Geri Dön

Ratlarda gastrik hasar üzerine muscari neglectum bitkisinin su ekstraktının etkilerinin bazı biyokimyasal parametrelerle araştırılması

Investigation of the effects of the water extract of the plant muscari neglectum on gastric damage in rats with some biochemical parameters

PDF İndir

  1. Tez No: 940833
  2. Yazar: MENEKŞE SOYDAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. GÜLNUR ARABACI, PROF. DR. NECATİ UTLU
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Kimya, Biyokimya, Chemistry, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2025
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Sakarya Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Bu çalışmada Sakarya ilinden toplanan Muscari neglectum (MN) bitkisinin toprak üstü kısmının su ekstraktının antioksidan aktivitesi ve fitokimyasal içeriklerinin tespit edilmesi, canlı vücudunda meydana getireceği akut toksisitesinin belirlenmesi, indometazin (İND) ile deneysel olarak oluşturulan gastrik ülsere karşı koruyucu etkisinin biyokimyasal parametreler ve histopatolojik gözlemler ile değerlendirilmesi amaçlanmaktadır. Çalışmada kullanılan Muscari neglectum bitkisi Sakarya ilinden toplanarak kurutulmuştur. Su infüzyonu için bitki: su oranı 1:10 olacak şekilde 60oC'de 30 dakika boyunca çalkantılı su banyosunda 250 rpm'de ekstrakte edilmiştir. Ekstraktlar Whatman tipi süzgeç kâğıdından süzülerek -80oC'de 24 saat dondurulduktan sonra liyofilizatörde soğuk vakum altında kurutulmuştur. Ekstraksiyon işleminden sonra, toplam fenolik bileşik ve flavonoid madde, serbest radikal giderim aktivitesi (DPPH), indirgeyici antioksidan kapasitesi (CUPRAC), metal şelatlama aktivitesi (MCA) ve indirgeme kapasitesi analizleri (FRAP) spektrofotometrik yöntemle, fitokimyasal içerikleri ise sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (LC-MS/MS) ile yapılmıştır. 24 adet akut toksisite ve 36 adet mide ülser modeli (n=6) için toplam 60 adet Sprague Dawley ırkı erkek ratlar kullanılmıştır. Akut toksisite testi için ratlar sağlıklı; 500, 1000, 2000 mg / kg MN verilerek 4 gruba ayrılmıştır. Toksik etki semptomları 24 saat boyunca takip edilmiştir. Ratlarda herhangi bir toksik etki gözlenmediği, verilen limit dozun 1/5, 1/10, 1/20 seçilerek, sağlıklı; indometazin (25 mg/kg); referans [40 mg/kg famotidin (FAM)] ve MN ekstraktının üç farklı dozu (100, 200, 400 mg/kg) olmak üzere 6 gruba ayrılmıştır. Sağlıklı grup hariç tüm gruplara, dozlar uygulandıktan 5 dk sonra İND ratlara oral olarak verilmiştir. Ratlar 6 saat sonunda hafif sevofloran anestezisi altında sakrifiye edilmiştir. Tüm hayvanların mideleri açılıp serum fizyolojik ile yıkanmış ve makroskobik olarak incelenmiştir. Dokulardan alınan kesitler hemotoksilen eosin boyaması yapılarak histopatalojik olarak değerlendirilmiştir. Biyokimyasal olarak, mide dokularında katalaz (CAT), süperoksit dismutaz (SOD) enzimlerinin aktiviteleri ile glutatyon (GSH), malonaldehit (MDA) düzeyleri sandviç enzim bağlı immun ölçüm (ELISA) kitleri kullanılarak analiz edilmiştir. Muscari neglectum bitkisinin liyofilize ekstraktından, %14,974 g verim sağlanmıştır. Toplam fenolik ve flavonoid içerikleri sırasıyla; 26,0±1,21 mg GAE/g, 0,45±0,05 mg KUE/g bulunmuştur. DPPH, MCA, FRAP analizleri % inhibisyon değerleri artan konsantrasyona bağlı olarak lineer artış göstermiştir. CUPRAC sonuçlarımız 0,06 µM TE olarak bulunmuştur. Yapılan LC-MS/MS analizinde fumarik asit, protokatekuik asit, floridzin dihidrat ve mirisetin bileşikleri (sırasıyla 0,30281874; 0,16369329; 0,02561198; 0,01061646 mg/g ekstre) yoğun bulunurken, asetohidroksamik asit, kafeik asit, siringik asit, resveratrol, kaempferol, gallik asit, 4-hidroksibenzoik asit, salisilik asit, kuersetin ve luteolin bileşiklerinin de (sırasıyla 0,0066244; 0,00280178; 0,00575919; 0,00322667; 0,00270288; 0,00455979; 0,00475702; 0,0015531; 0,00627964; 0,00278937 mg/g ekstre) bulunduğu dikkati çekmektedir. Deneysel çalışmalarda verilen MN dozlarının 24 saatlik akut toksisite değerlendirmesi sonucunda, ratlarda herhangi bir davranış değişikliği ve ölüme neden olmadığı belirlenmiştir. Muscari neglectum su ekstraktının tüm dozlarının indometazinin indüklediği gastrik mukozal hasarlanmayı önlediği, en güçlü antiülser etkinin % 69 ile 400 mg/kg grubu (p<0,001), referans grubuyla benzer etkiler gösterdiği bulunmuştur. Muscari neglectum grupları ile İND grubunun SOD aktivitesi karşılaştırıldığında 400MN grubu, CAT aktivitesi tüm gruplarda ve GSH düzeylerinde ise 200MN ve 400MN istatiksel olarak anlamlı (p<0.0001) artış, MDA düzeylerinde 200MN ve 400MN gruplarında istatiksel olarak anlamlı (p<0.0001) azalış gözlenmiştir. Muscari neglectum antioksidan etkilerden dolayı indometazin ile indüklenen mide ülserinde gastroprotektif etkiler göstermiş, en etkili dozunun 400 mg/kg olduğu görülmüştür. Muscari neglectum su ekstraktının mide dokusu histopatalojik gözlemleri, İND ile karşılaştırıldığında, 200 MN ve 400MN ekstraklarının, hasar bulgularını (lamina epitelyaliste erezyon, epitellerde dejenerasyon ve nekroz, damarlarda hiperemi) istatiksel olarak anlamlı (p˂0.05) azalttığı tespit edilmiştir. Muscari neglectum su ekstraktının invitro antioksidan analizlerinin sonuçları ve içeriğindeki fenolik bileşiklerin varlığı, MN'nin su ekstraktının iyi bir antioksidan etkiye sahip olduğunu göstermiştir. Bu çalışma kapsamında, İndometazin ile oluşturulan ülser modelinin ratlar üzerindeki invivo çalışmaların biyokimyasal analizleri ve histopatolojik incelemeleri, Muscari neglectum'un su ekstresinin mide ülserine karşı koruyucu etki göstermiştir. Bu pozitif etkinin Muscari neglectum bitkisinde bulunan antioksidan özelliğe sahip biyomoleküllerden kaynaklandığı düşünülmektedir. Yapılan literatür çalışmalarında MN bitkisinin su ekstresinin mide hastalıkları üzerine etkisini araştıran bilimsel bir çalışmaya rastlanmamıştır. Bu çalışmanın Muscari neglectum ile yapılacak diğer araştırmalar için önemli bir referans olacağı öngörülmektedir.

Özet (Çeviri)

The objective of this thesis was to find out the antioxidant activity and phytochemical content of the water extract of the above-ground part of Muscari neglectum (MN) from Sakarya city, to determine its acute toxicity in the living body, and to evaluate its positive effect against gastric ulcer induced by indomethacin (IND) by biochemical parameters and histopathological observations. The above-ground parts of the Muscari neglectum plant utilised in this study were collected from the Sakarya region, thoroughly washed to remove any extraneous matter, and then dried in the shade at room temperature. For water infusion, the plant was extracted at 60°C for 30 minutes with a plant: water ratio of 1:10. The extract solution was filtered with Whatman type filter paper and frozen at -80°C for 24 hours and then dried in a lyophiliser under cold pressure. After extraction, free radical scavenging activity (DPPH), reducing antioxidant capacity (CUPRAC), iron (II) ion chelating activity (MCA), reducing capacity (FRAP), total phenolic compounds and flavonoids, were analysed by spectrophotometric method and phytochemical contents were identified by LC-MS/MS (liquid chromatography-tandem mass spectrometry). A total of 60 male Sprague-Dawley rats were utilised in the course of the study, with 24 rats employed in acute toxicity models and 36 in gastric ulcer models (n=6). For acute toxicity test, rats were divided into 4 groups according to healthy, 500, 1000, 2000 mg/kg body weights by giving Muscari neglectum plant. The toxic effect symptoms were followed for 24 hours. Rats were distributed into 6 groups as healthy; indomethacin (25 mg/kg); reference [40 mg/kg famotidine (FAM)] and the different concentrations of the Muscari neglectum above- ground water extract (100, 200, 400 mg/kg) by selecting 1/5, 1/10, 1/20 of the given limit dose. In all groups except the healthy group, indomethacin was given orally to the rats 5 min after the doses were administered. The rats were sacrificed under the influence of mild sevofluorane anaesthesia six hours after the experimental application. The stomachs of all the used animals were cut out along the large quartur, rinsed with saline and observed macroscopically. Sections taken from the tissues were histopathologically evaluated by haemotoxylated eosin staining. Biochemically, the activities of the antioxidan enzymes [superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT)] and glutathione (GSH), malonaldehyde (MDA) levels in stomach tissues were analysed using sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. The rutls showed that the lyophilised water extract of the above-ground part of Muscari neglectum plant yielded 14.974 g%. Total phenolic and flavonoid comppounds were 26.0±1.21 mg GAE/g and 0.45±0.05 mg KUE/g, respectively. The % inhibition values of, free radical scavenging activity (DPPH), iron (II) ion chelating activity (MCA), reducing capacity (FRAP), analyses showed a linear increase with increasing concentration. Our reducing antioxidant capacity (CUPRAC), results were found as 0.06 µM TE. According to LC-MS/MS analysis results, fumaric acid, protocatechuic acid, phloridzin dihydrate and myricetin compounds (0.30281874; 0.16369329; 0.02561198; 0.01061646 mg/g extract, respectively) were found intensely, while acetohydroxamic acid, caffeic acid, syringic acid, resveratrol, kaempferol, gallic acid, 4-hydroxybenzoic acid. It is noteworthy that acid, salicylic acid, quercetin and luteolin compounds (0.0066244; 0.00280178; 0.00575919; 0.00322667; 0.00270288; 0.00455979; 0.00475702; 0.0015531; 0.00627964; 0.00278937 mg/g extract, respectively) are also present. It was determined that the doses of Muscari neglectum administered in the experimental studies did not cause any behavioural alterations (e.g. strange behaviours, eating habits, sleep, tremor, abnormal vocalisation, sensitivity to sound) or result in fatality in rats as a consequence of a 24-hour acute toxicity evaluation. These findings demonstrated that the above-ground water extracts of Muscari neglectum plant did not cause any toxic effects at a dose of 2000 mg/kg. The findings of the study demonstrated that all concentrations of the water extract of the above-ground part of Muscari neglectum plant were able to prevent indomethacin-induced gastric mucosal damage, the strongest antiulcer effect was found in the 400 mg/kg group with 69% (p<0.001), showing similar effects with the reference group. When the Muscari neglectum groups were compared with the IND groups, a statistically significant (p<0.0001) increase was observed in SOD activity in the 400MN group, CAT activity in all groups and GSH in 200MN and 400MN, whereas a statistically significant (p<0.0001) decrease in MDA was observed in the 200MN and 400MN groups. The high antioxidant content of the water extract of the above-ground part of the Muscari neglectum plant has been demonstrated to offer gastroprotective effects in a model of gastric ulceration induced by indomethacin in rats and the most effective dose was found to be 400 mg/kg. When the histopathological observations of Muscari neglectum water extract in gastric tissue were compared with indomethacin, it was found that 200 MN and 400 MN extracts significantly (p˂0.05) reduced the damage findings (lamina epithelialis erosion, epithelial degeneration and necrosis, hyperaemia in vessels). Consequently, it was demonstrated that water extracts of the above-ground part of the Muscari neglectum plant did not cause toxic effects at a dose as high as 2000 mg/kg, and the phenolic components contained in its content had a protective effect on indomethacin-induced gastric damage in rats. It showed this effect by decreasing MDA levels and increasing SOD, CAT, GSH levels. It was also found that the gastroprotective effect increased depending on the dose of water extract of the plant. These effects were also supported by histopathological findings. The protective effect of three different doses (100, 200, 400 mg/kg) of the aqueous extract of Muscari neglectum aerial part against gastric ulcer induced experimentally by indomethacin was investigated by biochemical parameters (SOD, CAT enzyme activities, GSH and MDA levels) and histopathological observations. It was found that the above-ground water extract of Muscari neglectum had a protective effect against gastric ulcer and this effect is thought to be due to the biomolecules with antioxidant properties in the plant component. In the life of living organisms, radical compounds that are toxic to living organisms are formed by various effects during external influences and metabolic reactions, and these cause aging and cell-based harmful effects in living organisms. Phenolic compounds are the most effective molecules in preventing these effects. Furthermore, phenolic compounds have been shown to possess antioxidant properties and to exhibit antiulcer effects. In view of these findings, the combinations of phenolic components in the content of Muscari neglectum above-ground water extracts could be considered as a distinct alternative treatment modality to drugs such as FAM, which is used as a reference, by acting on multiple targets (antioxidant + acid regulator + anti-inflammatory). Further studies are recommended to isolate the synergistic effects of the compounds in Muscari neglectum content from the plant and to conduct clinical studies. It is suggested that this plant can be used as a protective against gastric damage in humans. The results of invitro antioxidant analyses of Muscari neglectum water extract and the existence of phenolic compounds in its content showed that the water extract of Muscari neglectum has very good antioxidant effect. In the context of this study, biochemical analyses and histopathological examinations of in vivo studies on gastrit ulcer model mice showed protective effect of Muscari neglectum water extract against gastric ulcer. It is believed that this positive effect is due to the antioxidant biomolecules present in the Muscari neglectum plant. A thorough examination of the available literature revealed no scientific studies on the effects of water extracts from Muscari neglectum plants on stomach diseases. It is predicted that this study will be an important reference for other researches to be conducted with Muscari neglectum.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    379339

    Maclura pomifera bitkisinden izole edilen osajin maddesinin ratlarda indometazin ile oluşturulan gastrik hasar üzerine etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of osajin substance isolated from maclura pomifera plant on indomethacin-induced gastric damage in rats

    HÜSEYİN SERKAN EROL

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Veteriner HekimliğiAtatürk Üniversitesi

    Veterinerlik Biyokimyası Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MESUT BÜNYAMİ HALICI

  2. Tez No

    414998

    Maclura pomifera bitkisinden izole edilen pomiferin maddesinin ratlarda indometazin ile oluşturulan gastrik hasar üzerine etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of pomiferin substance isolated from maclura pomifera plant on indomethacin-induced gastric damage in rats

    İLYAS BOZKURT

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Eczacılık Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MESUT BÜNYAMİ HALICI

    YRD. DOÇ. DR. ESRA DİLEK

  3. Tez No

    142346

    Ratlarda termal injuriye bağlı oluşan gastrik mukozal hasarda trimetazidinin koruyucu etkisi

    Başlık çevirisi yok

    ARZU DİDEM YALÇIN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    GastroenterolojiPamukkale Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ALİ KESKİN

  4. Tez No

    236890

    Kserostomi oluşturulan rat modelinde gastrik reflünün östaki tüp fonksiyonları üzerine olan olumsuz etkilerine karşı tükürüğün koruyucu etkileri

    Protective effects of saliva against harmfull effects of gastric reflux on eustachian tube functions in a xerostomised rat model

    TAMARA ARSLANTAŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Kulak Burun ve BoğazSüleyman Demirel Üniversitesi

    Kulak Burun Boğaz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA TÜZ

  5. Tez No

    334326

    Maclura pomifera bitkisinin su ekstresinin ratlarda indometazinle oluşturulan ülser modeli üzerine etkilerinin araştırılması ve antioksidan mekanizmasının incelenmesi

    The research of the effects of water extracts of maclura pomifera plant over the ulcer model in rats formed by using indomethacin and the analysis of antioxidant mechanisms

    RECAİ ACİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyokimyaAtatürk Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MESUT BÜNYAMİ HALICI

    DOÇ. DR. Zekai HALICI

Geri Dön