (Çeviri)

Using autoinducible culture media in bioprocess applications eliminates the need for an operator and, compared to synthetic inducer applications, reduces production costs and the need for system intervention. This makes it a preferred culture condition for large-scale production processes involving cells like E. coli that express proteins under the control of the lac operon. In this study, recombinant green fluorescent protein production in E. coli was selected as a model, and different culture conditions were evaluated. An optimization study was conducted to reduce costs based on the optimal condition identified. As a result, in the optimized new medium, a protein concentration of 1.18 mg/ml was obtained, while in the traditional IPTG-induced LB medium, a concentration of 0.6 mg/ml was achieved. The optimization reduced the tryptone concentration in the culture medium by 33.6%, resulting in a more cost-effective production medium composition. In the production processes carried out in a 2L stirred-tank bioreactor, protein concentration increases of 130% in the LB medium and 45.2% in the optimized new medium were calculated. These findings highlight the potential of the optimized medium for efficient and cost-effective large-scale recombinant protein production.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    436405

    pTOLT vektörünün modifikasyonu ve UnaG floresans proteininin Escherichia coli de üretilmesi

    Modification of pTOLT vector and production of UnaG fluorescent protein in E.coli

    ERMAN KORKMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaGaziosmanpaşa Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İSA GÖKÇE

  2. Tez No

    780992

    Faj reseptör bağlayıcı proteinin rekombinant eldesi ve hedefli terapötik nanopartikül tasarımı

    Recombinant production of phage receptor binding protein and design of targeted therapeutic nanoparticles

    SENANUR DOKUZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyomühendislikYıldız Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. TÜLİN ÖZBEK

    PROF. DR. SERAP DERMAN

  3. Tez No

    637249

    Evaluation of interactions between SKOV3 cells and HER2 targeted monoclonal antibody with quartz crystal microbalance with dissipation as a novel approach

    Disipasyonlu kuvars kristal mikroterazi ile SKOV3 hücreleri ve HER2 hedefli monoklonal antikor arasındaki etkileşimlerin değerlendirilmesi

    HATİCE EKER

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    Biyolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FATMA NEŞE KÖK

  4. Tez No

    688848

    Recombinant production and characterization of serine protease enzyme from Virgibacillus sp. AGTR strain using site directed mutagenesis

    Virgibacillus sp. AGTR suşundan izole edilen serin proteaz enziminin bölgeye yönelik mutagenez yöntemi kullanılarak rekombinant üretimi ve karakterizasyonu

    EVRİM KAPUCU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Biyokimyaİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER

  5. Tez No

    444260

    Generation and validation of genome editing tools for mouse CatSper β & Ɣ using CRISPR/Cas9 and split-EGFP systems

    Fare CatSper β & Ɣ genlerinin CRISPR/Cas9 ve ayrık-EGFP sistemleri için genom değiştirme araçlarının oluşturulması ve doğrulanması

    YUSUF İŞERİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    Genetikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER

    YRD. DOÇ. DR. JEAN-JU L.CHUNG

Geri Dön